1、2019/6/2,1,血脂四项的测定,临床生物化学与分子生物学教研室,临床生物化学及检验,2019/6/2,2,血浆中所含脂类统称为血脂，血脂含量可以反映体内脂类代谢的情况。检测血脂时，常在饭后12-14小时采血。 我国血脂异常防治建议和美国国家胆固醇教育计划成人治疗计划 （NCEP-ATP ）都要求临床常规血脂测定中应至少测定TC、TG、HDL-C及LDL-C这四项。有条件的实验室可测定apoAI、apoB及Lp(a)。,2019/6/2,3,【目的要求】,掌握：TC、HDL-C、LDL-C、TG测定的基本原理。 熟悉：TC、HDL-C、LDL-C、TG测定的操作过程。 了解：TC、HDL-
2、C、LDL-C、TG测定对动脉粥样硬化、原发性高脂血症等疾病诊断的临床意义。,2019/6/2,4,实验原理-总胆固醇测定（胆固醇氧化酶-过氧化物酶法）,胆固醇酯+H2O 胆固醇+脂肪酸胆固醇+1/202 +H2O 4-胆甾烯-3-酮+H2022H202+4-氨基安替比林+酚 醌亚胺+4H2O,样品中游离及脂化的胆固醇，经过上述反应产生醌亚胺，在505nm波长处测定其吸光度值，计算其含量。,2019/6/2,5,实验原理-HDL-C测定,加入低密度脂蛋白胆固醇的抑制剂，将低密度和极低密 度部分隐蔽起来，直接测定高密度部分的胆固醇含量， 显色反应原理同总胆固醇，在510nm波长处测定吸光度值，计
3、算 其含量。,LDL-C能与磷钨酸-镁和聚乙二醇复合剂作用产生沉淀，用分散剂可使沉淀颗粒细小均一，在630nm处测定其吸光度值，计算其含量。,实验原理-LDL-C测定,2019/6/2,6,实验原理-TG测定（甘油磷酸氧化酶-过氧化物酶法）,2H202+EHSPT+4-AAP,甘油三酯+H2O,甘油+脂肪酸,甘油+ATP,3-磷酸甘油+ADP,3-磷酸甘油+O2,磷酸二羟丙酮+H202,醌亚胺+4H2O,2019/6/2,7,主要试剂,2019/6/2,8,主要试剂、器材,器材： 分光光度计、半自动生化分析仪、恒温水浴箱、微量进样器、移液管等。 待测标本：血清,2019/6/2,9,1、将试剂
4、1与试剂2按1:1比例混匀为工作液。 2、按表格加样。,3、比色 ：混匀各管，置37水浴10 min，用分光光度计比色，波长505nm，光径1.0cm，以空白管调零，记录各管的吸光度值。,总胆固醇测定步骤,2019/6/2,10,1、将试剂1与试剂2按10:1比例混匀为工作液。 2、按表格加样。,3、比色 ：混匀各管，置37水浴10 min，用分光光度计比色，波长510nm，光径1.0cm，以空白管调零，记录各管的吸光度值。,HDL-C测定步骤,2019/6/2,11,1、按表格加样。,2、比色 ：混匀各管，室温放置3 min，用分光光度计比色，波长630nm，光径1.0cm，以空白管调零，记录各管的吸光度值。,LDL-C测定步骤,12,TG测定步骤,2019/6/2,1、按表格加样。,2、上机，仪器设置：37，波长546nm，以空白管调零，记录各管的吸光度值。,2019/6/2,13,计算：按下列公式计算,2019/6/2,14,注意事项,1、每组4位同学，分别做TC、HDL-C、LDL-C、TG的操作。 2、加样前先认准工作液、血清标本（记清标本号）、标准品。 3、比色杯一定要冲洗干净，测定时比色杯一定要放正，对准光源，拉杆时动作要轻，不能太用力。,
