1、仪器分析实验二：对羟基苯甲酸酯类混合物的液相色谱分析归一化法定量目的要求：、1、 熟悉高效液相色谱分析操作。、2、 学习高效液相色谱保留值定性方法和归一化法定量。基本原理：保留值定性见实验一。归一化法定量的计算公式：c%=fi Ai /fi Ai*100对羟基苯甲酸酯类混合物属于同系物，具有相同的生色团和助色团，因此它们在紫外光度检测器上具有相同的校正因子，所以上式可简化为： c%=Ai / Ai*100、 仪器Angile 1100 高效液相色谱仪、 试剂1、 对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯、异戊醇等均为分析纯2、 甲醇为色谱纯3、 水是娃哈哈纯净水。
2、4、 标准溶液的配制：（1） 标准使用液 浓度均为 10g/ml的对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯的甲醇溶液。（2）标准混合使用液：将上述四种标准储备液混合，混匀备用。、 实验条件1、 色谱柱 长 150mm、内径 4.6mm，填装 C-8 烷基键合相，颗粒度为5m的固定相。2、 流动相 甲醇：水（70：30），流量：1.2ml/min3、 检测器 紫外光度检测器 254nm4、 进样量 3l、 实验步骤1、 过滤流动相2、 过滤样品3、 仪器操作，待基线平直即可进样4、 分别吸取 3l 四种标准使用液和标 准混合液进样， 记录，并各重复两次。、 数据及处理1、测量四种对羟基苯甲酸酯化合物色谱图的保留时间。t1 t2 t3 平均值对羟基苯甲酸甲酯对羟基苯甲酸乙酯对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯2、依次测量标准混合液色谱图上各色谱峰的保留时间，确定各色谱峰代表的是何种化合物。t1 t2 t3 平均值 相应化合物峰 1峰 2峰 3峰 43 测 量 标准混合液色谱图上各色谱峰的峰高，半峰宽，计算各组分的峰面积及其含量。峰高 半峰宽 峰面积 C%对羟基苯甲酸甲酯对羟基苯甲酸乙酯对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯思考题：1、高效液相色谱流动相为何要脱气？2、本实验为何可以不用相对质量校正因子？
