1、茵陈蒿汤醇提物对机体抗氧化能力影响更新日期:2011-05-18 点击: 洪 敏 朱 荃 李晓冬 孙小玉 提要 为探讨茵陈蒿汤醇提物的保肝作用与机体抗氧化 能力的关系,实验观察茵陈蒿汤醇提物在 D-氨基半乳糖+脂多糖(D-GalN+LPS)和卡介苗+脂多 糖(BCG+LPS)模型中对ALT、GST、LPO、SOD 及 GSH 的影响。结果:茵陈蒿汤醇提物 ig. 6 g /kg 和 9 g/kg 明显降低 D-CalN+LPS 肝损伤小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)活性,降低谷胱甘肽-S -转移酶(GST)水平,减少肝匀浆中脂质过氧化物(LPO)含量,对超氧化物歧化酶(SOD)活性无 明显影响;4
2、 g/kg,6 g/kg 和 9 g/kg 显著降低 BCG+LPS 免疫性肝损伤小鼠血清 ALT 水平,6 g/kg 和 9 g/kg 增加肝匀浆还原型谷胱甘肽(GSH)含量。表明茵陈蒿汤醇提物经口给药能明显 提高小鼠抗自由基损伤的能力,为其保肝作用的机理之一。 关键词 茵陈蒿汤醇提物; BCG+LPS 免疫性肝损伤; D-Ga lN+LPS 肝损伤 Antilipoperoxidation Activity of Alcohol Extract of Capillaris D ecoction Hong Min, Zhu Quan, Li Xiaodong, et al Nanjing U
3、niversity of TCM, 210029 Abstract The mechanism of protecting mice from experi mental liver injury of alcohol extract of Capillaris decoction were observed.Ele vated serum ALT,GST activity in D-GalN+LPS liver injury model were reduced by a dose-dependent effect of alcohol extract,coresponding with r
4、educed LPO level.Aft er administration of BCG+LPS, serum ALT level increased significantly.Alcohol e xtract reduced ALT activity and increased GSH level apparently.These results sug gest alcohol extract of Capillaris decoction might protect mice from experimenta l liver injury,through a way of antil
5、ipoperoxidation. Key words Alcohol extract of Capillaris Decoction; BCG+LPS liver injury; D-GalN+LPS liver injury 茵陈蒿汤出自伤寒论 ,是治疗湿热黄疸的要方,临床用于多种黄疸证及传染性肝炎、急 性病毒性肝炎、重型肝炎的治疗。茵陈蒿汤保肝作用得到多数学者的认可,韩德五等研究表 明茵陈蒿汤对四氯化碳(CCl4)所致的肝损伤显示出良好的保肝作用1 ;对于大 鼠异硫氰酸 萘酯(ANiT)造成的黄疸型肝炎模型,茵陈蒿汤醇提物能使升高的谷丙转氨酶 、谷草转氨酶降低,肝组织病理改变减轻2 ;孙学
6、惠等研究提示3茵陈 蒿汤醇提物对抗四氯化碳肝损伤的作用强于水煎液。茵陈蒿汤保肝作用的机理研究不多,林 利光研究表明茵陈蒿汤中含有 葡萄糖醛酸酶抑制活性物质4 ,认为可能是其 抗肝损伤的机制之一。本文研究了茵陈蒿汤对 D-氨基半乳糖+脂多糖(D-GalN+LPS)肝损伤及卡介苗+脂多糖(BCG+LPS )免疫性肝损伤小鼠血清 ALT、谷胱甘肽-S-转移酶(GST)、脂质过氧化物(LPO)、超氧化物歧 化酶(SOD)及还原型谷胱甘肽(GSH)的影响,观察其对机体抗氧化能力的影响。 1 实验材料 1.1 动物:ICR 小鼠,昆明种小鼠,南京中医药大学 动物房,苏动(质)95038。 1.2 药材:茵
7、陈蒿、栀子、大黄,购自南京中医药 大学门诊部。 1.3 试剂:联苯双酯滴丸(Biphenyldimethyl dicar boxylate,BDD),广州星群(药业)股份有限公司生产,970109;脂多糖(Lipopolysaccharide ,LPS),SIGMA 公司产品;D-氨基半乳糖(D-galactosamine,D-GalN),重庆医学院,881030 ;卡介苗(BCG),上海生物制品研究所,970501;还原型谷胱甘肽(Reduced Glutathiou,GSH )上海酵母厂生产,840903;硫代巴比妥酸(TBA),江苏宜兴第二合成化厂,960301;1,1, 3,3四乙氧基
8、丙烷(TEP),Fluka Chemika 产品;谷丙转氨酶测定试剂盒,SOD 测定试剂盒 ,GSH 测定试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。 2 方法及结果 2.1 茵陈蒿汤醇提物对 D-GalN+LPS 诱导小鼠肝损伤 A LT、LPO、SOD 及 GST 的影响:ICR小鼠,70 只,(20.81.3)g,随机分为 8 组,即正常组( Normal)、D-GalN+LPS 模型组(D-GalN+LPS)、联苯双酯组(BDD)、醇提物(B)1.78 g/kg,2.67 g/kg,4.0 g/kg,6.0 g/kg,及 9.0 g/kg 组。给药组灌胃给药,正常组给等量生理盐水,1 次/d,
9、共 3 d,末次给药 1.5 h 后,正常组腹腔注射 10 ml/kg 生理盐水,其余各组腹腔注射 D- GalN 450 mg/kg 和 LPS 100 g/kg,15 h 后,小鼠眼眶取血,分离血清,测定血清谷丙转 氨酶(ALT)、谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)活性5 ;同时 取肝脏0.20.3 g,制成 10%的匀浆,匀浆再以 3 500 rpm 离心 10 min,取上清测脂质过氧化 物(lipid peroxidation,LPO)6和超氧化物歧化酶(superoxide dismutese,SOD) 活性。结果见表 1。 由表 1
10、 可见,茵陈蒿汤醇提物 6 g/kg,9 g/kg,对 D-GalN+LPS 诱导的小鼠血 清 ALT升高有明显的降低作用( P0.01, P 0.01),且作用随着剂量的增大而增强;茵陈蒿汤醇提物 6 g/kg、9 g/kg 可显著降低 D-GalN+ LPS 诱导的肝损伤小鼠血清 GST 活性的增高( P0.05)。茵陈蒿汤 4 g/kg ,6 g/kg,9 g/kg 可显著降低 D-GalN+LPS 引起的肝组织匀浆LPO 水平升高( P0.05, P0.01);茵陈蒿汤醇提物对小鼠肝匀浆 SOD 活性无明显影 响( P0.05)。 表 1 茵陈汤醇提物对 D-GalN+LPS 诱导小鼠
11、肝损伤 ALT、LPO、SOD 及 GST 的影 响 ( s) 组 别 剂量 g/(kg.d) ALT (U) LPO (mol/L) SOD (NU/ml) G ST(IU/L) Normal - 25.50 5.21 0.7680.094 395.2829.10 17.97 3.16 D-GalN+LPS - 171.7281.51* 1.1390.210* 363 .0775.80 40.04 9.93* BDD 0.15 52.7839.37# B 1.78 168.7025.40* 0.9230.198 399.9126.02 41.2312.56 2.67 150.4023.97* 0.8780.214 376.2055.17 42.5718.18 4.0 120.5717.68* 0.8260.202# 382.3554.48 39.6310.40 6.0 72.2915.88* 0.8060.120# 409.10 28.64 26.25 9.46#