1、操作规程1出凝血 3.1 活 化 部 分 凝 血 酶 时 间 ( APTT) 测 定 ( 第 四 版 )出凝血 3.2 原理:在 37条件下用激活剂(糅花酸)激活因子 XII 和 XI,以脑磷脂替代血小板提供凝血的催化表面,在因子 IX 的参与下,测定贫血小板血浆的凝固时间。部分活化凝血酶时间测定(APTT)是内源性凝血系统的筛选实验。标本处理:患者处于休息状态下,采空腹静脉血(急诊病人除外) 。采血者应技术熟练, “一针见血” ,以防止组织损伤,使外源性凝血因子进入标本。最好不与其它实验一起采集而使血液停留在针管的时间延长。采完血后,将血液沿管壁缓缓注入试管,避免产生气泡;然后迅速将血液和抗
2、凝剂轻轻颠倒混匀,避免用力震荡。全血要在 1 小时内分离血浆。分离乏血小板血浆时,要在室温下 3000rpm 离心 10 分钟,室温下可存放 4 小时。全部试验不能在 4小时内完成,应将乏血小板血浆分装在 0.51.0ml 的小试管中快速冷冻,储存于-20冰箱中。冷冻过的标本不能再次冷冻,否则结果会不准确。冷冻血浆融化时,应将盛冷冻血浆的容器置于 37水浴中,并轻轻摇动,使其迅速融化。出凝血 3.4 试剂: APTT 试剂:试剂购于天津威士达公司。德灵 Actin 试剂(试剂盒代号 B4218-1) 。每瓶试剂内含磷脂(从兔脑中提取) ,1.0104mol/L 糅花酸,稳定剂共 2ml。0.0
3、25M 氯化钙:实验室自制。试剂从冰箱中取出,室温平衡 15min 后上机分析。操作规程2出凝血 3.5 仪器:使用 Sysmex 公司的 CA-7000 型全自动血液凝固仪。出凝血 3.6 操作:按仪器操作步骤执行标准操作。出凝血 3.1 开机:按下机器侧面的 POWER 按钮。开机后机器进行自检,当屏幕上边显示“Ready:”时可以进行试验。出凝血 3.2 检查消耗品:1、准备反应杯:打开仪器上盖装反应杯的盖子查看反应杯是否够量,不足时,需及时添加。(一次性最多可放 1000 个杯子)2、准备试剂:按照仪器对试剂的要求,把试剂准备好,放到仪器内相应位置,注意查看试剂的量和有效期。如还不熟悉
4、试剂位置时,可在主屏幕上选 Reagent Setting,按屏幕显示放置试剂。3、查看仪器的洗液瓶和废液瓶出凝血 3.3 准备标本:将样本放入样本架,再将样本架放到仪器进样器上。出凝血 3.4 输入检测项目:主菜单上按下 Work List 键,进入工作菜单,输入 APPT 项目。出凝血 3.5 输入样本号: 按屏幕下菜单的 ID No.键,按顺序输入样本的序号。出凝血 3.6 开始检测:录入完所有测试信息,按下屏幕右上角START 键,开始检测。出凝血 3.7 质量控制:使用德灵公司的 leve11 质控品做质量控制。每批质控品的值不超过 2SD。 (详见出凝血 1 质量控制)出凝血 3.
5、8 计算:仪器自动计算出结果。出凝血 3.9 参考值:23s33s,由 DADE BEHRING 公司推荐。操作规程3出凝血 3.10 临床意义:APTT 是内源性凝血系统的筛选实验。APTT 延长:见于凝血因子 VIII、IX、XI、XII、V、II 减低或缺乏,纤维蛋白原缺乏症,抗凝物质存在等。APTT 缩短:见于高凝状态、血栓性疾病等。出凝血 3.11 参考文献:1) 主编王鸿利.止血与血栓检验技术.(第一版 1992.6)上海科学技术出版社.2) 主编李家增 王鸿利 韩忠朝.血液实验学.(第一版 1997.10)上海科学技术出版社.3) 主编邓家栋 杨崇礼 杨天楹.临床血液学.(第一版 1985)上海科学技术出版社.4) 主编邓家栋 杨天楹 杨崇礼.血液学实验诊断.(第一版 1985)天津出版社.5) 中华人民共和国卫生部医政司编.全国临床检验操作规程(第一版 1991).东南大学出版社.