1、1生物农药研究进展由于控制全球化合物生物积聚的呼吁越来越强烈、新化学农药开发耗资巨大和周期延长、农业害虫对化学农药抗药性日益增强，以及生物技术飞速发展带来的冲击,当今农药研究、开发和生产应用等正面临选择方向挑战，生物农药以其独特的优势迎来了新的发展机遇。1 生物农药的发展在农药的发展历史中,生物农药是最古老的一类。 周礼秋官就有“莽草熏之” “焚牡菊，以灰洒之”等防治害虫的记述; 古罗马也有使用藜芦防治忍鼠类和昆虫的民间传说。19 世纪以来,开发应用生物成分防治有害物逐渐从以经验上升到科学试验阶段，如除虫菊、鱼藤和烟草的应用。20 世纪早期,微生物学的发展，特别是苏云金杆菌(Bacillus
2、thuringiensis，以下简称 Bt)的发现促进了微生物农药的开发。20 世纪 30 年代以来，几类植物内源激素先后被发现和利用，20 世纪 40 年代后，由于有机合成化学农药的发展,使生物成分农药的研究开发被相对忽视而发展缓慢，这段时期基于 B.popillae、Bt 的产品在美国上市.20 世纪 60 年代，化学农药的弊端暴露出来,生物农药的研究又受到重视.在最近的几十年中，生物农药得到了长足发展，如农用抗生素、活体微生物农药等15,30。20 世纪末，植物农药(或转基因植物农药)等的出现,极大丰富了生物农药的内容。2 生物农药的内涵不同学者、不同机构、组织对生物农药的内涵意见不同。
3、过去，生物农药就是指“微生物农药” 。后来，其概念发展为“相对于化学农药而言的天然资源的生理活性物质，用于农药的有微生物、植物(除)虫菊” 、菸碱等)、昆虫(性引诱剂、变态激素等)”11。FAO(中文名称)(1988)将其定义为生物害物控制剂(Biological pest control agents)，包括生物化学农药和微生物农药，将传统的鱼藤酮、烟碱等具有直接毒性的物质排除在生物农药之外。 中国农业百科全书农药类中生物农药(biogenic pesticides)是指利用生物资源开发的农药；狭义概念，指直接利用生物产生的天然活性物质或生物活体作为农药；广义概念，还包括按天然物质的化学结构
4、或类似衍生结构人工合成的农药。随着科技的发展,生物农药的内涵发生了巨大变化,英国作物保护委员会根据来源将生物农药分为五类,来自微生物、植物、动物的相关基因也包括在内。美国环保署农药部(EPA)将生物农药(Bio-pesticides) 分为三大类，其中一类为植物农药(Plant-pesticides)或转基因植物农药 将基因植入植物体内的农药，使得生物农药的概念进一步地得到延伸。2001 年农业部参考 FAO 和 EPA 的定义界定了生物农药的内涵，加强了我国生物农药的管理工作。在这些定义中,完全仿生物合成的化合物、人工合成与天然产物相同的化合物、人工合成的衍生物(如烯虫酯、米满等)、转基因植
5、物，以及鱼藤酮、烟碱等具有直接毒性的天然产物农药的归属存在分歧。2笔者认为，张兴等(2002) 对生物农药内涵的界定较为科学。生物农药是可以用来防治病、虫、草等有害生物的生物体本身及源于生物，并可作为“农药”的各种生理活性物质.在对概念范畴界定时,将完全仿生物合成的农药、人工合成的相同化合物( 天然产物) 、转基因植物以及鱼藤酮、烟碱等具有直接毒性的天然产物农药列为生物农药；而人工合成的衍生物(如烯虫酯、米满等)不属生物农药。3 生物农药的研究与利用生物农药的研究和利用，前人从不同侧面有过精彩的论述，以下按来源对生物农药进行概述。3.1 植物源农药概述据统计，全世界至少有 25 万种不同植物，
6、而在化学性质上进行过调查研究的仅占 10%,作为农药研究的更少。1959 年版的中国土农药志就包括 220 种植物农药13 。植物源农药包括植物体内的次生代谢物质和转基因植物农药4。1977 年就报道，植物中次生代谢物质超过 40 万种；主要有糖苷类、萘酮类、酚类、萜烯类、生物碱类、甾类、黄酮类、香豆素类、异丁基酚胺类、蛋白质类、酸类、噻吩类等化合物2，4，20。3.1.1 植物源杀虫剂Grainge 和 Ahmed(1988)报道，约有 2400 种植物具有控制害虫的生物活性，我国对杀虫植物研究也取得相当大的成就4，13，19，24。植物杀虫有效成份主要是生物碱类、萜烯类、萘醌类、黄酮类，甾
7、类等20，22，24；对昆虫具有毒杀、拒食、引诱、驱避、绝育、调节昆虫发育等作用3，4，20，23。生物碱类是植物中最毒的成份20，对昆虫具有毒杀、拒食和抗生活性，主要有烟碱、百部碱、藜芦碱、苦参碱、喜树碱、次喜树碱、乌头碱等，多数已在我国登记56 ；在国外，烟碱、藜芦碱、尼鱼丁等很早就已使用6，22。萜烯类主要具有拒食、内吸、毒杀、麻醉、忌避及一定的生长抑制作用，代表性的有川楝素、印楝素、苦皮藤素、闹羊花素等20，此外还有茶皂素。国外印楝素已商品化，国内川楝素、印楝素、苦皮藤素、茶皂素等已商品化。萘醌和黄酮类广泛存在于植物中，对昆虫表现为拒食和抗生作用20，代表性种类有胡桃醌20 、类鱼藤酮
8、、鱼藤酮6 、苦参素等；后两种在我国已商品化。甾类具有拒食、毒杀和抗生作用，主要有 Nic-1 和 Nic-2，及植物质蜕皮酮、羊角扭总甙20 。羊角扭总甙已在我国实用化。光活化毒素和植物精油是植物源杀虫剂中两类独特的成份.光活化毒素在光照下对害虫的杀伤力成几倍甚至上千倍的提高，是具有发展前景的一类物质。植物精油是一类分子量较小的植物次生代谢物质，主要分为萜烯类、芳香族类、脂肪族类和含氮含硫化合物，主要对昆虫具有驱避或引诱、拒食、抑制生长发育、毒杀等作用。茴芹油、香茅油、桉树油、天竺葵油、茉莉油、柠檬草油、桔油等已在美国商品化，国内商品化种类极少。33.1.2 植物源杀菌剂与植物源杀虫剂相比，
9、植物杀菌剂研究较少2。Wilkins 等曾报道有 1389种植物有可能作为杀菌剂。植物中的抗毒素、类黄酮、特异蛋白、有机酸、酚类化合物，以及诱导产生的抗菌活性物质均有杀菌或抗菌活性，诱导产生的抗菌活性物质化学结构类型有:豌豆类、异黄酮、苯并呋喃衍生物、芪类、呋喃乙炔类、多烯、番薯酮、三萜烯、倍半萜烯、异香豆素等。植物源混合脂肪酸14、小檗碱在我国已商品化，MAP 在日本已工业化生产 27。3.1.3 植物源除草剂植物源除草剂主要是利用植物的异生相克物质。植物产生的某些次生代谢物质，释放到环境中能影响附近同种或异种植物的生长,包括刺激或抑制作用。目前已在 30 多个科的植物中发现了上百种具有除草
10、活性的物质，主要是肉桂酸衍生物、香豆素类、醌酚酸、鞣酸、类黄酮、萜类、甾族、脂肪酸及生物碱等。它们有不同的作用机制，是开发除草剂的潜在资源。除草效应最好的实例是从万寿菊中提取的 -三噻吩，但未见实用化。3.1.4 植物内源激素植物激素是植物的正常代谢产物，常从产生部位移动时作用部位调节自身生长发育过程的非营养性微量活性物质。它在植物界普遍存在，不同激素具有不同的调节生理功能，植物内源激素主要类型有生长素类、赤霉素类、细胞分裂素类和脱落酸、乙烯等，大多数已商品化。芸薹素内酯是近年来开发的一种甾类植物激素，人工合成后在生产上广泛应用13。3.1.5 植物农药20 世纪末,在世界范围内，转基因植物的
11、研究十分活跃17；1996 年，第一个具有昆虫抗性的转 Bt 基因玉米在美国上市15。目前投入市场的转基因作物主要为大豆、王米、棉花、马铃薯及南瓜等，转基因植物的主要性状为耐除草剂、抗虫害和病害。目前，EPA 登记的植物农药(Plan-Incorporated Protectants)有 9 种(8 种为转 Bt 基因，1 种转马铃薯卷叶病毒复制酶基因 )，涉及玉米、棉花和马铃薯。我国农业基因工程研究起始于 80 年代初，目前研究的转基因植物达 47 种，并有 6 种已被批准进行商业化生产，但未实行农药登记。3.2 微生物农药概述微生物农药的微生物类群包括细菌、真菌、病毒、原生动物、线虫等。按
12、照用途，包括微生物杀虫剂、微生物杀菌剂、微生物除草剂、微生物生长调节剂、微生物杀鼠剂、微生态制剂等。3.2.1 微生物杀虫剂主要包括细菌杀虫剂、真菌杀虫剂、病毒杀虫剂、原生动物杀虫剂和昆虫病原线虫制剂9 ，以及抗生素杀虫剂。目前筛选的杀虫细菌约有 100 多种，其中日本金龟子芽孢杆菌(B.popillae)、缓病芽孢杆菌(B.lentimor-bus)、球形芽孢杆菌(B.sphericus)和苏云金芽孢杆菌(Bt)等得到实际应用7，9，28 ，后两者在我国登记使用。Bt 是细菌杀虫剂中的代表，4目前已鉴定了 70 个血清型，82 个亚种，是世界上用途最广、开发时间最长、产量最大、应用最成功的微
13、生物杀虫剂。目前已发现杀虫真菌约 100 多属 800 多种，其中以白僵菌、绿僵菌、拟青霉、虫霉等应用较多9，全世界先后有 50 多个产品登记注册16。球孢白僵菌(Beauveria bassiana)具有很好开发前景 21，并在多个国家商品化 16。此外，美国还登记大链壶菌(Lagenidium giganteum)、金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)用于害虫的防治；块状耳霉菌(Conidioblous thromboides)在我国商品化。目前已分离到的昆虫病毒有 1200 多种，已有 60 余种昆虫病毒被引入大田试验，我国也有 20 多种进入田间试验,应用最多的
14、有核型多角体病毒(NPV)和颗粒病毒(GV)25，27。早在 20 世纪 70 年代以前就有 20 多个国家对 30 多种病毒杀虫剂进行登记注册、生产和应用9；EPA 目前登记注册有 7 种 NPV 病毒杀虫剂和 1 种 GV 病毒杀剂。我国棉铃虫多角体病毒登记最早，到目前为止登记病毒杀虫剂 7 种。原生动物杀虫剂中主要为微孢子虫，约有 200 种，常用的有蝗虫微孢子虫(Nosema locustae)、玉米螟微孢子虫(N.pyrausta)和枞色卷叶蛾微孢子虫(N.fumiferanae)等9. 在我国 ,利用蝗虫微孢子虫控制草原蝗虫具有较好的前景1。已报导对害虫有寄生作用的线虫有 100
15、多种，重要的有格氏线虫(Steinernema glaseri)和斯氏线虫(S.carpocapsae),后者在美国、加拿大、前苏联进行了大量研究，应用潜力很大9。我国研究、应用较多的有六索线虫、斯氏线虫等1 。抗生素防治农业害虫的研究始于 20 世纪 50 年代，发现抗霉素 A 具有杀虫、杀螨活性；20 世纪 60 年代后，相继筛选出紫莱霉素(porfiromycin)、四抗菌素(Tetranactin)等有实用价值的杀虫抗生素。近几年中报道抗生素约 3000 多种，其中杀虫抗生素占 5%左右28，包括阿维菌素(Avermectin)5 ，25、多杀菌素(spinosad)5。密尔比霉素 (
16、milbemycin)25、thuringiensin17；阿维菌素被认为是微生物源天然产物研究的突破性进展.我国自杀蚜素报道以来，相继报道了浏阳霉素、韶关霉素、南昌霉素、梅岭霉素等。国内外较重要的杀虫抗生素有抗霉素 A、杀蝶素、杀螨素、日光霉素、密尔比菌素、阿维菌素、伊维菌素、越霉素、潮霉素、杀蚜素、浏阳霉素、韶关霉素、南昌霉素、梅岭霉素等29。3.2.2 微生物源杀菌剂直接利用活体微生物进行生物防治的研究很多，目前作为农药开发的杀菌剂主要集中于芽孢杆菌、假单胞菌、链霉菌、木霉、拟青霉等7。世界各国已有 25 种以上的真菌杀菌剂产品注册或投放市场16；EPA 作为生物杀菌剂登记的细菌种类有
17、8 种，真菌种类 8 种；我国登记细菌种类 6 种，真菌种类 1 种。此外，病毒外壳蛋白和弱毒株、卫星 RNA 也用于植物病毒病防治。ToMV弱毒株 M11-6、RNA：CMVP1 等在生产上有一定实用价值.在我国,淡紫拟青霉5(Paecilomyces lilacinus)也被用于防治植物线虫26。微生物代谢产物始于 1959 年日本应用杀瘟素-S(Blasticidin S)引防治稻瘟病5，至今世界上已发现了近百种农用抗生素。我国主要有链霉素、井冈霉素、公主岭霉素、农抗 120、武夷霉素、春雷霉素、中生菌素、华光霉素等1，近年又相继开发出宁南霉素、天柱菌素等。此外，菇类蛋白多糖对植物病毒病
18、有较好的作用效果。将病原菌激发子作为农药进行应用是近年来生物农药的重大进展，Harpin 蛋白是一个成功的例子。微生物次生代谢物在国内外均得到广泛应用。3.2.3 微生物源除草剂杂草的病原微生物主要包括放线菌、真菌、病毒等,最常见的真菌病原如锈菌、镰刀菌、炭疽病菌等15,应用较为成功是 Colletotrichum sp，已商品化多个产品；我国曾开发出鲁保一号。放线菌产生的具除草活性抗生素主要有Antibiotic-SF-249425、茴香霉素和双丙氨磷，双丙氨磷在日本已商品化 27，并在我国登记。3.2.4 微生物源植调剂赤霉素、细胞分裂素是微生物产生的重要植调剂，利用发酵获得脱落酸是降低生
19、产成本的重要途径；1990 年日本 TORAY 公司首先利用微生物发酵进行脱落酸的规模化生产。3.3 动物源农药概述动物源农药主要用于害虫的防治,包括动物毒素、昆虫激素、昆虫信息素和天敌动物等；研究最为活跃的是昆虫信息素、动物毒素和昆虫神经肽。昆虫信息素又称昆虫外激素,大多是长链不饱和烃的醇、酯、醛、酮和环氧化物具有引诱、刺激、抑制、控制摄食或产卵、交配、集合、报警、防御等功能。最早从鳞翅目昆虫发现，1965 年发现了 3 种，1980 年已知数百种，至 20 世纪90 年代已广泛应用(主要是鉴定结构后合成)1，18。美国已有几十种昆虫信息素用于农业害虫防治，我国也在棉铃虫等害虫上应用。动物毒
20、素是动物产生的对有害生物具有毒杀作用的活性物质，研究多集中于蜘蛛毒素和黄蜂毒素，为人们开发新型杀虫剂提供新的思路。已鉴定化学结构的动物毒素不少，例如阿根廷蚁产生的防卫毒素、大胡蜂产生的曼达拉毒素、异足索沙蚕产生的沙蚕毒素，以及斑蝥产生的斑蝥素等。昆虫激素是由昆虫内分泌腺体产生的具有调节昆虫生长发育功能的微量活性物质。主要有脑激素(蛋白质或多肽化合物)、蜕皮激素(胆甾酮结构化合物)和保幼激素( 萜类化合物) 三类。保幼激素在国内进行了大量应用研究1，保幼激素类似物 methoprene 早在 1975 年作为化学农药在美国登记。在日本，将家蚕羽化激素人工遗传基因导入酵母菌中发酵产生羽化激素获得成
21、功。昆虫神经肽是一个比较活跃的领域，自 1975 年鉴定第一种神经肽结构，到 1990 年已鉴定昆虫神经肽 8 类，共 40 多种；目前主要是基础性研究，离实用化还有相当的距离。6天敌动物是对有害生物具有寄生性或捕食性的昆虫，通过商品化繁殖、施放起防治作用。国际上已商品化生产的天敌昆虫有 130 多种，主要种类为赤眼峰、丽蚜金小蜂、草蛉、瓢虫、螳螂、小花蝽、捕食螨等18，但在我国还未实行农药登记。3.4 生物化学农药生物化学农药是一类重要的农药,通常包括信息素、激素、昆虫生长调节剂等。氨基甲酸酯类、沙蚕毒素类和拟除虫菊酯类以天然产物为先导化合物合成的农药，可以说是农药研究的划时代突破31，但不
22、属生物农药范畴；大部分昆虫生长调节剂、外源激素等最初从生物体分离而得，后人工合成类似物8，虽属生物农药范畴,但不是真正意义上的生物农药，本文不再概述。4 生物农药研究展望随着人们对化学农药弊端和环保重要性的进一步认识、生物农药内涵的扩展和新技术的不断出现，生物农药将是 21 世纪农药研究重点，以下几个方面将会受到重视。作用机制独特的生物农药.生物农药的作用机理与化学合成农药有很大的不同，作用机制独特的农药品种将是研究开发的热点之一，如生长调节物质、行为调控化学物质等。新的作用机制发现将为农药发展提供新的思路，如 Harpin等蛋白类物质。生物与化学方法相结合，开发生物化学农药。生物农药为化学农
23、药的创制提供了先导化合物,通过对生物农药(包括微生物农药)进行化学结构改造，创制新农药。拟除虫菊酯和沙蚕毒素农药的合成是经典事例；最近的有杀虫剂AC303630(以吡咯霉素有效基团作为先导化合物)，杀菌剂 ICI5504A、BAS-490F 和 SSF-126(以抗生素 Stuobilurin 为先导化合物)，依维菌素和埃玛菌素(由avermectin 结构改造而来 )。生物技术向生物农药研究渗透12。随着细胞工程、基因工程技术的日趋成熟,转基因植物(植物农药)是其中一重要方向8 ，包括具有农药作用的转基因植物( 目前以转 Bt 抗虫棉最成功)和抗农药(除草剂 )转基因植物10。此外，利用细胞
24、工程改造、生产生物农药也会成为热点9，10。此外，生物农药资源的开发、生物农药商品化技术,以及生物农药与化学合成农药的联合使用技术研究等，都会在 21 世纪生物农药研究中受到重视。7参考文献：1 包建中, 古德祥.中国生物防治M。太原:山西科学科技出版社。1998.2 操海群，乐永德，花日茂等。植物源农药研究进展J。安徽农业大学学报2000，27(1)： 40-44。3 董育新，吴文君。植物杀虫剂毒理学研究新进展J。昆虫知识，1997，34(2)： 112-116。4 杜小风，徐建明，王伟中等。植物源农药研究进展J。农药，2000，39(11)：8-10。5 高菊芬编译。生物农药的作用、应用与
25、功效(一)微生物农药J。世界农药，2001，23(1)：1-6。6 高菊芬编译 .生物农药的作用、应用与功效(二)植物、动物源农药J。世界农药，2001，23(2)：5-10。7 高菊芬编译。生物农药的作用、应用与效效(三)活体微生物农药J。世界农药，2001，23(3)：11-19。8 高希武，姜辉，陶岭梅等。生物/生物农药研究的现状与展望A 。中国植物保护学会等。面向 21 世纪的植物保护发展战略C。北京：中国科学技术出版社，2002。159-167。9 洪华珠，杨红 .杀虫微生物学纲要M。武汉.华中师范大学出版社，1997。10 侯学文，谢建军。生物技术在植物性杀虫剂研究开发中的应用J。
26、植物保护学报，2001，28(1)：77-82。11 江西农药厂等。微生物农药M。江西人民出版社，1979。12 姜健，付秀林，张强等。生物技术在农业发展中的应用J。农业与技术，1999，19(3)： 8-11。13 康卓。中国生物农药产业化进程J。农药，2001，40(3)：4-8。14 雷新云，李怀芳，裘维蕃。植物诱导抗性对病毒侵染的作用及诱导物质NS83 机制的探讨J。中国农业科学，1987，20(4) ：1-5。15 李玉新。生物农药的现状与发展前景，农药论坛，2000，第一辑。16 李增智 .菌物在害虫，植病和杂草治理中的现状和未来J。中国生物防治，1999，15(1)： 35-40
27、。17 李宗成。国外农药研究动向J，农药，1998，37(1)：1-12。18 倪汉祥，陈万权，万方浩。21 世纪我国植物保护关键技术研究展望A。8中国植物保护学会等。面向 21 世纪的植物保护发展战略C。北京: 中国科学技术出版社，2001。3-80。19 刘素琪，石建军，曹挥等。杀虫植物的研究现状与展望A。李典模。走向 21 世纪的中国昆虫学C。北京：中国科学技术出版社，2000。1092-1097。20 刘素琪，石建军，曹挥等。植物的杀虫有效成份概况A。李典模。走向21 世纪的中国昆虫学C。北京:中国科学技术出版社， 2000。1098-1104。21 刘银泉，冯明光，刘树生。球孢白僵菌
28、对桃蚜的毒力测定J。植物保护学报，1999，26：30-34。22 罗万春，慕立义，李云寿。植物源生物碱的杀虫作用J。农药，1997，36(7)： 11-15。23 马志卿，张兴。植物源杀虫物质的作用特点J。植物保护，2000。26(4)：37-40。24 潘文亮，张春明。杀虫植物印楝利用研究概况J。河北农业科学，1997，1(1)： 26-28。25 朴永范，林晃。我国农作物病虫害生防工作新进展M。北京：中国农业出版社，1998。26 丘文杰，潘沦海。淡紫拟青霉防治植物线虫及其几丁质酶作用的进展A。喻子牛.微生物农药及其产业化C。北京:科学出版社， 2000。276-283。27 上田富雄 (张思华译) 。生物农药的现状及开发动向J。农药译丛，1993，15(6)： 1-4。28 施跃峰 .微生物杀虫剂研究进展J。植物保护，2000，26(5)：32-34。29 宋渊。杀虫抗生素的研究进展A 。喻子牛。微生物农药及其产业化C。北京：科学出版社，2000。180-186。
