1、当今显微镜种类及用途1.光学显微镜通常皆由光学部分、照明部分和机械部分组成。无疑光学部分是最为关键的,它由目镜和物镜组成。早于1590 年,荷兰和意大利的眼镜制造者已经造出类似显微镜的放大仪器。光学显微镜的种类很多,主要有明视野显微镜(普通光学显微镜) 、暗视野显微镜、荧光显微镜、相差显微镜、激光扫描共聚焦显微镜、偏光显微镜、微分干涉差显微镜、倒置显微镜。1.1.暗视野显微镜 暗视野显微镜由于不将透明光射入直接观察系统,无物体时,视野暗黑,不可能观察到任何物体,当有物体时,以物体衍射回的光与散射光等在暗的背景中明亮可见。在暗视野观察物体,照明光大部分被折回,由于物体(标本) 所在的位置结构,厚
2、度不同,光的散射性,折光等都有很大的变化。1.2.相位差显微镜相位差显微镜的结构: 相位差显微镜,是应用相位差法的显微镜。因此,比通常的显微镜要增加下列附件: 装有相位板(相位环形板)的物镜,相位差物镜。 附有相位环(环形缝板)的聚光镜,相位差聚光镜。 单色滤光镜-(绿) 。各种元件的性能说明 相位板使直接光的相位移动 90,并且吸收减弱光的强度,在物镜后焦平面的适当位置装置相位板,相位板必须确保亮度,为使衍射光的影响少一些,相位板做成环形状。 相位环(环状光圈)是根据每种物镜的倍率,而有大小不同,可用转盘器更换。 单色滤光镜系用中心波长 546nm(毫微米)的绿色滤光镜。通常是用单色滤光镜入
3、观察。相位板用特定的波长,移动 90看直接光的相位。当需要特定波长时,必须选择适当的滤光镜,滤光镜插入后对比度就提高。此外,相位环形缝的中心,必须调整到正确方位后方能操作,对中望远镜 就是起这个作用部件。相位差显微镜的整体外形光学显微镜原理1.3.视频显微镜 将传统的显微镜与摄象系统,显示器或者电脑相结合,达到对被测物体的放大观察的目的。 最早的雏形应该是相机型显微镜,将显微镜下得到的图像通过小孔成象的原理,投影到感光照片上,从而得到图片。或者直接将照相机与显微镜对接,拍摄图片。随着CCD 摄像机的兴起,显微镜可以通过其将实时图像转移到电视机或者监视器上,直接观察,同时也可以通过相机拍摄。80
4、 年代中期,随着数码产业以及电脑业的发展,显微镜的功能也通过它们得到提升,使其向着更简便更容易操作的方面发展。到了 90 年代末,半导体行业的发展,晶圆要求显微镜可以带来更加配合的功能,硬件与软件的结合,智能化,人性化,使显微镜在工业上有了更大的发展。随着 CMOS 镜头技术在显微镜领域应用的成熟,及数码输出技术的发展,其 市面上的视频显微镜,不仅有通过 PC 机来显示显微图片的视频显微镜,还有显微镜本身有独立屏幕的视频显微镜,例如 3R 的 MSV35;有可通过无线传输方式可移动的无线视频显微镜,其都脱离了 PC 机的显示,例如 3R 的 WM401TV、WM601TV ,且其 CMOS 镜
5、头的显微镜其大小要比传统的显微镜更加精巧,可应用于现场进行显微观测。1.4.荧光显微镜 以紫外线为光源,使被照射的物体发出荧光的显微镜。荧光显微镜原理: 光源:光源辐射出各种波长的光(以紫外至红外) 。 激励滤光源:透过能使标本产生萤光的特定波长的光,同时阻挡对激发萤光无用的光。 荧光标本:一般用荧光色素染色。 阻挡滤光镜:阻挡掉没有被标本吸收的激发光有选择地透射荧光,在荧光中也有部分波长被选择透过。1.5.偏光显微镜 偏光显微镜是用于研究所谓透明与不透明各向异性材料的一种显微镜。凡具有双折射的物质,在偏光显微镜下就能分辨的清楚,当然这些物质也可用染色法来进行观察,但有些则不可能,而必须利用偏
6、光显微镜。偏光显微镜的特点将普通光改变为偏振光进行镜检的方法,以鉴别某一物质是单折射(各向同性)或双折射性(各向异性) 。双折射性是视频显微镜偏光显微镜晶体的基本特性。因此,偏光显微镜被广泛地应用在矿物、化学等领域,在生物学和植物学也有应用。1.6.超声波显微镜 超声波扫描显微镜的特点在于能够精确的反映出声波和微小样品的弹性介质之间的相互作用,并对从样品内部反馈回来的信号进行分析!图像上(C-Scan)的每一个象素对应着从样品内某一特定深度的一个二维空间坐标点上的信号反馈,具有良好聚焦功能的 Z.A传感器同时能够发射和接收声波信号。一副完整的图像就是这样逐点逐行对样品扫描而成的。反射回来的超声
7、波被附加了一个正的或负的振幅,这样就可以用信号传输的时间反映样品的深度。用户屏幕上的数字波形展示出接收到的反馈信息(A-Scan) 。设置相应的门电路,用这种定量的时间差测量(反馈时间显示) ,就可以选择您所要观察的样品深度。1.7.解剖显微镜 解剖显微镜,又被称为实体显微镜、体视显微镜或立体显微镜,是为了不同的工作需求所设计的显微镜。利用解剖显微镜观察时,进入两眼的光各来自一个独立的路径,这两个路径只夹一个小小的角度,因此在观察时,样品可以呈现立体的样貌。解剖显微镜的光路设计有两种:The Greenough Concept 和The Telescope Concept。解剖显微镜常常用在一
8、些固体样本的表面观察,或是解剖、钟表制作和小电路板检查等工作上。1.8.共聚焦显微镜 从一个点光源发射的探测光通过透镜聚焦到被观测物体上,如果物体恰在焦点上,那么反射光通过原透镜应当汇聚回到光源,这就是所谓的共聚焦,简称共焦。激光扫描共聚焦显微镜Confocal Laser Scanning Microscope(CLSM 或 LSCM)在反射光的光路上加上了一块半反半透镜(dichroic mirror),将已经通过透镜的反射光折向其它方向,在其焦点上有一个带有针孔(Pinhole),小孔就位于焦点处,挡板后面是一个 光电倍增管(photomultiplier tube,PMT) 。可以想像
9、,探测光焦点前后的反射光通过这一套共焦系统,必不能聚焦到小孔上,会被挡板挡住。于是光度计测量的就是焦点处的反射光强度。其意义是:通过移动透镜系统可以对一个半透明的物体进行三维扫描。1.9.金相显微镜 金相显微镜主要用于鉴定和分析金属内部结构组织,它是金属学研究金相的重要仪器,是工业部门鉴定产品质量的关键设备,该仪器配用摄像装置,可摄取金相图谱,并对图谱进行测量分析,对图象进行编辑、输出、存储、管理等功能。 国内厂家较多,历史悠久。解剖显微镜1.10.生物显微镜生物显微镜是用来观察生物切片、生物细胞、细菌以及活体组织培养、流质沉淀等的观察和研究,同时可以观察其他透明或者半透明物体以及粉末、细小颗
10、粒等物体。生物显微镜也是食品厂、饮用水厂办 QS、 HACCP 认证的必备检验设备。用途:用于生物学、细菌学、组织学、药物化学等研究工作以及临床度验之用。具有粗微动同轴的调焦机构,滚珠内定位转换器,亮度可调的照明装置,并带有摄影、摄像接口。2.电子显微镜 电子显微镜有与光学显微镜相似的基本结构特征,但它有着比光学显微镜高得多的对物体的放大及分辨本领,它将电子流作为一种新的光源,使物体成像。自 1938 年 Ruska 发明第一台透射电子显微镜至今,除了透射电镜本身的性能不断的提高外,还发展了其他多种类型的电镜。如扫描电镜、分析电镜、超高压电镜等。结合各种电镜样品制备技术,可对样品进行多方面的结
11、构 或结构与功能关系的深入研究。显微镜被用来观察微小物体的图像。常用于生物、医药及微小粒子的观测。电子显微镜可把物体放大到 200 万倍。3.便携式显微镜便携式显微镜,主要是近几年发展出来的数码显微镜与视频显微镜系列的延伸。和传统光学放大不同,手持式显微镜都是数码放大,其一般追求便携, 小巧而精致,便于携带; 且有的手持式显微镜有自己的屏幕,可脱离电脑主机独立成像, 操作方便, 还可集成一些数码功能 ,如支持拍照, 录像, 或图像对比 ,测量等功能。 数码液晶显微镜,最早是由博宇公司研发生产的,该显微镜保留了光学显微镜的清晰,汇集了数码显微镜的强大拓展、视频显微镜的直观显示和便携式显微镜的简洁方便等优点。生物显微镜电子显微镜成像原理便携式显微镜参考文献http:/