1、农药残留检测仪检测方法步骤1.1概述目前,在我国农业上广泛使用的杀虫剂,即有机磷类、氨基甲酸酯类和拟除虫菊酯类农药。其中菊酯类农药对人畜的毒性较低,相对比较安全;而有机磷类和氨基甲酸酯类农药对高等动物(包括人)的毒性高,易引起人畜急性中毒事故,所以人们普遍关注的也主要是这两类农药的残毒问题,所以我们的试剂主要用于检测有机磷和氨基甲酸酯两大类农药。1.2 检测依据蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量快速检测(GB/T5009.199-2003)1.3试剂组成及保存1、缓冲液:取缓冲溶液试剂 1 袋倒入试剂瓶中,加蒸馏水(或纯净水)至 500mL 刻度线,溶解搅拌均匀,备用,室温保存。2、显色剂:
2、向标有“显色剂”的试剂瓶中加入 12.5mL 的缓冲溶液,溶解,混匀即可,50 微升/次。在冰箱中冷藏(04) ,切勿冷冻结冰。3、底物:向标有“底物”的试剂瓶中加入 12.5mL 蒸馏水,溶解、混匀即可,50 微升/次。在冰箱中冷藏(04) ,切勿冷冻结冰。4、酶试剂:敲开玻璃试剂瓶将酶液倒入备用的白色空瓶内,直接使用,在冰箱中冷藏(04) ,切勿冷冻结冰。注意:由于瓶盖中有可能沾染部分试剂粉末,溶解、配置时应注意,不要使这部分试剂粉末损失。试剂盒原包装不拆封在冰箱中冷藏保质期为 1 年,常温保质期 3 个月。1.4 样品制备1、擦去果蔬样品表面泥土,称取 1g 果蔬样品(叶菜剪成宽度1 厘
3、米左右的菜样,块根菜取横截面样品)放入烧杯或提取瓶中,加入 5mL 缓冲溶液,振摇 2 分钟。2、若浸提液澄清无色或颜色较浅,可直接作为待测样液;若浸提液浑浊,则需要过滤,滤液作为待测样液。3、若浸提液色素干扰,可对样品进行整株提取。4、葱、蒜、辣椒、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中,含有对酶有影响的植物次生物质,容易产生假阳性。若需要处理这类样品,可采用整株提取或配套我公司“特别蔬菜样品前处理试剂盒”进行检测。具体方法为:擦去果蔬样品表面泥土,称取 1g 果蔬样品(叶菜剪成宽度 1 厘米左右的菜样,块根菜取横截面样品)放入烧杯或提取瓶中,加入5mL 缓冲溶液,振摇,静置 2 分
4、钟。将提取液全部倒入另一支 10ml离心管,加入 2 滴试剂 A,摇匀沸水浴 5min 后,取出冷却,迷你离心机(6000 转/min)离心 2min,取 2.5ml 澄清液,按照样品测定进行检测。1.5 样品测定对照液测试:对照液测试:取缓冲液 2.5mL,酶试剂 50 微升,显色剂 50 微升至 5ml 离心管中,室温放置 10 分钟或 37水浴5min,然后加入 50 微升底物,摇匀后立即转移到比色皿中,及时放入仪器比色池第一通道中。 (每次开机,对照溶液检测只需进行一次即可,且必须放入 1 通道。 )样品溶液测试:取待测样品液 2.5mL,酶试剂 50 微升,显色剂50 微升至 5ml
5、 离心管中,室温放置 10 分钟或 37水浴 5min,然后加入 50 微升底物,摇匀后立即转移到比色皿中,及时放入仪器比色池中。注:(1)仪器每重新开软件一次,第 1 通道必须放对照溶液,其他通道可以放样品溶液,按键,出检测结果。第二次检测时不需要再放对照液,每个通道都可放入样品溶液,按键,出检测结果。(2)SA 系列的仪器,对照和样品检测都按键进行检测,如需要重新做空白可以选择界面上的“重做”选项。1.6 结果判定根据 GB/T5009.199-2003 要求,抑制率大于 50%时检测结果为阳性,小于 50%为阴性,对于阳性样品要有 2 次以上重复检测。当抑制率达到 50%以上,表明被测样品的农药残留可能超过安全标准,请用气相色谱等仲裁方法确认。山东恒美电子科技还推出胶体金检测卡,胶体金模块检测方式:轨道式自动传输扫描,检测完成后自动退出试纸,检测结果更加准确。注意事项:1、用于移取试剂或样品的器具都要专用,避免交叉污染。2、试剂使用时,必须遵循只出不进原则:从酶试剂、显色剂、底物试剂瓶中移取出的试剂,不得返回试剂瓶中,以免污染原试剂。3、使用试剂必须小心,若试剂不慎接触皮肤,请立即用水清洗。