1、摘要：1、营养琼脂（普通琼脂）成份：牛肉浸液（或其它浸液，消化液或肉膏汤） 100 毫升 琼脂（视天气，琼脂质量而定）制法：将上物加热溶解，补足水，调 ph 至 76，过滤分装 121，高压灭菌 15 分钟。用途：作普通琼脂平皿。2、血琼脂平板（BA）制法：取营养琼脂（ PH76） ，加热使其溶解待冷至 45-50，以灭菌操作于每 100 毫升营养 1、营养琼脂（普通琼脂)成份：牛肉浸液（或其它浸液，消化液或肉膏汤) 100毫升琼脂（视天气，琼脂质量而定)制法：将上物加热溶解，补足水，调 ph 至76，过滤分装 121，高压灭菌15分钟。用途：作普通琼脂平皿。2、血琼脂平板（BA)制法：取营养
2、琼脂（PH76)，加热使其溶解待冷至45-50，以灭菌操作于每100毫升营养琼脂加灭菌脱纤维羊血或兔血5-10毫升,轻轻摇匀，立即倾注于平板或分装试管，制成斜面备用。用途：1 一般棉拭子均接种此培养基。2尿液，脓液3分离细菌标本用。3、基础培养基 （肉膏汤 BB)成份：蛋白胨 10克 牛肉膏 5克氯化钠 5克 水 1000毫升制法：将以上各物称好，加水煮沸溶解，用1NNOH 校正 PH 至76，过滤分瓶，121高压灭菌， 20分钟备用。用途：1 作耐药试验，增菌用分装小管。2 作普通琼脂斜面。4、血液培养基（大管肉汤培养基)成份：1 新鲜牛肉浸液 1000毫升2 PABA（对氨基苯甲酸相当于1
3、0mg/毫升) 1g% 1毫升3 MgSO4 相当于0493/100毫升 493% 1毫升4 枸椽酸钠 03g制法：1 将1号，4号混合液，2号，3号液分装高压灭菌。2 取灭菌1，4号混合液用无菌法加入 PABA， MgSO4，再分管，行无菌试验三天方可使用。用途：作血，骨髓培养用。5、肠道杆菌培养基（伊红美兰琼脂)成份： 蛋白胨 10克 乳糖 10克氯化钠 5克 琼脂 25（22)克水 1000毫升 2%伊红溶液20毫升05%美兰溶液 20毫升制法：将蛋白胨，氯化钠琼脂称好，加水1000毫升使溶解，校正 PH74过滤，补足失水，加入2%伊红溶液20毫升，05%美兰溶液20毫升， （115高压
4、20分钟)，冷却至 50左右倾注平板，凝固后存冰箱备用。 （高压以后方可再加乳糖)用途：用作分离沙门氏，志贺氏菌属，也作菌群调查。16、罗文斯坦培养基成份：磷酸二氢钾 24克 硫酸镁 024克枸椽酸钠 06克 天门冬素 36克纯甘油（丙三醇) 12毫升 水 600毫升马铃薯粉 30克 鸡蛋 1000毫升（约3公斤)2%孔雀绿水溶液 20毫升 制法：1 除鸡蛋外（还有孔雀绿)。可将其它物品称好，放入大三角瓶包扎好，高压灭菌。2 鸡蛋用75%酒精泡30分钟，灭菌法打蛋，倒入盛有玻璃珠的灭菌三角烧瓶内充分将鸡蛋摇散。3 将各成份按比例配好，分装每管约5毫升。4 间歇灭菌第一次90 1小时，第二次80
5、 半小时，第三次 80半小时（或放85 烤箱内连续二次 )。质控标准： 1 灭菌试验合格。2 接种结核杆菌要求两星期生长良好。用途：作结核分枝杆菌培养用。7、结核半固体培养基成份：磷酸氢二钠 19克 硫酸镁 06克磷酸二氢钾 25克 天门冬素 5克1%孔雀绿 15克 甘油 20毫升吐温80（10%) 5毫升 水 1000毫升枸椽酸钠 25克 动物血清 100毫升琼脂 15克（80小时用甲醇去脂)1%孔雀绿 078毫升 吐温80（10%) 5毫升加动物血清 100毫升制法： 1 除血清外将上述药品均称好，放入煮沸溶解，调 PH7。22 分管（每管约10毫升)包扎好，高压，121半小时灭菌。3 待
6、冷后无菌法加无菌血清（绵羊血或兔血)每管约1毫升备用。4 去除琼脂方法：取琼脂若干或于三角烧瓶中加甲醇于琼脂1毫升用塞密封，放37 温浴80 小时，每天摇动一次，冷却后到时取出用滤纸过滤，待琼脂自然冷却后备用。质控标准：1无菌实验合格。2琼脂硬度合适而清亮。3接种标准结核杆菌用，强度合适即可用。用途：培养结核杆菌用。8、亚碲酸钾血琼脂平板成份：琼脂基础 100毫升 1 0%葡萄糖 2毫升1%亚碲酸钾 45毫升 绵羊血 10毫升制法：1将琼脂基础溶解好，加入羊血。2马上加热使成咖啡色后，稍冷再加入10%葡萄糖2毫升与1%亚碲酸45毫升混合后倒入无菌平板，凝固后存冰箱备用。质控标准：接种白喉杆菌生
7、长良好，其它革兰氏阴性菌均抑制生长。用途：供培养及鉴别白喉杆菌用。 9、米培养基成份：白米 20克 水 1000毫升琼脂 20克 吐温80 10毫升制法：1将20克米加水200毫升煮沸45分钟，煮时将容器盖好。2用纱布过滤，只要米汤，不要饭，加水至1000毫升。3加琼脂20克，吐温-80 10毫升煮溶，分装中型管（每管约3毫升)，包扎好，高压，121半小时，消毒备用。质控标准：1灭菌。2要求清亮。3接种白色念珠菌17-24小时生长良好，并产生厚膜孢子。用途：培养白色念珠菌用。10、蛋白胨水培养基成份：蛋白胨 1克 氯化钠 05克水加至 100毫升 PH 调至 78制法：把以上各物称好溶于水，调
8、节 PH76分装消毒备用。质控标准：1 放置37无菌生长。2 接种大肠杆菌24小时生长良好。3 可作中国兰平板基础液。可作靛基质基础液（作此试验需要色氨酸蛋白胨)。11、血培养基成份：蛋白胨 10克 牛肉膏 5克氯化钠 5克 葡萄糖 3克枸椽酸钠 3克 MgSO4。7H2O 20毫升05%PABA 10毫升 酵母浸液 10毫升 02克（2%过滤)*酚红04% 6毫升 水 1000毫升琼脂 05克 *：作大 BB，小 BB 时，不要加酚红和琼脂。制法：1、除 PABA、硫酸镁、酚红外均称好煮化调 PH742、调好 PH 后再加酚红。3、硫酸镁、PABA 另外无菌再加入（亚细，小 BB)12、沙氏
9、培养基成份：蛋白胨 1克 水 100毫升琼脂 15克（琼脂粉1克%) 葡萄糖或麦芽糖 4克制法：1将上述物质称好，放入水中煮沸溶解（不必调 PH 即有5左右)分中号试管（约4毫升) 包扎，高压11520分钟。2 趁热斜好，凝固备用。质控标准：1无菌试验合格。2接种霉菌比在其它培养基上生长良好，其它菌生长不好。用途：作分离培养霉菌用。注意：1 接种临床新鲜标本可先加1-2滴70%酒精让干后再接种于含125%氯霉素沙氏斜面培养基上。2 也可用蜂蜜8克代替葡萄糖或麦芽糖。13、肉渣培养基成份： 牛肉渣 牛肉浸液（牛肉膏)制法：将做牛肉浸液的牛肉渣，装入试管，高约3毫米，加入牛肉浸液或牛肉膏汤（PH7
10、 6)约5毫升，比肉渣高一倍，液面上加入已溶解的凡士林，高约05厘米（不加也可)，121 高压灭菌20-30 分钟后保存于冰箱内备用 。用途：用于厌氧菌培养。注意：如无肉渣也可用牛、羊血等代替，将血块先放入水内煮沸，取出成小块，血块在加热后摇匀成碎颗粒状。14、单糖发酵管培养基（半固体)成份： PH76-78蛋白胨水 1000毫升（03克/100 毫升)1.2%酚红液 04毫升琼脂 04 - 05克10%糖或醇 10毫升制备：把蛋白胨水，琼脂加热溶解，然后加12%酚红液04毫升，10%糖10毫升，混匀，分装试管，每管约2-3毫升，经115 高压灭菌20分钟后，分置于试管架上，贴上各类糖或醇类标
11、签备用。质控标准：细菌发酵糖类或醇而产生酸，能使培养基 PH 改变，指示剂由红变黄色，如因发酵产生气体则半固体内产生气泡，如有动力则半固体由清亮变混浊。15、明胶培养基成份：肉浸液 1000毫升（牛肉浸膏5克)明胶 12克制法：100毫升肉浸液中，加入明胶12克，隔水加热煮化，校正 PH72，分装小号试管，用阿诺氏间歇灭菌8030分钟，连续3日，或者108 高压20分钟，冷却，贮存备用。15-1、碱性蛋白胨水成份：蛋白胨 20克 氯化钠 5克硝酸钾 01克 结晶碳酸钠（NaclCO3 12H2O) 02克水 1000毫升制法：将蛋白胨，Nacl ，硝酸钾，结晶碳酸钠称好，溶于1000DW 中，
12、校正PH8 4分装试管，121 高压灭菌15分钟后备用 。用途：用于霍乱弧菌培养。16、葡萄糖蛋白胨水（M。V 用)成份：蛋白胨 5克 葡萄糖 5克K2HPO4 5克 水 1000毫升制法：将上述称好溶解分装试管，调 PH74高压灭菌115 灭菌20分钟 ，或者葡萄糖加热煮沸后再倒试管标准：灭菌试验合格。接种大肠杆菌 VP 阴性，M 阳性；接种产气杆菌 VP 阳性，M 阴性。用途：作鉴别肠道杆菌用。17、枸椽酸盐培养基成份：磷酸二氢铵 01克 硫酸镁 002克磷酸氢二钾 01克 枸椽酸钠 023-05克（036)氯化钠 05克 琼脂 15克05%溴麝香草酚兰2毫升 （调 PH68再加)制法：将
13、上述称好，放入水中煮沸溶解，调 PH68，然后分装中号试管，高压灭菌，趁热倒呈斜面，凝固后备用。标准：1、灭菌试验合格，培养基呈果绿色适宜。2、接种大肠杆菌，培养基上不生长，也不变色。3、接种产气杆菌，培养基呈深兰色。用途：作鉴别大肠杆菌用。18、双糖铁培养基成份：下层：蛋白胨 1克 氯化钠 05克葡萄糖 02克 琼脂 03-05克水 100毫升将上述物质混匀调 PH76后加12%酚红04毫升上层：蛋白胨 1克 氯化钠 05克乳糖 1克 硫代硫酸钠 003克硫酸亚铁 002克 琼脂 1克水 100毫升制法： 1将下层配好，分装中号试管（1毫升)，塞好包扎，15磅高压灭菌半小时，使凝固后备用。2
14、制上层时，先将蛋白胨水制好，加入硫酸亚铁，硫代硫酸钠，加热溶解 PH81，再加入酚红分瓶， （每瓶300毫升，称取琼脂包扎灭菌，趁热加入乳糖隔水煮沸30分钟或112 消毒15分钟)。3取已制的下层管，每管用无菌法倒入上层液约1。5毫升，边斜放置使成斜面，凝固后备用。标准：无菌试验合格，接种大肠杆菌下层产酸产气，上层产酸。19、尿素培养基成份：蛋白胨 01克 氯化钠 05克磷酸二氢钾 02克 尿素 02克（或10%2毫升)葡萄糖 001克（或10%葡萄糖01毫升)H2O 100毫升 酚红（02%) 04毫升制法：1除葡萄糖，尿素外把其它药品称好放入水中煮沸，使溶解，调 PH72过滤，15磅高压灭
15、菌15分钟2配制尿素（灭菌)液：每100毫升基液内加2毫升3配制10%葡萄糖（灭菌)每100毫升加01毫升4分装小试管待用标准：1灭菌试验合格2接种变形杆菌24小时呈红色用途：鉴定变形杆菌用20、胆盐中性红琼脂成份：蛋白胨琼脂 PH72-74 5000毫升胆 盐 25克乳糖 50克对氨基苯甲酸 25毫克1%中性红溶液 25毫升制法：将胆盐，对氨基苯甲酸，乳糖趁热加入已灭菌之蛋白胨琼脂中，待冷至50-60时，加入1%中性红液 25毫升，混合后即倾注平皿，凝固待用*：1%中性红：1克中性红加酒精60毫升，加水40毫升21、丙二酸盐培养基（缩苹果酸钠)成份：丙二酸钠 03克 酵母浸膏 01克Nacl 02克 硫酸铵 02克K2HPO4 006克 KH2PO4 004克水 100毫升PH68，高压灭菌备用02%溴麝香酚兰乙醇 125毫升制法：与枸椽酸盐利用试验相类似，是测定细菌能否利用丙二酸盐与碳源无机铵盐为氨源而生长，生长者使培养基变成碱呈兰色鉴定： 克氏杆菌 （+) 赫夫尼亚 （+)沙门氏菌 （ ) 痢疾杆菌 （ )
