球囊霉素被分为4类.doc

1、球囊霉素被分为 4 类，分别为总提取球囊霉素（total glomalin，TG） 、易提取球囊霉素（easily extractable glomalin，EEG） 、免疫反应总球囊霉素（immunoreactive total glomalin, IRTG）和免疫反应易提取球囊霉素（immunoreactive easily extractable glomalin, IREEG）（2）外源 EE-GRSP 对枳生长、土壤结构和土壤肥力的影响目前，GRSP 对土壤团聚体的重要作用主要是对土壤中的 GRSP 含量和水稳性团聚体的含量之间的通过通径分析或是相关性分析得到。迄今为止，还没有直接证

2、据证明 GRSP 可以促进土壤团聚体的稳定性。鉴于此，我们从土壤中提取易提取球囊霉素相关蛋白（EE-GRSP ，一种呈现活性和不稳定的球囊霉素相关蛋白） ，分析不同强度的 EE-GRSP 溶液对枳（Poncirus trifoliata）实生苗生长和根际土壤特性的影响，探讨外源 GRSP 对植株生长、土壤特性和土壤肥力的影响。试验主要研究的内容和结果如下：经过 3 个月的外源 EE-GRSP 处理后，分析植株生长、根际土壤中球囊霉素含量、水稳性土壤团聚体的含量、团聚体的稳定性以及相关土壤酶活性等的变化，探讨外源 EE-GRSP 对植株生长、土壤特性和土壤肥力的影响。结果表明，1/4 和 1/2

3、 强度的 EE-GRSP 溶液显著促进枳实生苗的营养生长、植株生物量，且植物的生物量与外源 EE-GRSP 之间存在显著的曲线相关关系。 3 种不同浓度的EE-GRSP 都显著提高了枳根际水解碳水化合物含量，1/2 强度浓度和全强度 EE-GRSP 溶液显著提高了枳实生根际的土壤有机碳的含量，但是只有 1/2 强度的EE-GRSP 土壤热水提取碳水化合物的含量。 所有的外源 EE-GRSP 溶液的处理都显著提高了枳根际土壤中的内源 GRSP 的含量。外源 EE-GRSP 处理显著提高了水稳性团聚体的含量和土壤团聚体的平均质量直径（MWD）和几何平均直径（GMD ） ，显著降低了土壤团聚体的分形

4、为数（D） ，其中以 1/2 强度浓度的 EE-GRSP 处理的效果最好 。此外，团聚体 MWD 和外源 EE-GRSP 之间存在显著的曲线相关关系。这暗示 GRSP 确实可以促进良好土壤结构的形成，但是当土壤中的 GRSP 超过一定的范围，增加的 GRSP 含量不会再对土壤团聚体起到额外的作用。所有的外源 EE-GRSP 处理都显著提高了枳根际的土壤过氧化物酶的活性。除了 1/4 强度的 EE-GRSP 处理对枳根际的酸性磷酸酶没有显著影响外，其他的处理都显著提高了枳根际的酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、中性磷酸酶和总磷酸酶的活性。其中，全强度 EE-GRSP 溶液对枳根际的磷酸酶的活性的影响最大。

5、这些结果暗示外源 EE-GRSP 的施加可以改善枳根际的土壤结构，提高土壤肥力，从而促进植物的生长，其中 1/2 强度的 EE-GRSP 处理呈现出最好的促进效果。但是当团聚体的稳定性达到一定程度时，团聚体的稳定性就不再随 GRSP含量的增加而增加。出现这样的现象对于农业土壤来说也许是好的，但是在大多数的农业土壤中土壤团聚体的稳定性都非常的低，随着土壤中 GRSP 的增加团聚体的稳定性也会随着增加。有几种原因或许可以解释为什么土壤中的 GRSP和团聚体的稳定性存在反曲线的相关性。第一，当土壤中 GRSP 含量非常高时，可能团聚体中的大部分的孔隙都被这种物质堵塞了，从而减缓了水分向团聚体中的渗透

6、 31。第二，GRSP 中含有大量的胡敏酸和碳水化合物，这些物质也会促进团聚体的稳定性，但是当团聚体的稳定性达到一个阀值后，这些物质的增加也不会再促进团聚体的稳定性的提高 24。虽然一些研究 GRSP 对团聚体稳定性的作用可能与其天然的疏水特性有关。但是到目前为止，有关 GRSP 促进团聚体的形成和稳定的机制还不清楚。AM 真菌一般消耗宿主植物的 420% 光合产物45，然后通过根外菌丝的周转把 C 转运到土壤中储存起来，据估计 AM 真菌对土壤生态系统有机碳的贡献为54900 kg/hm244。GRSP 也普遍存在于各种土壤中，在农田、草原、森林、河漫滩、沙漠土壤中均测定到 GRSP 43,

7、40,46,38,42,47。因为 GRSP 可以提高团聚体的稳定性，从而促进土壤 C 的固定。土壤重金属污染是指土壤中重金属元素含量明显高于其自然背景值，并造成生态破坏和环境质量恶化的现象 53。土壤重金属污染的危害不仅仅取决于重金属在土壤中的总量，还取决于其存在形态和各形态所占的比例 54。研究发现土壤有机质（SOM）和蛋白质可以螯合土壤中的潜在的有毒元素，从而降低土壤中的重金属的毒性和控制重金属的形态 55。如富里酸、胡敏酸和胡敏素都对土壤中的重金属具有潜在的螯合作用 56。GRSP 作为 AM 真菌分泌的一种糖蛋白，也是土壤有机质的重要组成部分，可能也可以螯合土壤中的重金属，从而达到土

8、壤修复的作用。Rillig 和 Steinberg 实验也证明随着丛枝菌根真菌菌丝生长空间的增加，而土壤中的 GRSP 含量却在不断的减少 65。他们的实验首次表明不利的生长环境可以促进 GRSP 的分泌 。因此他们认为 AM 真菌分泌 GRSP 是为了给自身提供有力的生长条件，GRSP 对土壤的生态功能可能只是次要的作用或是两种作用是同等重要的 64。在特定的条件下，土壤中 GRSP 的含量主要是取决于 AM 真菌产 GRSP 的速率和GRSP 的降解速率 66。因此，只要是影响 GRSP 的产生和 GRSP 的降解的因素都会影响到土壤中 GRSP 的水平。影响土壤球囊霉素相关土壤蛋白产生和

9、功能的因素1.在特定的条件下，土壤中 GRSP 的含量主要是取决于 AM 真菌产 GRSP 的速率和 GRSP 的降解速率 66。2.因为植物提供给 AM 真菌相当多的 C 都用于 GRSP 的产生，因此植物的生产力是控制 GRSP 含量的一个重要的因素。3.Wilson 等 69报道植物的生物量和凋落物的数量和质量都会影响 GRSP 的含量。这可能是由于 AM 真菌对植物的丰富度和植物的净生产力的依赖性。4.Treseder 和 Turner 认为在那些水分和养分缺乏的环境中，植物对 AM 真菌的依赖性越强，GRSP 的产量也就会越高 66。5.大气中的 CO2 含量是影响 GRSP 含量的

10、另一个重要的因素 70，因为 CO2 浓度的提高会影响 C 的循环。CO 2 浓度提高会增加光合速率、水、光和养分利用效率和减少气孔导度和蒸腾作用从而提高植物的净初级生产力。大气中 CO2 浓度的升高会提高土壤中 GRSP 的含量 70。6.土壤生物提高菌根侵染，可能也会提高 GRSP 的含量。因此，所谓的“菌根-促生细菌”可以刺激孢子的萌发、菌丝的生长，AM 真菌的建立从而提高 GRSP 的含量。像线虫和弹尾目这样的微生物也会对 GRSP 的产量产生积极或是消极的作用。例如，弹尾目对菌根菌丝的啃食，可能会减少菌丝的繁殖和扩散。7.种植制度和土地管理措施也会影响 GRSP 的水平。耕作减 少

11、GRSP 的产量，减少植被和 AM 真菌的丰富度从而加速 GRSP 的降解 66。8.有趣的是，AM 真菌的丰富度并不总是和 GRSP 的含量之间存在相关性 66。9.丛枝菌根的活性可能和 GRSP 的含量之间没有相关性。2.1.2 试验设计根箱装置如图 2-1 所示。塑料管：采用规格为外径 10 cm，内径 9 cm，高18 cm 的 PVC 塑料水管制成，在管壁四周开 10 cm3.5 cm 的四个口（距离 PVC管底部 2cm） ，并在管壁四周和底部粘上一层 37 m 的尼龙网（孔径为 400 目）尼龙网可以允许根外菌丝穿过，但是植物根系则不能。有机玻璃箱：长宽 高为 17.517.51

12、5 cm，为了保持自然排水，在塑料箱子的底部打 4 个孔径为 0.5 mm 的小洞。这样 PVC 管就作为根室，有机玻璃箱作为菌丝室。实验为双因素试验，采用完全随机设计。因素一为接种丛枝菌根真菌，包括接种 Funneliformis mosseae (F. mosseae)和不接种 F. mosseae 2 个处理，接种菌种处理的接种计量是每盆 100g 菌剂，采用“二层接种法 ”进行接种。因素二为对PVC 管进行定期旋转（菌丝破坏）和不旋转（菌丝原位释放）两种处理。供试植物种于 PVC 管中，每个 PVC 管中装入 1.2kg 的供试土壤并种植 2 株枳实生苗，然后将 PVC 管插入有机玻璃

13、箱子的正中间，然后再在塑料箱子中装入 3Kg 的供试土壤，并在有机玻璃的箱子外面贴上报纸。在枳幼苗移栽定植 6 w 后，每个星期将需要旋转处理的 PVC 管沿垂直方向的轴顺时针旋转 180以破坏根外菌丝。试验共 4 个处理，每个处理重复 5 次，总计 20 个 PVC 管，随机排列。将此模拟装置至于长江大学园艺园林学院的玻璃温室中，供应充足的水使其正常生一长，并随时注意杂草的清除和虫害的防治。2.3.1 旋转处理对枳菌根侵染率和土壤菌丝密度的影响本研究结果显示，旋转处理可以显著的降低菌根的侵染率与根室和菌丝室土壤中的菌丝密度（表 2-1），说明 PVC 管旋转处理（模拟田间条件下根外菌丝的破坏

14、），抑制了土壤菌丝的发育。这些结果与 Johnson 等 88的研究结果一致。他们研究了菌丝的定期破坏对菌根的侵染、菌根的发育、土壤菌丝和菌丝对土壤中 P 的传递的影响。2.3.2 旋转处理对枳生长的影响本研究发现，枳接种 G. mosseae 后，显著提高了枳实生苗的地上部分鲜重、地下部分鲜重、地上部分干重和地下部分的干重（表 2-3）。接种促进了枳生物量的增加可能得益于土壤结构的改善或是水分和养分的吸收。2.3.3 旋转处理对枳实生苗根系形态的影响例如，Wu 等研究发现在枳壳上接种 G. mosseae、G. versiforme、P. occultum 都显著提高了枳壳实生苗根系的投影面

15、积、表面积和根系体积99 。此外，他们的研究还发现接种 AM 真菌显著降低了枳实生苗根系的平均直径旋转处理显著降低了枳实生苗根系的投影面积和表面积（表 2-4），暗示菌丝的破坏不利于良好根系构型的建立。这可能是由于旋转处理破坏了土壤中的菌丝，土壤中菌丝的减少就会降低菌丝向植物根系运送水分和养分，最终导致植物生长的减缓和根系构型的变化。2.3.4 旋转处理对菌根化枳实生苗根际土壤 GRSP 含量的影响研究发现 80%的 GRSP 包裹在丛枝菌根真菌的菌丝和孢子壁上而不是直接降解到土壤中 28，这强烈暗示 GRSP 对土壤团聚体的作用可能依赖于 AM 真菌土壤菌丝。我们测定土壤中的的 T-GRSP

16、 的含量范围在 1.681.88 mg/g 土壤，显著低于对小麦接种 G. mosseae 后根际的 7.338.04 mg/g 土壤 101。可能有多种原因造成这 2 个实验中 GRSP 的含量存在极大的悬殊，如土壤的理化性质，但是宿主植物的不同可能是其中最重要的一个因素。因为相比 AM 真菌，宿主植物对土壤中的 GRSP 含量的影响可能更大 66。AM 真菌为寄生真菌，必须从宿主植物体内获得自己生所需要的 C。但是不同的宿主植物的光合作用的能力是不同的，所以分配给 AM 真菌的 C 的能力也是不同的。宿主植物的光合作用的能力越强，分配给 AM 真菌的 C 就越多，那么菌根菌丝降解分泌的 G

17、RSP 也就越多。2.3.5 旋转处理对菌根化枳实生苗根际土壤结构的影响这些结果暗示不同成分的 GRSP 对团聚体稳定性的分工上存在差异 23。菌根菌丝将土壤彼此机械的缠绕在一起而形成团聚体，随着菌丝密度的增加，土壤的团聚性也相应增强。 而旋转处理显著降低了土壤中的菌丝密度，从而导致土壤团聚体稳定性的降低。旋转处理也还显著降低了土壤中的 GRSP 的含量，而本研究发现土壤中的 GRSP 和水稳性大团聚体的含量和团聚体的稳定性之间存在显著的正相关关系（表 2-9）。2.3.6 旋转处理对枳根际土壤有机碳含量的影响然而，旋转 PVC 管降低了土壤中的有机碳含量，但是还没有达到显著水平（表2-8）。

18、这可能是由于菌丝密度和土壤中的 GRSP 的含量的降低有可能会导致有机碳的降低。但是 PVC 管旋转降低了土壤菌丝密度，导致枳分配给菌丝的 C 下降，因而植物的 C 可能以其他的方式被植物的根系固定到土壤中，从而使得旋转处理虽然显著降低了土壤中的菌丝密度和 GRSP 的含量，但还未显著降低土壤中的有机碳。此外，GRSP 或者菌丝对 C 的贡献是需要一个相对较长的时间，本试验只是执行了 3 个月，执行时间短可能也影响到菌丝对土壤有机碳的贡献。通径分析表明 GRSP 比菌根侵染对接种 G. mosseae 的枳实生苗的菌根室和菌丝室中的团聚体稳定性的作用更大 33。但是当土壤中的 GRSP 含量超

19、过“饱和”水平后，土壤中的 GRSP 含量的增加不会再增加土壤团聚体的稳定性 31。尽管土壤中的胡敏酸物质可以促进土壤团聚体的形成和植物的生长，而 GRSP 中也含有胡敏酸的成分，但是到目前为止 GRSP 是否可以促进团聚体聚合和植物的生长还没有直接的证据。外源 EE-GRSP 的准备：2013 年 3 月于荆州市长江大学 26 年生柑橘园采集 0-20 cm 土壤（黄壤） 。其中土壤的 pH 值为 6.1，土壤有机碳为 9.7 g/kg，有效氮为 11.8 mg/kg，有效磷为 15.3 mg/kg 和有效钾为 21.5 mg/kg。土壤采集后混合均匀，自然状态下风干，然后再过孔径为 4 m

20、m 的筛子去除土壤中的根系、垃圾以及石块。然后再根据 Koide 和 Peoples86的方法来提取 EE-GRSP，提取完成后 EE-GRSP 的浓度为 0.022 mg 蛋白/mL 柠檬酸缓冲液。实验设计：试验为单因素试验，采用完全随机设计。试验包括 4 个处理，每个处理重复 4 次，共 16 盆。4 个处理为 4 种不同强度浓度的 EE-GRSP 溶液：（1）零强度浓度的 EE-GRSP 溶液（ 20 mmol/L，pH 7.0 的柠檬酸缓冲液，0 EE-GRSP）作为对照；（2）1/4 强度浓度的 EE-GRSP 溶液(1/4 EE-GRSP)；（3）1/2 强度浓度的EE-GRSP

21、溶液(1/2 EE-GRSP)；（4）完全的 EE-GRSP 溶液(1 EE-GRSP)。其中 1/4 和 1/2 强度的 EE-GRSP 溶液都是用完全的 EE-GRSP 溶液加上一定比例的 20 mmol/L、pH 7.0 的柠檬酸缓冲液稀释而成。将长势大小相似的 5 叶龄枳实生苗移栽到装有 1.5 kg 经过高压灭菌黄壤土的塑料盆中，每个塑料盆中种植 2 株枳实生苗。在枳实生苗移栽的前 2 个月，每盆每隔 2 天浇 50100 mL 的蒸馏水维持植物的生长（2013 年 3 月到 5 月）。在枳实生苗移栽后的 3 个月（2013 年 5月到 8 月），每隔 2 天给枳实生苗浇灌不同强度浓

22、度的 EE-GRSP 溶液，期间根据土壤的水分状况补充一定的蒸馏水维持植物的良好生长，并随时注意杂草的清除和虫害的防治。相关性分析表明：枳根际的 EE-GRSP 和 T-GRSP 与土壤团聚体的 MWD 之间存在显著的正相关关系，但是 DE-GRSP 与 MWD 之间没有显著的正相关关系（图 3-4a） 。此外，枳根际的 3 种不同成分的 GRSP 含量也和土壤有机碳的含量存在显著的正相关关系（图 3-4b） ，且相关性大小依次为 T-GRSPEE-GRSPDE-GRSP。回归分析表明，枳实生苗的生物量和枳根际的团聚体的 MWD 与外源 EE-GRSP 的强度浓度之间存在显著的曲线相关性（图

23、3-5） 。当 EE-GRSP 的浓度处理从 0 mg 蛋白/ml 柠檬酸缓冲液增加到 0.011 mg 蛋白/ml 柠檬酸缓冲液时，植物的生物量也随之上升，但是当 EE-GRSP 的浓度处理从 0.011mg 蛋白/ml柠檬酸缓冲液增加到 0.022mg 蛋白/ml 柠檬酸缓冲液时，枳实生苗的生物量又随之降低。同样的，枳根际的土壤团聚体的 MWD 值也出现了一样的趋势。3.3.1 外源 EE-GRSP 对枳实生苗生长的影响本实验中，外源 EE-GRSP 也促进了植物的生长。枳实生苗的株高、茎粗、茎干重、根系干重和总干重都表现为 1/2 强度浓度的 EE-GRSP 处理1/4 强度浓度的 EE

24、-GRSP 处理全 EE-GRSP 处理柠檬酸缓冲液处理的对照（表 3-1） 。但是和对照相比，全 EE-GRSP 处理并没有显著促进植物的生长。此外，相关性分析也表明，当 EE-GRSP 的浓度处理从 0 mg 蛋白/ml 柠檬酸缓冲液增加到 0.011 mg蛋白/ml 柠檬酸缓冲液时，植物的生物量也随之上升，但是当 EE-GRSP 的浓度处理从 0.011 mg 蛋白/ml 柠檬酸缓冲液增加到 0.022 mg 蛋白/ml 柠檬酸缓冲液时，枳实生苗的生物量又随之降低（图 3-5） 。这些结果暗示了 EE-GRSP 像胡敏酸物质一样确实可以促进植物的生长，且外源 EE-GRSP 对植物生长的

25、促进作用依赖于外源 EE-GRSP 的浓度。3.3.2 外源 EE-GRSP 对枳根际碳库的影响本实验结果表明，和柠檬酸缓冲液对照处理相比，1/2 强度浓度的 EE-GRSP溶液和全 EE-GRSP 溶液显著提高了枳实生根际的土壤有机碳的含量，分别提高了 5%和 7%（表 3-2） 。这些结果暗示外源 EE-GRSP 具有调节土壤碳库的潜在能力。相关系分析也表明土壤有机碳和外源的 EE-GRSP、DE-GRSP 和 T-GRSP 之间存在显著的正相关关系。当枳接种 5 种不同丛枝菌根真菌后，枳根际的 EE-GRSP 也和土壤有机碳存在显著的正相关关系（r 2=0.60，P 全 EE-GRSP

26、溶液1/4 强度浓度的 EE-GRSP 溶液。本研究表明，对于枳根际土壤团聚体的 MWD 值，1/4 强度浓度的 EE-GRSP溶液、1/2 强度浓度的 EE-GRSP 溶液和全 EE-GRSP 溶液分别提高了 18%、38%和25%；对于枳根际土壤团聚体的 GMD 值，1/2 强度浓度的 EE-GRSP 溶液和全 EE-GRSP 溶液分别提高了 4%和 3%；对于枳根际土壤团聚体的 D 值，1/2 强度浓度的 EE-GRSP 溶液和全 EE-GRSP 溶液分别降低了 4%和 3%（图 3-1） 。本研究结果暗示外源 EE-GRSP 处理提高了枳根际土壤团聚体的稳定性。此外。我们的研究结果还显

27、示 3 种不同成分的 GRSP 对土壤团聚体的稳定性的影响不同。在 3 中不同成分的 GRSP 中，只有 EE-GRSP 和 T-GRSP 和土壤团聚体的 MWD 值存在显著的正相关关系，虽然 DE-GRSP 也和 MWD 呈正相关关系，但是还未达到显著水平（图 3-4） 。Wang 等人 103也曾报道枳接种 AM 真菌后，枳根际的 3 种 GRSP 成分中，只有 EE-GRSP 与 MWD 存在显著的正相关关系。而 Wu 等 104研究指出白三叶接种地表球囊霉和隐内球囊霉后，在白三叶草根际只有 T-GRSP 与 MWD 呈显著的相关关系。这些结果暗示不同成分的 GRSP 对团聚体稳定性的分

28、工上存在差异 23。这暗示土壤团聚体的稳定性依赖于外源 EE-GRSP 的浓度，但是土壤团聚体的稳定性并不总是随着外源 EE-GRSP 浓度的提高而增强。下面有几种解释可以说明这种现象。首先，在球囊霉素提取的过程中可能会同时提取到大量的胡敏酸物质 32。而 Piccolo124研究发现胡敏酸物质在土壤中可以作为土壤团聚体的粘合剂也可以作为分散剂，这完全依赖于添加到土壤中的胡敏酸物质的浓度。他们还发现胡敏酸物质在中浓度（0.10 g/kg DW soil）而不是高浓度（ 10 g/kg DW soil）的团聚体的聚合能力最强。其次，外源施加全 EE-GRSP 可能会使土壤中的 GRSP 达到饱和

29、状态，因此大团聚体中的大部分孔隙可能被被 EE-GRSP 堵塞，从而降低了团聚体的水分渗透率，最终影响 GRSP 对土壤团聚体稳定性的能力 31。最后，1/2 强度浓度的 EE-GRSP 溶液处理的团聚体稳定性最高可能与在该处理下枳实生苗的根系的生物量也是最高的，而许多研究证明植物的根系可以通过根系的缠绕作用直接促进大团聚体的形成 81，也可以通过植物根系分泌的化合物间接促进团聚体的稳定性73。2.3.4 外源 EE-GRSP 对枳根际土壤酶活性的影响本实验结果表明，和对照相比，1/2 强度浓度的 EE-GRSP 处理显著提高了土壤的过氧化物酶。这些结果暗示了外源 EE-GRSP 处理提高了枳

30、根际的土壤养分。多酚氧化酶的主要功能是钝化土壤中的鞣酸类物质，通常多酚氧化酶的活性可以反映土壤中腐殖质的熟化程度 125，即：当土壤中多酚氧化酶的活性较高时，也就代表着土壤腐殖质熟化程度较低；而当土壤中多酚氧化酶活性较低时，则表示土壤腐殖质熟化程度较高，进而土壤的肥力水平也会相应较高。本实验结果显示，和对照相比，1/2 强度浓度的 EE-GRSP 处理和全 EE-GRSP 处理显著提高了了土壤的多酚氧化酶活性（图 3-2） 。GRSP 含有大约 37% C、35% N 和 0.03 0.1% P32，这些物质都是土壤酶的重要基质。这可能是由于外源 EE-GRSP的处理带入了一定的养分到土壤中，

31、还在一定程度上改善了土壤的结构，从而使土壤多酚氧化酶的活性增强。我们的研究结果还发现枳根际的碱性磷酸酶的活性要高于酸性磷酸酶的活性，但是以中性磷酸酶的活性最高。这可能是由于外源 EE-GRSP 是用 20 mmol/L柠檬酸钠缓冲液（pH7.0）提取出来的，外源 EE-GRSP 处理就为枳根际的土壤创造了一个中性的环境，从而更加促进了土壤中中性磷酸酶的活性。Dick 和 Tabatabai 指出，酸性磷酸酶在酸性土壤中占优势，但是碱性磷酸酶在碱性或是中性土壤中占优势 128。总之，这些结果暗示了外源 EE-GRSP 处理可以提高土壤中性磷酸酶的活性，从而促进了土壤中养分的循环。第 4 章 结论

32、（1）接种 AM 真菌可以显著促进枳实生苗的生长，提高枳根际大团聚体的含量和团聚体的稳定性以及土壤中有机碳的含量。线性回归分析也显示土壤中的菌丝密度和 GRSP 的含量和土壤团聚体的稳定性之间存在显著的正相关关系，暗示了接种 AM 真菌可以促进柑橘根际良好土壤结构的形成。但是模拟田间条件下，菌丝破坏显著降低了枳根室和菌丝室的土壤真菌菌丝密度、EE-GRSP、DE-GRSP 和 T-GRSP 的含量和 2.004.00 、1.002.00 和 0.501.00 mm 的水稳性团聚体含量，以及 MWD 和 GMD。因此，田间条件下根外菌丝的破坏不利于枳根际良好土壤结构的形成。（2）外源 EE-GR

33、SP 处理对枳生长、土壤结构和土壤肥力产生了重要的影响。其中，1/4 和 1/2 强度的 EE-GRSP 溶液显著促进枳实生苗的营养生长、植株生物量，且植物的生物量与外源 EE-GRSP 之间存在显著的曲线相关关系。外源 EE-GRSP 处理显著提高了 水稳性团聚体的含量和土壤团聚体的稳定性，其中以 1/2强度浓度的 EE-GRSP 处理的效果最好。和植物的生物量一样，枳根际的水稳性团聚体的含量和团聚体的稳定性与外源 EE-GRSP 之间存在显著的曲线相关关系。这暗示土壤团聚体的稳定性依赖于外源 EE-GRSP 的浓度，但是土壤团聚体的稳定性并不总是随着外源 EE-GRSP 浓度的提高而增强。

34、不同浓度的外源 EE-GRSP对土壤酶的活性影响不同，其中完全 EE-GRSP 溶液对枳根际的磷酸酶的活性的影响最大。英文缩写 英文全称 中文名称AMF arbuscular mycorrhizal fungi 丛枝菌根真菌GRSP glomalin-related soil protein 球囊霉素相关土壤蛋白EE-GRSP easily extractable glomalin-related soil protein 易提取球囊霉素相关土壤蛋白T-GRSP total glomalin-related soil protein 总球囊霉素相关土壤蛋白MWD mean weight diameter 平均重量直径GMD geometrie mean diameter 几何平均直径D fractal dimension 分形维数PPO polyphenol oxidase 多酚氧化酶POD peroxidase 过氧化物酶ACP acid phosphatase 酸性磷酸酶 NEP neutral phosphatase 中性磷酸酶ALP alkaline phosphatase 碱性磷酸酶TP total phosphatase 总磷酸酶SOC soil organic carbon 土壤有机碳