1、 （一）T 细胞亚群检测E 玫瑰花结形成试验（ERFT）T 细胞表面的特异性绵羊红细胞（E）受体，可以与绵羊红细胞结合形成花结样细胞，称为 ERFTT 细胞亚群分析及意义白细胞分化抗原（CD）：CD3 代表总 T 细胞； CD3 /CD4 代表 T 辅助细胞 Th； CD3 /CD8 代表 T 抑制细胞（Ts） ； CD4 /CD8 代表比值CD3 / CD4 1、下降常见于恶性肿瘤、免疫缺陷症、艾滋病、免疫抑制剂。CD3 / CD8 1、下降见于自身免疫疾病如：类风湿关节炎、干燥综合征、重症肌无力等；2、传单、巨细胞病毒感染、慢性乙肝可升高。CD4 /CD8 1、比值下降见于艾滋病 0.5
2、2、比值升高见于RA、SLE 、SS 、膜型肾小球肾炎等。 （二）B 细胞分化抗原检测B 淋巴细胞主要功能：产生抗体(唯一能产生抗体的细胞)；递呈抗原；分泌细胞因子参与免疫调节BLC 表面标志 CD19 正常值（11.74 3.37）%1、升高 见于急淋、慢淋、Burkitt 淋巴瘤 2、降低 见于免疫抑制剂（三）NK 细胞活性测定：抗肿瘤抗感染指标（四）细胞因子检测定义：由免疫细胞或相关细胞产生的调节细胞功能的高活性、多功能的低分子蛋白质。判断机体免疫功能，协助诊断、病情观察、不具有特异性，疗效预后判断。常用的细胞因子：IL-1、 IL-2、IL-4、IL-6 、IL-10，肿瘤坏死因子（T
3、NF） ，IFN干扰素（IFN）：是宿主细胞受病毒感染后产生的一种非特异性防御因子，具有抗病毒、抗肿瘤、免疫调节、控制细胞增殖的作用。 肿瘤标志物检查肿瘤标志物（tumour marker，TM）：由肿瘤细胞本身合成、释放，或是机体对肿瘤细胞反应产生或者升高的一类物质存在于患者血液、体液、细胞或组织中。肿瘤标志物的分类：蛋白类、糖脂类、酶类、激素类（一）胚胎抗原和蛋白类肿瘤标志物 甲胎蛋白（APF ）：诊断肝癌的重要指标， 4.0ug/L）,随病情进展升高，与疾病复发相关；前列腺肥大、前列腺炎及泌尿生殖性疾病也可见升高； f-PSA/t-PSA 比值测定更有价值；前列腺酸性磷酸酶（PAP）可作
4、为 PSA 补充测定其它恶性肿瘤也有一定程度阳性；采集血标本前避免刺激前列腺的操作如肛检、膀胱镜、导尿及前列腺按摩。 鳞状细胞癌抗原（SCC）：分子量 42，000 的糖蛋白，鳞癌肿瘤标志物，1.5ug/L。 SCC 见于宫颈癌、肺癌、鼻咽癌、食道癌等。肝炎肝硬化、胰腺炎等其它疾病也可见到升高。血液标本应避免其他体液的污染。 （二）糖脂类肿瘤标志物检测CA 72-4：胃癌首选CA l9-9：胰腺癌、胆囊癌、胆道癌敏感性高，作为首选指标。CA l25： 卵巢癌相关抗原CA l5-3：乳腺癌相关抗原，不能用于筛查和早期诊断（三）酶类肿瘤标志物前列腺酸性磷酸酶（PAP ）：前列腺癌，首选。-L岩藻糖
5、苷酶测定（ AFU）：原发性肝癌首选。神经元特异性烯醇化酶（NSE）：小细胞肺癌、神经母细胞瘤首选、神经内分泌肿瘤等。（四）激素类肿瘤标志物人绒毛膜促性腺激素（hCG）：绒毛膜癌、干细胞肿瘤首选，女性葡萄胎、其他肿瘤及肝硬 化等。降钙素（ CT）：甲状腺髓样癌、部分肺癌、乳腺癌等。 （五）肿瘤标志物的联合检测单一种癌细胞可产生多种肿瘤标志，而在不同肿瘤患者体内，这些标志物的质和量差异较大，因此单靠某一种标志物测定，可能会因方法的敏感性而只在该标志物含量高的患者体内测出，使含量低的患者漏检。联合检测多种标志物，可减少此类情况，提高肿瘤的检出率。 自身抗体检测是自身免疫病的标记，有助于弥漫性结缔组
6、织病（CTD）的诊断和鉴别诊断，判断疾病的活动性，预测疾病的预后。(一)类风湿因子（ Rheumatoid Factor，RF）抗人或动物的 IgG 的 FC 片段抗体。其本身是免疫球蛋白，因此，RF 有IgG、IgM 、IgA 型等。RF 无种族和种属特异性如何评价类风湿因子是诊断 RA 的标准之一，不是唯一标准，并非 RA 特有血清阴性作为脊柱关节病区分标准正常人 2%阳性，老年人可达 5%阳性多种结缔组织病、感染疾病、肝硬化，弥漫性肺纤维化，结节病等均可阳性（二）抗核抗体（ANA）是自身免疫病的标记，有助于弥漫性结缔组织病（CTD）的诊断和鉴别诊断，判断疾病的活动性及预测疾病的预后。主要
7、为 IgG通用的检测方法为间接免疫荧光法ANA 小结 抗双链 DNA-对诊断 SLE 高度特异，并与疾病活动有关。DNA-抗 DNA 免疫复合物在狼疮肾炎中起重要作用 抗 Sm-是 SLE 标记抗体，帮助前瞻性和回顾性诊断，常与 nRNP 抗体共存 抗 nRNP-在多种结缔组织病中存在，高滴度有利于 MCTD 的诊断。nRNP抗原与 rRNP 不同，前者是含尿嘧啶的核糖核蛋白，主要在核内，而 rRNP是主要在胞浆内的磷酸蛋白，抗 rRNP 抗体与 SLE 有关，尤其有精神神经症状的 SLE 阳性率较高 抗 SSA 和抗 SSB-与 Sjogrens Syndrome 相关，并可造成新生儿狼疮和
8、先天性心脏传导阻滞 抗 ScL-70-硬皮病的标记抗体 抗着丝点抗体-与系统性硬化症有关，但并非 标记抗体，在干燥综合征，某些慢性肝病中亦可阳性 抗组蛋白抗体-与多种结缔组织病有关，有助于药物性狼疮的诊断。 抗核仁型抗体-常与硬皮病有关 抗胞质抗体测定（简单了解） （不属于传统 ANA 范畴）抗线粒体抗体（AMA）：M2 亚型，原发性胆汁性肝硬化（PBC） ，可鉴别肝外胆道阻塞性肝硬化。抗肌动蛋白抗体：慢性肝病、肝硬化、自身免疫性肝炎等。抗 Jo-1 是多发性肌炎/皮肌炎的标记抗体，抗 Jo-1 阳性的肌炎患者，伴关节炎、“技工手”、雷诺症、肺间质变等称合成酶抗体综合征。自身抗体与脏器受累的相
9、关性抗 Jo-1 抗体综合征 皮肌炎、肺间质病、多关节炎、雷诺现象、技工手抗 RNP 抗体 雷诺现象、腊肠指、肌炎、指硬化抗 rRNP 中枢神经系统狼疮、活动性、SLE抗双链 DNA 抗体 狼疮肾炎、活动性狼疮抗着丝点抗体 系统性硬化（三）抗组织细胞抗体 抗肾小球基底膜抗体：抗肾小球基底膜抗体性肾小球肾炎，如急进型肾小 球肾炎等。 抗胃壁细胞抗体：恶性贫血、慢性萎缩性胃炎、部分甲状腺炎。 抗甲状腺抗体：抗甲状腺球蛋白抗体和抗甲状腺过氧化物酶抗体均见于桥本氏甲状腺炎、甲亢、亚急性甲状腺炎等。 抗平滑肌抗体：自身免疫性肝炎、原发性胆汁性肝硬化、原发性硬化性胆管炎、急性病毒性肝炎等。 （四）其他抗体
10、检测抗中性粒细胞胞浆抗体（Anti-Neutrophil Cytoplasmic Antibody,ANCA） 抗中性粒细胞胞质抗体 cANCA 此种抗体主要与 Wegeners 肉芽肿相关，结节性多发性动脉炎也可阳性。抗中性粒细胞核周抗体（Anti-Neutrophil perinucleic Antibody,pANCA ） pANCA 的主要靶抗原为髓过氧化物酶（MPO） pANCA 见于多种系统性血管炎性肾炎。40-80%的微多动脉炎与 pANCA 相关。大部分资料提示，ANCA 阳性的微多动脉炎，通常与肾小球肾炎及/ 或肺毛细血管炎相关。 pANCA 还见于多种自身免疫性疾病抗心磷脂
11、（Cardiolipin）抗体（ACA） SLE 患者 70-80%阳性。其他自身免疫性疾病，如 RA、原发性血小板减少性紫癜及感染（尤在病毒）和药物因素均可阳性（+） 。 高滴度 IgG 抗心脂抗体的 SLE 患者 40%发生动、静脉栓塞附：研究进展-栓塞的机理 与血管内皮细胞的磷脂结合,使前列腺素合成减少,血管收缩 与血小板膜磷脂作用,血小板聚集形成血栓 直接损伤内皮细胞,抑制纤溶酶原激活物释放而促进血栓形成 诱导炎症爆发进展-出血机理 与血小板膜或红细胞膜丝氨酸磷脂结合发生聚集，和/或被网状内皮系统吞噬或破坏，使之血小板和红细胞破坏，减少。造成出血性紫癜，或溶血进展-抗磷脂抗体综合征（A
12、PS） APS 主要临床表现：反复流产，静脉血栓，动脉闭塞，下肢溃疡，网状 青斑，溶贫，血小板减少 高水平抗磷脂抗体加一项表现，或低水平抗磷脂抗体加 2 项或 2 项以上表现则疑似 APS 继发性 APS：合并 SLE，SS ，CTD，肿瘤，药物，感染等 诊断 APS 应排除血流阻滞，血凝等其他因素，排除肾病，糖尿病，高血脂，肿瘤及血管炎；流产原因可为染色体异常，内分泌，药物，感染等因素感染免疫检测感染后病原体抗体检测的意义，现症感染的证据，既往感染的证据（一）细菌感染免疫 ASO 肥达（名解问答）是利用伤寒和副伤寒沙门菌菌液为抗原，检测病人血清中有无相应抗体的一种凝集试验（具体见 P435）
13、 、外斐氏反应 脑膜炎奈瑟菌抗原测定 结核分枝杆菌抗体及 DNA 测定 幽门螺杆菌抗体（二）病毒感染免疫 TORCH 试验（名解）：包括弓形虫、风疹病毒、单疱、CMV，为妇产科产前的常规检查项目。 HTV（汉坦病毒）抗体：IgM 嗜异性凝集试验及吸收实验：传单（EBV） SARS-CoV：RNA 检测（三）寄生虫感染免疫检测 血吸虫抗体测定：IgE、IgM 提示早期； IgG 提示恢复期 囊虫抗体：IgG 疟原虫抗体和抗原测定：（四）性传播疾病（STD）免疫检测 沙眼衣原体：IgM 支原体 梅毒螺旋体抗体：RPR，TPHA 淋球菌协同凝集试验与 PCR HIV：ELSA（筛选） ，印迹法/RT
14、-PCR RNA（确认）（五）其他C反应蛋白检测（名解问答）C反应蛋白（CPR）是一种由肝脏合成的，能与肺炎双球菌细胞壁 C多糖起反应的急性时相反应蛋白。临床意义：是急性时相反应极灵敏的指标。CRP 升高：见于化脓性感染、组织坏死（心肌梗死、严重创伤、大手术、烧伤等） 、恶性肿瘤、结缔组织病、器官移植、急性排斥等。鉴别细菌性或非细菌性感染：前者 CRP 升高，后者不升高。鉴别风湿热活动期和稳定期：前者 CRP 升高，后者不升高。鉴别气质性和功能性疾病：前者 CRP 升高，后者不升高。但是孕妇含量较高。病毒性肝炎血清标志物检查概念 ：病毒性肝炎是由肝炎病毒引起肝功能损害而致的临床症候群，根据病原
15、学可分为甲戊型病毒性肝炎，HGV 和 TTV 的致病性尚无定论。一、病原学-HAV 甲型肝炎病毒（HAV） 生物学特性、基因结构 检测方法：ELISA（正常阴性） 抗原抗体系统 抗 HAV-IgM-急性感染标志 、临床诊断检查； 抗 HAV-IgG-保护性抗体 ，流行病学调查意义； 分子生物学标志 HAV-RNA（血、粪） 早期诊断二、乙型肝炎病毒（HBV） 病毒分类：嗜肝 DNA 病毒科（Hepadnaviridae ） 病毒颗粒（Dane 颗粒）与结构：包膜与核心 HBV 三种不同抗原抗体系统表面抗原抗体系统（HBsAg/抗 HBs） HBsAg ： 主要抗原决定簇及亚型，感染标记 抗 H
16、Bs ： 保护性抗体 空窗期 HBeAg ：可溶性抗原，与病毒复制密切相关。 抗 HBe ：非保护性抗体临床意义：恢复期、过去感染、传染性小；仍有病毒复制，其传染性视病毒复制状态而定。长期抗 HBe 阳性（2 年）病毒DNA 与宿主基因整合。 HBcAg ：仅为病毒的核心成份，可存在于病毒颗粒中或肝细胞中，是病毒复制标志物。 抗 HBc 高滴度，病毒复制，常与 HBsAg 或/和 HBeAg 同时阳性。低滴度：过去感染，常无病毒抗原，如 HBsAg、HBeAg。 抗 HBc-IgM：见于急性感染，病毒复制期（慢性感染）HBV 分子生物学标志：HBV-DNA 及 DNAP 是病毒复制最直接的标志
17、三、丙型肝炎病毒（HCV） 生物学特点与分类 血液传播HCV 感染后的主要标志物 抗 HCV，非保护性抗体； HCV-RNA，病毒血症的依据； 抗 HCV 阳性为丙肝的诊断依据，IgM 阳性提示病情早期、活动及传染性，IgG 晚于 IgM 出现，表明有感染。 RNA 定性和定量四、丁型肝炎病毒（HDV） 生物学特点，缺陷性病毒 基因结构，环状单链 RNA 感染后标志物：抗 HD-IgM、抗 HD-IgG、HDV-RNA 其中 IgM 急性感染，出现早，维持短，可用于 早期诊断。 五、戊型肝炎病毒（HEV） 生物学特点 基因结构 感染后标志物：抗 HEV、HEV-RNA 临床与甲肝相似检测选择与
18、应用 病原学不同，必须加以检测鉴别； 不同传播途径鉴别： 经消化道传播的病毒性肝炎（甲、戊） 流行三个环节 传染源：亚临床感染、急性患者 传播途径：粪口传播 易感人群：甲型肝炎，6 个月学龄期儿童。戊型肝炎，普遍易感。甲肝、戊肝比较甲型肝炎 戊型肝炎流行方式 散发为主、流行 散发为主、流行 流行季节 秋冬季为主，全年有散发 雨季或洪水后，全年散发 获得性免疫 稳固 不稳固,抗体反持续 1 2 年发病高峰年龄 6 个月学龄期儿童 儿童发病少，成人发病多见经消化道外传播的病毒性肝炎（乙、丙、丁） 流行 3 个环节 传染源：病毒携带者的各型有病毒复制的肝炎患者。 传播途径： 输血、注射传播（体液传播）社区获得性传播（接触传播、家庭感染的聚集性）母婴传播性接触传播医院内感染 易感人群：普遍易感流行特点 乙型肝炎：发病率存在明显地区性，母婴传播率高，传染性大 丙型肝炎：发病率无明显地区性，母婴传播机会小于乙型肝炎 丁型肝炎：不会单独发病，往往在乙肝基础上重叠。 从临床角度选择不同标志物检测： 从献血、输血角度选择不同肝炎标志物；
