1、华中科技大学同济医学院 颂：学位论义人参的主要有效成分，常被用来作为人参制剂中定量的指标。到目前为止，分离并确定结构的人参单体皂甙已余种。 。其中人参皂甙。具有较广泛的药理活性，特别是对一，血管系统的作用比较显著。现已证实人参皂甙和人参皂甙均可减少缺血再灌注心肌细胞的凋亡，而人参皂甙的效果优于人参皂甙 】 。人参皂甙经临床应用和实验研究证实能够改善一，肌缺血、缩小梗死面积，对心肌缺血再灌注损伤有明显的保护作用。本实验通过大鼠急性心肌梗死，室重构模型，观察人参皂甙单体对后左室重构的影响，并从角度阐明其可能作用机制。华中科技大学唰济医学院 硕学位论文材料与方法一、材料（一）、实验动物雄性大鼠，体重
2、，由华中科技大学同济医学院动物学部提供（清洁级）。（二）、饲养注意事项、温度、湿度适度；、使动物处在合理的风速区域、房间饲养老鼠密度适中；、降低避免噪声：、光照适度：（三）、药物及试剂、人参皂甙由北京中国药品生物制品检定所提供，批号；、试剂盒均购于北京北方生物技术研究所；、戊巴比妥钠、生理盐水购于武汉制药公司。（四）、主要仪器、 一高速台式冷冻离心机，德公司：、计数仪，上海日环仪器厂；、公司的 彩色多普勒超声诊断仪，探头频率 （高频、小型动物呼吸机，武汉科学仪器厂；、光学显微镜，日本：、匀浆器，上海机械公司。华中科技大学同济医学院二、实验方法（一）、动物模型制作：、大鼠经戊巴比妥钠腹腔注射（）
3、麻醉：、背位固定，行气管插管术，连接小动物呼吸机，进行人工呼吸；、开胸结扎左冠脉动脉前降支（左冠脉主干位于主动脉圆锥与左心耳之问连线下处）；、连接心电图监测显示造成急性心肌梗死模型；、缝合胸壁，停止人工呼吸；、术后腹腔注射青霉素万 “天以预防感染；、假手术组只在相同部位穿线但不结扎左冠脉动脉前降支，余步骤同上。（二）、实验分组：将术后，时存活的大鼠模型随机分为单纯手术组和治疗组，治疗组腹腔注射 （生理盐水溶液，），每天一次；单纯手术组和假手术组腹腔注射等量生理盐水；每组均为只。（三）、超声心动图检测每组大鼠干预周后，戊巴比妥钠腹腔注射麻醉，超声心动图检测大鼠、及等指标。（四）、病理标本制备、戊
4、巴比妥钠腹腔注射麻醉大鼠：、开胸，取心脏在心底至心尖连线中点横切取约厚心肌，多聚甲醛固定；、石蜡包埋：、剩余心肌组织放于液氮中保存；、石蜡包埋组织进行切片、染色；、光镜观察心肌细胞和问质。华中科技大学同济医学院 硕士学位论文（五）、心肌组织中和 的检测、从液氮中取出心肌组织；、取左室心肌组织，蒸馏水，在浆；、离一，；、取上清液以放射免疫法测量心肌组织中的和 。（六）、统计学分析数据采用软件包处理，计量资料以均数 标准差（ ）表示，多组间比较采用单因素方差分析，两两比较采用检验，具统计学意义。华中科技大学同济医学院结果坷 学位论文一、 各组大鼠心脏超声检测指标（）、左室舒张末期内径（二）、舒张末
5、期容积（）：（三）、左室重量指数（）：华中科技大学同济医学院 顶：卜学位论文（五）、短轴缩短率（）：（六）、各组数据采用软件包处理，计量资料以均数 标准差（ ）表示，多组间比较采用单因素方差分析，两两比较采用检验，具统计学意义，结果如表和图。表各组大鼠超声心动图检测指标三组经单因素方差分析差异有显著意义，两两之间也有显著性著异）。毕中科技大学同济医学院 ：学位论文图、各组大鼠超声心动图指标的比较与假手术组相比，单纯手术组大鼠、显著增加（），、等指标显著降低（），提示急性心肌梗死后左心室腔扩大，左心收缩功能受损；而。治疗组与单纯手术组相比，大鼠的缩小（），和 下降（），明显增加（），表可以改善心
6、肌梗死后心脏结构和功能。二、心肌组织的病理观察（图）光镜下假手术组心肌纤维排列整齐，无心肌细胞坏死，细胞间隙正常，染色均匀；单纯手术组心肌在较多的视野中可见局灶性坏死，纤维化形成，问质增生，炎性细胞浸润，残存心肌细胞肥大，排列不规则，染色不均匀；，治疗组比单纯手术组病变明显减轻。华中科技大学同济医学院 硕：学位论文图光镜下左室心肌结构， 。：假手术组；：单纯手术组：治疗组。三、各组大鼠心肌组织、 水平（表）（一）、大鼠心肌组织水平：（二）、大鼠心肌组织水平华中科技大学同济医学院 硕一学位论文表各组大鼠心肌局部、水平与假手术组比较，单纯手术组大鼠心肌、 水平显著升高（）；而治疗组比单纯手术组明显
7、降低（）。三组经单因素方差分析差异有显著意义，两两之间也有显著性差异（）。四、大鼠心肌组织、 水平和心脏形态、功能指标的相关性如表和图。结果显示大鼠心肌组织、 水平和心脏形态、功能指标变化一致。表各组心脏形态、心功能指标和、水平矿一 华中科技大学同济医学院（）（屋，力 、，牡、硕。学位论文图大鼠心肌组织、 水平和心脏形态、功能指标的相关性华中科技大学司济医学院讨论颤十学位论文一、后左心室重构（一）、病理过程、梗死区膨展（ ，）是指后梗死区室壁在心室腔压力作用下不均匀变薄、扩张和膨出，导致心室腔变形，而非梗死区心肌并未参与。发生于后数小时至周，其中周为最重要阶段，周时结束，故又称早期重构。等 【
8、 】 发现后就有左心室扩大。早期的发生主要由于心肌局灶性梗死，引起室壁全层细胞数减少，心脏收缩使梗死区室壁张力增加，心肌纤维束侧向滑行导致肌束重排，进而导致梗死区扩张膨出。其细胞学基础为心肌细胞断裂、细胞间隙变宽、心肌细胞被拉长和心肌细胞之间的滑动。除此之外，梗死区结缔组织细胞分泌基质盍属蛋白酶（室腔膨出 【 】 。，），降解胶原网络，也导致了室壁变薄和、整体心室扩张（ ，）是指左室收缩、舒张末期容量增加以及左室正常椭圆形态丧失和球样变，可持续周年，故称作晚期重构。在患者血管急性闭塞后，心功能早期即受到损害，血流动力学的改变和神经内分泌因素的激活使心脏发生了一系列代偿反应，刺激尚存活的心肌收缩
9、性增强、心率加快，以维持心输出量和心功能。当刺激因素的持续存在或者梗死面积过大时，这种急性代偿不足以维持正常心功能，心脏又启动了机制，增加心肌细胞初长度，使心室舒张末期容量增加，以维持左室充盈压和每搏量。但另一方面，机体的这些代偿机制却造成了非梗死区心肌细胞伸展拉长，心腔扩张进而球形变。当上述机制仍不能继续维持患者的心功能时，发生了另一种代偿反应即心肌肥厚。心肌肥厚一方面是由于左室压力或容量负荷过重引起心肌细胞反应性肥大；另一方面是由于交感神经系统（）和反射性激活，去甲肾上腺素（）和 分泌增加，醛固酮（）和内皮素（）分泌也随之增加，使心肌细胞肥中科技大学同济医学院 颂：学位论文大并发生 “胎儿
10、化 ”【 】 （参与心脏重构的肌球蛋白重链 是胚胎型蛋白），此种心肌细胞收缩力低下、寿命短、易发生衰竭。此外，心肌梗死后循环及心肌局部的激活也同时促进胶原增生。通过原位杂交技术已证实肌成纤维细胞（）是心脏中表达型和型前胶原的主要细胞，而是的主要效应细胞， 对二：合成胶原起促进作用，因而导致了心肌梗死后胶原的沉积 【 】 。同时活性也升高，现在认为，在左室重构中的主要作用是直接降解细胞外基质（）中的胶原，引起退化，心肌从而排列紊乱，收缩功能异常。同时具有趋化作用，可使成纤维细胞进入其作用后的区域，引起胶原沉积，使基质重量增加，但质量下降。可以介导许多物质的活化，女、及 ，这些物质一方面将增加胶原
11、的合成，破坏心肌细胞；另一方面，可以促使表达增加，构成恶性循环，进一步加速心室重构的过程，最终导致了的发生。（二）、发病机制、血流动力学和神经内分泌变化在病人急性冠脉闭塞、心功能受损后，心输出量下降，神经内分泌激素反射性激活，刺激尚存活的心肌收缩性增加，心率增快，维持心输出量和心功能 】 。当射血分数继续下降时，心脏启动 机制，增加左室舒张末期容量，维持左室充盈压进而维持心输出量。在高负荷和神经内分泌两种因素影响下，存活心肌细胞产生缓慢适应性肥厚反应。这种心肌肥厚表现为新肌节增加，同时伴有心肌细胞长宽比例增加而使心肌细胞延长、心室重量增加，但由于毛细血管网不能成比例增加，从而使总供氧量及高能磷
12、酸化合物均相应减少，心肌能量代谢障碍，心功能下降，最终导致心衰。研究证明，和与心肌梗死后左室重构密切相关，心脏局部越来越受到重视 【 。和反射性激活，高浓度的儿茶酚胺尤其是可导致心肌细胞丧失，引起心肌细胞不良性肥大，还可刺激心脏成纤维细胞合成胶原增加，促进心肌间质纤维化。还可通过增加机械刺激如室壁张力和氧化应激或促进其他内分泌因子的生成和释放，间接促进心室重构。、 分泌增多可导致、的分泌增多，它们均可使心肌细胞肥大并胎儿化，同时促进成纤维细胞增生，胶原合成大于分解，尤其是型华中科技大学同济医学院胶原的增生，使型 ￥ 型胶原比值增大，心脏僵硬度增加，导致心脏纤维化，促进左室重构 。另一方面又可促
13、进 的分泌，使心脏重构陷入了神经内分泌因子的网状调控系统内。、细胞、分子水平的改变长期的临床观察发现，单纯纠正或改善血流动力学障碍并不能阻止心衰的发生和发展，进而引导人们寻找血流动力学以外的心力衰竭病理机制。进一步研究认为，心室重构是由心肌细胞和间质细胞基因表达与调控发生了一系列显著而复杂的异常变化所致瞄。从心脏代偿性肥大到心力衰竭，整个过程均伴有心肌细胞多基因表达的改变，尤其是各种原癌基因的激活引起了许多学者的关注。原癌基因活化的途径主要可归纳为两种：蛋白磷酸化：蛋白质磷酸化是细胞内信号转导的基本途径。体外灌注鼠心脏，灌注压增大，蛋白激酶和蛋白激酶活化，细胞内蛋白及环磷酸腺苷（）合成增加，上
14、调。 、蛋白激酶和蛋白激酶与表达上调有关 【 】 。儿茶酚胺和 主要也是通过、蛋白激酶和蛋白激酶的活化传导信号，促使表达 【 】 。调控核酸的转录：很多原癌基因编码核内蛋白，这些蛋白与特定区域结合，从而介导的转录。转录因子一和表达伴有细胞肥大，而用非诺贝特通过阻断一的形成和活化，可使下调，并抑制心肌肥大 。原癌基因使心肌肥大的机制：首先原癌基因诱导细胞蛋白质合成增加。可以增加细胞。营，、和蛋白质在细胞中的积累，并伴有聚合酶及细胞周期蛋白依赖激酶的表达，提示通过途径可能合成所有的引。其次，原癌基因可使与心肌肥大相关的蛋白质合成增加。许多研究证明可促进心肌细胞肥大，而原癌基因表达产物形成的转录因子
15、一可与的启动子结合，诱导转录：当一活性下降，生成就减少，这对防止心肌细胞的肥大有一定作用 【 】 。、细胞凋亡在左室重构中的作用在实验动物的心肌肥厚、心肌梗死后心衰中，左室都存在心肌细胞凋亡，在人心肌梗死后的衰竭左室也已找到心肌细胞凋亡的证据。等在结扎大华中科技人学同济医学院 硕学位论文鼠主动脉后的前天内检出凋亡的心肌细胞，推测在一，肌肥厚时，心肌细胞凋亡与细胞生长相关联，凋亡可能是一，彤重构的必要前提 】 ：等发现，在稳定的代偿性心肌肥厚向一，力衰竭发展过程中，心肌的丧失和功能的恶化部分可能由心肌细胞凋亡所致 【 “，由此可见后左室重构是一，肌肥大、间质增生和细胞凋亡共同作用的结果。一，肌凋
16、亡也受原癌基因调控，一家族包括了阻遏凋亡的成（、 ）币促进凋亡的成员（、 ）。在鼠心肌梗死后心力衰竭模型中，心室重构伴随着一，肌细胞凋亡的同时，蛋白表达明显增强，一蛋白表达减弱，与一蛋白在心肌细胞中的变化呈反相关系，共同调节心肌细胞的凋亡 【 。尽管介导心肌凋亡和肥大的原癌基因不同，但大量的研究发现它们可以被相同的诱因激活。、 均有诱导一，肌细胞凋亡的作用，提示不仅在细胞生成和功能方面起作用，而且影响一，肌细胞的生存及死亡。心力衰竭的分子机制是错综复杂的，各种原癌基因在不同时期表达，合成多种蛋白质，促进一，肌细胞的凋亡和肥大，最终造成心脏重构，功能受损。二、重构和、造成重构的机制 ，肌梗死后血
17、流动力学改变强烈刺激了循环和局部的。的效应激素是 和，其中劬 在一，肌梗死后心室重构中起了最为重要的作用。 是一个旁分泌和自分泌的八肽，局部形成的 在血流动力学、细胞生长和重构调节以及神经递质释放方面起了一定的作用。 受体亚型至少有，并。多数 的作用可能归因于受体的激活，这些活性可以被特异的受体阻滞剂如氯沙坦所阻断。受体和蛋白耦联，激活磷脂酶或抑制腺苷酸环化酶。的信号传导途径，与大约只有的同源性，对它的了解比较少，受体与磷脂酶耦联具有抑制受体的作用，它广泛分布在胎儿组织的神经系统内，病理情况（女）可一过性出现于成人机体，受体与细胞的分化和再生有关。 的主要作用是收缩血管、升高血压、调节冠状动脉
18、血流、刺激血管平滑肌细胞的增殖和迁移、刺激交感神经、提高醛固酮的生物合成和活性以及促进纤维原细胞内型和型胶原合成，诱导问质纤维化，参与动脉粥样硬化和重构过程。譬促进一，脏纤维母华中科技大学司济医学院 卿！二卜学位论文细胞增殖和细胞外基质的产生，是心肌梗死后心肌修复过程和心脏肥大的重要因素 【 】 。 还抑制了的活性，后者是降解心脏问质中胶原纤维的关键酶，抑制此酶造成了胶原沉积的进一步发展。除此之外，儿还促进交感神经兴奋和一释放，诱导心肌细胞调亡。因此，是心室重构一系列生化反应的核心。、局部的重要作用不同器官，如心脏、血管和肾脏都含有系统，心脏组织含有所有成分。有研究发现心肌梗死后心肌局部含量、
19、活性显著增高 【 】 ，但血液 含量和活性无明显改变。心脏多数 不是由循环的 得来的，而是由心脏组织自身产生的。心脏组织 水平是循环 的几倍。有观察发现，心脏而不是循环在心肌梗死后心室扩张方面起了重要作用。研究发现【，高组织亲和力的对冠心病患者的内皮功能改善作用更强，也间接说明了局部起着更为重要的作用。目前学术界的观点基本达到一致：虽然循环系统在心血管内环境稳定方面起了重要的作用，但循环与心肌重构无显著相关，局部在心肌重构方面起了核心作用。、抑铜会抑制重构既往数据提示， 在造成左心室重构的分子事件中起了核心作用。无论是在受体水平还是在合成酶水平阻断，均可改善心脏缺血区边缘的血供，使梗死面积缩小
20、，改善血流动力学参数明显改善左室舒张末期和收缩末期容积、射血分数），并减轻心肌细胞肥大、间质增生、胶原蛋白沉积，减轻梗死膨展和左心室扩张程度，减少左室肥厚及心肌梗死大鼠的病死率。三、人参皂甙对后左室重构和心肌的抑制作用人参为五加科多年草本植物，人参皂甙为人参主要成分，本实验通过构建大鼠急性心肌梗死模型，观察人参皂甙单体对后左室重构的影响，并从角度阐明其可能作用机制。心肌梗死后，病理性刺激会导致重构过程发生，即使心肌梗死范围很小，并华中科技大学同济医学院未造成即刻的心脏功能障碍，它仍然会触发心室重构过程的发生。心肌梗死后左室重构几乎是不可避免的改变。二维超声能在确切时问通过多个断面显现整个心脏，
21、已被广泛选用为估计心腔大小和心脏功能的无创方法。国内外已有报道应用高频超声检测大鼠心脏结构和功能 。本研究用高频多普勒超声测定心肌梗死后大鼠心脏结构和功能。、和是反映心脏形态的超声学指标，和是反映心脏收缩功能的超声学指标。本实验单纯手术组大鼠、及明显增大，和显著低于假手术组，说明心肌梗死后心脏形态发生改变，心功能受到损害；光镜下心肌梗死后出现局灶性坏死，纤维化形成，间质增生，残存心肌细胞肥大。而经人参皂甙干预后，大鼠的缩小，和下降，和显著升高，病理改变程度减轻，这说明该药具有逆转心肌梗死后左室重构的作用。参与心肌梗死后左室重构的因素很多，特别是心脏的激活越来越受到重视。在自分泌、旁分泌系统中，
22、血管紧张素原经。肾素水解为醒，经血管紧张素转换酶水解为 。肾素是第一个级联反应的关键酶，则是中的一个关键产物。（尤其是 ）是病理状态下影响心肌重构重要因子的观点在临床上已得到证实，抑铝 生成或（和）活性对心脏重构具有很好的治疗作用。本实验单纯手术组大鼠心肌组织、 水平均高于其余两组，说明心肌梗死后心脏激活，产生大量的、 ，这在急性期可能对血流动力学的稳定和心脏功能的改善起到代偿作用。但当容量或压力高负荷和神经内分泌因素刺激持续存在时，可通过以下机制促进心脏重构：（使心肌细胞原癌基因、及激活，导致许多生长因子的表达，使心肌蛋白合成增加，心肌肥大；在心肌肥大的同时，促进细胞表型的转变，即从收缩型向
23、合成型转变，使肌内最大缩短速度减小，最后导致心肌收缩功能下降。 通过与一，脏组织中的成纤维细胞受体结合，促进成纤维细胞合成型与型胶原，并抑制降解胶原的基质金属蛋白酶一和的合成，于是间质内胶原组织沉积、纤维化，使心脏顺应性降低。 激活心肌细胞内钙离子依赖的酶活性，诱导正常心肌细胞凋亡。因此，降氐含量，可减轻或逆转心脏重构。华中科技大学同济医学院 硕：二学位论文人参皂甙能够降低 肾素活性，阻断的第一个级联反应，从而降低含量，减轻或逆转对一，脏的重构作用。因此干预心肌组织中，降低心肌、水平可能是人参皂甙防治心肌梗死后左室重构的作用机制之。华中科技大学同济医学院总结顾一学位论文心肌梗死后，病理性刺激会
24、导致重构过程发生，心肌梗死后左室重构几乎是不可避免的改变。参与心肌梗死后左室重构的因素很多，特别是心脏的起到了重要作用；抑（尤其是 ）生成或（和）活性对心脏重构的防治作用在涵床上已得到证实。人参皂甙能够降低肾素活性，阻断的第一个级联反应，从而降低含量，减轻或逆转了心肌梗死后心脏重构。因此干预心肌组织中，降低心肌、 水平可能是人参皂甙防治心肌梗死后左室重构的作用机制之一。华中科技大学硎济医学院 坝：学位论文参考文献 ，： ， ， ， ： ，：陈灏珠译心脏病学 】 第版北京：人民卫生出版社， 杨跃进应当重视急性心肌梗死后左室重塑的防治 【 】 中国循环杂志， （）： 【 】 ， ， ， ，（）：
25、【 】 ， ， ， ，（）： 【 】 ， ， ， ，（）： （），【 】 ， ， ， ， （）： ，【 】 ， ， ， 【 ，（）：【 ， ， ， ，（）： 【 】 ， ， ， （ 曲 【 】 ，（）： 毕中科技火学同济医学院 顺：学位论文【 ， ， ，（）： 【 】 ， ， ， 一 【 】 ，（）：【 】 刘正湘，刘晓春人参皂甙与。对大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响 】 中国组织化学与细胞化学杂志。，（）：【 】 ， ， ， ，（）： -25【 】 ， ， ， ，（）： 【 】 ， ， ， ： ？ ，（）： 苏静怡，李澈，苏哲坦心脏从基础到临床 北京：北京医科大学中国协和医科大学联合出版社，
26、 【 】 ， ： ，（）： 【 】 ， ， ， ，（， ）： 【 ，（）：【 】 ， ， ， ，（）：华中科技大学同济医学院 顶。学位论文【 】 ， ， ， ，： 】 ，：【 侯应龙，藏益民心力衰竭的分子生物学心功能杂志，（）：【 】 ， ， ， ，）： 【 】 ，（ ）：【 】 ， ， ， ，（）：【 】 ， ， ，（）： 【 】 ，：【 】 ， ，（）： 【 】 ， ， 【 】 ，（）： 马中富，何建桂，叶任高，等实验性急性心肌梗塞心肌细胞凋亡与和蛋白表达的相关性研究国急救医学，（）： ， ， ， 一 ，（）：【 】 ， ， ， ，（）：【 ， ，（）： 华中科技大学 司济医学院 砂二学位
27、论文【 ， ， ， ， 【 】 ，（）：【 ， ， ， ，（）： 【 】 ， ， ， ， ， ，（）： （ ） 【 】 ， ， ，。 ，（）： 华中科技大学同济医学院综述顾：学位论文 和 对心脏重构的网状调控摘要：肾素一血管紧张素系统（）年转化生长因子（ ）对心脏重构和心衰的发生发展起着重要作用。最近研究表明，心脏重构 一个决定着心脏病临床预后的关键病理生理过程，受到网状信号系统的调控；在心脏重构过程中，血管紧张素（）和 ，并非各自独立作用，而是作为该网状调控系统的组成部分相互作用而促进重构。越来越多的研究表明， 对心肌梗死后心脏结构的影响，至少有一部分是通过间接途径实现的。 通过激活心肌细胞和成纤维细胞上血管紧张素型受体（）而上调 表达，而一 这种细胞因子可诱导心肌细胞肥大，促进心脏成纤维细胞增生及其向肌成纤维细胞表型转化，增加细胞外基质蛋白如胶原、纤连蛋白和蛋白多糖的沉积，并可诱导心肌细胞凋亡，它以自分泌或旁分泌的形式调节介导的心室壁重构。心脏 网状调控系统的下游调节机制包括蛋白和 激活的激酶（）。本文就 和一 在心脏重构病理生理过程中联系的新认识方面作一综述。关键词：左室重构；一 ；） 是心脏在血流动力学改变时发生适应性反应的关键调节因子，它们与心肌肥大和心衰的发病机理密切相关 。在高血压
