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常用培养基及抗生素培养方法.doc

上传人:scg750829 文档编号:7778731 上传时间:2019-05-25 格式:DOC 页数:2 大小:40KB
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1、LB 培养基将下列组分溶解在 0.9L 水中:蛋白胨 10g酵母提取物 5g氯化钠 10g如果需要用 1N NaOH(1ml)调整 pH 至 7.0,再补足水至 1L。注:琼脂平板需添加琼脂粉 12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉 7g/L。SOB 培养基将下列组分溶解在 0.9L 水中:蛋白胨 20g酵母提取物 5g氯化钠 0.5g1 mol/L 氯化钾 2.5ml用水补足体积到 1L。分成 100ml 的小份,高压灭菌。培养基冷却到室温后,再在每 100ml 的小份中加 1ml灭过菌的 1mol/L 氯化镁。SOC 培养基成分、方法同 SOB 培养基的配制,只是在培养基冷却到室温后,除了在每

2、 100ml 的小份中加 1ml 灭过菌的1mol/L 氯化镁外,再加 2ml 灭菌的 1mol/L 葡萄糖(18g 葡萄糖溶于足够水中,再用水补足到 100ml,用0.22um 的滤膜过滤除菌)。TB 培养基将下列组分溶解在 0.9L 水中:蛋白胨 12g酵母提取物 24g甘油 4ml各组分溶解后高压灭菌。冷却到 60,再加 100ml 灭菌的 170mmol/L KH2PO4/0.72 mol/L K2HPO4 的溶液(2.31g 的 KH2PO4 和 12.54gK2HPO4 溶在足量的水中,使终体积为 100ml。高压灭菌或用 0.22um 的滤膜过滤除菌)。2YT 培养基将下列组分溶

3、解在 0.9L 水中:蛋白胨 16g酵母提取物 10g氯化钠 4ml如果需要用 1N NaOH(1ml)调整 pH 至 7.0,再补足水至 1L。注:琼脂平板需添加琼脂粉 12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉 7g/L。YPD 培养基将下列组分溶解在 0.9L 水中:蛋白胨 20g酵母提取物 10g葡萄糖 20g用水补足体积为 1L 后,高压灭菌。建议在高压灭菌之前,对色氨酸营养缺陷型每升培养基添加 1.6g 色氨酸,因为 YPD 培养基是色氨酸限制型培养基。为了配制平板,需要在高压灭菌前加入 20g 琼脂粉。氨苄青霉素(ampicillin)(100mg/ml)溶解 1g 氨苄青霉素钠盐于足量

4、的水中,最后定容至 10ml。分装成小份于-20贮存。常以25ug/ml50ug/ml 的终浓度添加于生长培养基。羧苄青霉素(carbenicillin)(50mg/ml)溶解 0.5g 羧苄青霉素二钠盐于足量的水中,最后定容至 10ml。分装成小份于-20贮存。常以25ug/ml50ug/ml 的终浓度添加于生长培养基。甲氧西林(methicillin)(100mg/ml)溶解 1g 甲氧西林钠于足量的水中,最后定容至 10ml。分装成小份于-20贮存。常以 37.5ug/ml 终浓度与 100ug/ml 氨苄青霉素一起添加于生长培养基。卡那霉素(kanamycin)(10mg/ml)溶解

5、100mg 卡那霉素于足量的水中,最后定容至 10ml。分装成小份于-20贮存。常以 10ug/ml50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。氯霉素(chloramphenicol)(25mg/ml)溶解 250mg 氯霉素足量的无水乙醇中,最后定容至 10ml。分装成小份于-20贮存。常以12.5ug/ml25ug/ml 的终浓度添加于生长培养基。链霉素(streptomycin)(50mg/ml)溶解 0.5g 链霉素硫酸盐于足量的无水乙醇中,最后定容至 10ml。分装成小份于-20贮存。常以10ug/ml50ug/ml 的终浓度添加于生长培养基。萘啶酮酸(nalidixic acid)(5mg/ml)溶解 50mg 萘啶酮酸钠盐于足量的水中,最后定容至 10ml。分装成小份于-20贮存。常以 15ug/ml 的终浓度添加于生长培养基。四环素(tetracyyline)(10mg/ml)溶解 100mg 四环素盐酸盐于足量的水中,或者将无碱的四环素溶于无水乙醇,定容至 10ml。分装成小份用铝箔包裹装液管以免溶液见光,于-20贮存。常以 10ug/ml50ug/ml 的终浓度添加于生长培养基。

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