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流式细胞术鉴定超微量免疫细胞样本.ppt
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- 流式细胞术鉴定超微量免疫细胞样本.ppt
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1、使用CD115来鉴定和分析 小鼠血中单核细胞,12月2日,血中的单核细胞,白血球细胞 (leucocyte):粒细胞和非粒细胞 粒细胞(多形核白细胞): 中性粒细胞,嗜碱性粒细胞,嗜酸性粒细胞 非粒细胞 (单核白细胞):淋巴细胞,单核细胞和巨噬细胞,背景介绍,G,Koenderman L et al. J Leukoc Biol 2000;68:58-64,背景介绍,纵向小鼠模型(非致死):重要性:可用于预测疾病风险的增加,纵向评估病情的进展 需求:观察小鼠模型个体在外界刺激或者药物反应中的长期变化 困难:每次可采集的小鼠血液样本体积非常小小鼠单核细胞标记(占血液中细胞总数3%)CD11b:
2、表达在多种细胞表面 (髓样细胞,NK细胞, 活化的T细胞,B细胞 ) CD14: 表面表达量低或检测不到,常用,-由此,需要建立有效的实验方案建立小鼠纵向模型,需要一种流式细胞仪, 可检测超微量血液样品同时又需保证重复性,数据准确更加可行的单核细胞标记,用于FACS: CD115- 细胞表面标记本身具有稳定性, 在检测微量血液样品体积时,测试结果具有一致性,提出的问题及实验的设计,VS,小鼠血样的采集 CD-1 雄性小鼠, 大隐静脉取血(每次采样0.5%体重,非致死方式),材料与方法,实验 1: 比较常用的小鼠单核细胞表面标记 (Guava easyCyte Mini)实验 2: 鉴定不同单核
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