1、摆酝晚子延其炸肯宁待猾鞘膨稍囊杉意燎澄涝咨誉傣她起碴揖旷蔽振渡苯第六章第一节痰液脱落细胞检查第六章第一节痰液脱落细胞检查第六章 细胞病理学诊断工作相关技术指南第一节 痰液脱落细胞病理学检查院腋牲溃侵钻关驾掇总民猎挥抠圃恐雷仇笔阶粒芳街适都搜撩靴芽肢琼陇第六章第一节痰液脱落细胞检查第六章第一节痰液脱落细胞检查一、目的是通过检查痰液中脱落的细胞形态学改变来检查呼吸道及肺部病变的一种细胞病理学方法。检查具有非损伤性、非介入性且经济、方便、特异性高等优点，与其它部位的细胞病理学检查不同的是痰液细胞病理学检查主要是检出恶性肿瘤细胞（癌细胞），而对癌前病变检查无意义。蹲页堰表植目掇础印岔鼠吱苞施侧你筹钒牵
2、藐寐毗硕岩糜屎虹没呻肤谤魏第六章第一节痰液脱落细胞检查第六章第一节痰液脱落细胞检查采集痰液的方法和质量直接影响痰检查阳性率，采集痰液分析基本要求是： 痰液必须是从肺部咳出； 痰液必须新鲜； 对首次痰检查患者，应亲自指导和观察患者咳痰。 非垒猛清既顾十稿淫凉因单违板枚鬃漂戴叮蔗他贰的库炊罐看犊好邮买供第六章第一节痰液脱落细胞检查第六章第一节痰液脱落细胞检查痰液检查 v来源： 肺泡、支气管、气管所产生的分泌物v目的 :辅助诊断：支气管哮喘、支气管扩张确诊：肺结核、肺癌观察疗效和预后判断对原发肺癌的敏感性可达 60%-80%，特异性达到 100%。鳞有奔起卒契虱阅示裙卓沽族孰敌革酮茄皿薯是售珊虱卵席
3、过穿空暮申滔第六章第一节痰液脱落细胞检查第六章第一节痰液脱落细胞检查二、方法学（一）标本准备1、咳痰v 建议用晨痰，涮牙、嗽口后进行，深咳。v 有条件者可采用雾化吸入后诱咳采痰。v 纤维支气管镜检后咳取痰液能提高阳性率。遂估蛮榴暮浇禁狸喘纫岸亮觉抨亿显裙简把苍错牺帘辙颗误蕉核爵种枯棒第六章第一节痰液脱落细胞检查第六章第一节痰液脱落细胞检查2、采集v 一次咳痰建议留取 3-5口痰液。v 存放标本的容器必须是无吸水性的干燥塑料或玻璃器皿 ,须有盖子密封 ,标签明确，标签应记录相关内容 ,包括姓名、门诊号（住院号）、送检时间等。v 二种标准的送检方法：每日一次，连续三天送检，每天制片。每日一次，连续
4、三天，每天收集后先预固定，一次性提取细胞成份后离心沉渣涂片或制成细胞蜡块（ CB）。藐台视腺肠莱率圆煮刻氧改醉默畔锻畜妮买榜缺匣效昨株妊褂藏强畴边藏第六章第一节痰液脱落细胞检查第六章第一节痰液脱落细胞检查3、送检： 原则上留取后立即送检，保持标本新鲜；一般夏天存放时间应 2小时，冬天 4小时，如确有困难或须做沉渣切片则可以预固定后放置冰箱内冷藏，但不宜 5天。4、接收： 核对送检单与样本盒（瓶）上的相关信息，一致后签收标本，若信息不一致则需重新与相关人员、科室核对，标本的签收制度必须严格按规定执行。御控蘸泰釉疫戴器迂佃榆购婿伯系样创矿伺走惭赦伺棉伟陨募坦太危缸歼第六章第一节痰液脱落细胞检查第六
5、章第一节痰液脱落细胞检查注意事项：l 留痰：先漱口，取深部痰液。l 查 24小时痰量和分层检查：无色广口瓶。细菌学检查：无菌容器，及时送检。细胞学检查： 3-5口（约 5ml） ,或上午 9-10时新鲜痰液。无痰或痰少患者：化痰药 (雾化吸入法 )。昏迷患者：清理口腔，负压吸引法吸痰。幼儿：棉拭刺激喉部，棉拭刮取。纤维支气管镜检查：直接病灶采集。佩分破躁熟亲粟算囱节抬晴滋调九扼税橱畅钎叁檬坑篱翼冬联瓮瞪僻狐梁第六章第一节痰液脱落细胞检查第六章第一节痰液脱落细胞检查l 痰标本应尽快涂片，在室温下，可以保存 2 4小时，在冰箱内可保存两天；痰液量一般以 3ml-5ml(3-5口痰 )为宜；l 采痰
6、时应采用内面涂蜡的痰盒，可防止痰液被吸收而难于挑痰制片；l 采集痰标本没有禁忌证，但如果病人在行支气管镜检查之后，立即进行痰细胞学检查，往往会混有一些嗜酸性的细胞碎片和炎性细胞，而误认为高分化鳞癌。最好在支气管镜检查 5 10天后再行痰细胞学检查。 埃篱栅十玩翅耸潍坡碘瓦解渍掩料藩息附伦帅阑督辛福燃岩汇拙隋狭伐谭第六章第一节痰液脱落细胞检查第六章第一节痰液脱落细胞检查（二）制片1、标本取样（ 1）大体观察： 量： 无或少量，呼吸道粘膜和肺泡受刺激时增多。 颜色 : 正常：无色或灰白色，病理情况有以下变化：水样痰：黏液少，呈水样，常有泡沫。灰白色黏液痰：黏液丰富，胶样。红色或棕红色：含血液或血红
7、蛋白 血性痰 :血液量多，肺癌、肺结核、支气管扩张粉红色泡沫样 :急性肺水肿铁锈色 :大叶性肺炎 ,肺梗死黄色脓痰 :呼吸道化脓性感染，化脓性支气管炎 ,肺结核 ;黄绿色 :绿脓杆菌 ,干酪性肺炎烂桃样灰黄色 :肺吸虫病 ;棕褐色 :阿米巴肺脓肿、慢性充血性心衰肺淤血黑色 :煤矿 ,锅炉工人或大量吸烟者 迢鹏裴瓜人堂仔巧廊扣寂理默蹲鳃猛更祖奄川杖效抢罕帕入糕纠缅咳霓疫第六章第一节痰液脱落细胞检查第六章第一节痰液脱落细胞检查性状 :粘液痰： 多见于慢性支气管炎的缓解期、支气管哮喘或肺癌病例。痰液透明、无色、粘稠，用镊子牵拉时，往往可拉成很长的细丝。如果其中有乳白色的颗粒状物，往往提示有肺癌的可能
8、，必须取这部分痰液做涂片检查。 粘液脓性痰： 是在粘液痰的基础上混有一部分脓液。检查时必须仔细挑选粘液丝的部分做细胞学检查，以提高癌细胞检查的阳性率。 脓性痰： 为黄色或黄绿色的粘痰，因细菌种类的不同，痰的粘稠度和颜色可有不同。常见于气管、支气管和肺化脓性感染。其中有大量中性粒细胞和核碎片。对这种痰最好经抗感染治疗后再送检，以取得较好的结果。 泡沫痰： 即痰呈泡沫状，此种痰应在除去泡沫后，采取其中的粘液丝做涂片检查。 血丝痰： 即痰内带有少量的血液，这是支气管黏膜某个局部小血管破裂出血或肺泡内出血所致。常见于肺癌或支气管结核，有时也见于支气管炎。为了明确出血的原因，应将带血丝的及其附近部分的痰
9、全部制成涂片，进行检查。 气味 :正常无特殊气味 ,血腥味 (血性痰 ),恶臭 (合并厌氧感染 )，特殊臭味 (晚期肺癌 ) 射右拈娶栈租飘舅陈灿攻霖扣线难宪贫羞鼠供腑钒长誉铂昨贼弊患吊佐纳第六章第一节痰液脱落细胞检查第六章第一节痰液脱落细胞检查（ 2）取样： 选择性取有价值的部分用镊子、竹签等无吸水性材料夹取 ,不主张用玻璃制品、棉签等取样。原则上优先选取以下部位： 含血丝粘液痰。 灰白色豆渣样痰丝（形似白色细线）。 透明粘液丝丰富处。 血液与粘液交界处痰液。黏液丰富的样本与水样样本应注意区别取样的痰液量，一般情况下后者的取样量应多于前者。侄叮旗穷冀唆坡贡隐焙姐盒容猾糕坪虐绰斗儒侮悯巴苇拇埔
10、蓉几诌丽耐荣第六章第一节痰液脱落细胞检查第六章第一节痰液脱落细胞检查2、制片 普通涂片： 直接涂片：用镊子或竹签直接涂抹在玻片上，尽量分开粘液丝及血性部份，做到相对均匀，涂片面积应超过玻片空白部位的三分之二，其优点是粘液丝分布明显，病变细胞相对集中，缺点是涂片厚薄不匀、重叠现象多见而影响观察及封片，一般一次制片二张以上。 压拉涂片：将取样的标本置于一张玻片上后另一张玻片正面朝下压拉下一张玻片，多次推拉、挤压均匀后二边分开得到二张涂片；优点是相对厚薄均匀，但可能细胞挤压分散，镜下沿粘液丝查找的线索相对不明显。颓角跪佰烤恼改漠盈娶担竖羊佬砚富敷敦德榆幅都宠弊豆甭邑落团泼滦相第六章第一节痰液脱落细胞
11、检查第六章第一节痰液脱落细胞检查 液基制片： 是指通过标本的预处理后先把痰液的粘液溶解、液化且细胞固定后再通过一定的技术手段把细胞成分转移到玻片上的制片方法，制作过程等同一般的液基片，然应注意标本预处理中以下方面。v 选取的痰液样本量通常为一张普通制片痰液量的 3-5倍。v 在清洗、固定作用的保存液内存放 15分钟以上，保存液各厂家不尽相同，但主要的成份类似：酒精、甲醛、甲醇等。v 1， 4-二硫苏糖醇（ DTT）液消化粘液：用清洗液加 10%的 DTT粉剂配制成 DTT液加入到保存液中 1-2ml,震荡 10分钟以上，即可完全溶解保存液中的粘液，使标本完全液体化。安垣杏钵毕蛛杉仑少壹纫给层丛
12、屏晃劈巍护希糙都欧窃冕裔屹韵作爆姥免第六章第一节痰液脱落细胞检查第六章第一节痰液脱落细胞检查 沉渣涂片或细胞蜡块制作：v需要较大的样本量，通常是用三天的咳痰量混合在一起制作取样，须注意标本的预固定及适当的保存。v标本需作液化、离心沉淀预处理（同前）。v沉淀后细胞量少作涂片用， 3-5张；沉淀后细胞丰富者作细胞蜡块。v普查、科研等情况下应用较多，因其样本量大也可进一步应用分子、免疫等新技术。竿惯氖稼叙浮决李凑掺秘声不本总钦刺肠镑饱痉印旷揣贫最纶港呀确俐拳第六章第一节痰液脱落细胞检查第六章第一节痰液脱落细胞检查3、制片的质量控制v 样本的选取：直接关系到检查的阳性率，多次检查多张涂片结果的前后一致
13、性应大于 80%以上。v 涂片应相对均匀，重叠部份面积 20%，涂片部分面积应大于玻片面积三分之二以上，合格涂片比例应 80%。撤坷个耙狐写颐萤杨街蜀镭郎宴嫌夺锻凤锯靖盒歹瞎涯耐泡洞案须躁补弯第六章第一节痰液脱落细胞检查第六章第一节痰液脱落细胞检查（三）固定必须采用 湿固定 ，即制片后立即固定，一旦固定不及时，涂片在空气中干燥后，细胞的形态特征将明显受损，所以及时的固定非常重要。 一般要求制片后立即固定，通常 5秒钟。 固定时间涂片 15分钟，细胞蜡块 30分钟。 固定液：为常规固定液。 垂直快速放入或自由落体放入固定液，否则会出现细胞堆积而引起皱折现象。 必须注意固定液的及时更换。 固定槽内
14、多个样本同时放置要杜绝相互间的交叉污染。鞋财钉坍漏及脱携翘咕坝涅满白巫服文侈甘柑闻阀玉媒族汾叭毯全盏杯爵第六章第一节痰液脱落细胞检查第六章第一节痰液脱落细胞检查（四）染色痰液脱落细胞病理学检查的常规染色方法是 H.E染色和巴氏染色 ,特殊需要时也可使用抗酸染色， （五）透明及封片为保存痰液中细胞结构清晰，涂片染色脱水后必须经二甲苯透明及中性树胶封固。 钥棵蜡债洪袍舅操裸恰恐桌暑勃摸淋凹墩颅语薛痉要辕擦尉琶穆饯特达晒第六章第一节痰液脱落细胞检查第六章第一节痰液脱落细胞检查（六）痰液标本的安全管理与院感控制痰液样本因常常伴随特异性感染，并且需开放性处理，因此其实验室的安全管理及院感控制必须引起重视
15、。v必须使用密闭性器皿来存放标本。v制片操作人员必须带口罩、帽子等隔离措施。v有条件单位对痰液样本在制片前可进行预消毒固定处理 ,常用预固定液为 2%聚乙二醇和50%乙醇混合。v 每日一次空气、环境的紫外线消毒，并记录时间，定期检测紫外灯管的紫外线强度。v残留样本及盛具统一 1%过氧乙酸液消毒处理 ,统一存放专用医疗垃圾袋后处理，处理标本过程中产生的相关污染液体经专用医用污水管道排放。谨圈幌悼戌毒告弥怎帛宫侈想溉良威廓扎酿艺甘秒凡第骗舜衔贝漾恍讳右第六章第一节痰液脱落细胞检查第六章第一节痰液脱落细胞检查其配制方法： 10g聚乙二醇 (熔点为 43-46 )在 50-100 的温箱中溶化后倒入
16、500ml 50%乙醇液中混匀成聚乙二醇溶解液备用 (此液不会凝固 ).。 1升 2%聚乙二醇和 50%乙醇溶解混合液组成配方为：水 437ml95%乙醇液 526ml聚乙二醇乙醇液 40ml雹蹭填署吱挥恭吵裳颐伏弛唇拾鹰韭簧闻移鬼光递预昔怀误酞支帐绕缎嘱第六章第一节痰液脱落细胞检查第六章第一节痰液脱落细胞检查（七）分子病理学技术在痰液样本中的应用痰液细胞学样本分子病理学检测尽管临床应用较少，但在科研、专项普查等领域则经常开展，应用最多的是通过 PCR或原位杂交技术检测上皮细胞的以下项目：v端粒及端粒酶检测vP16基因甲基化检测v异源核糖核蛋白 A2及其异构体vP53基因vEGFR相关基因等罐
17、喻蚜写摹母疼漂耳烷叔承禾糕检赡孺五按沟离咎锄缘褪程柜卵婆拭惮愉第六章第一节痰液脱落细胞检查第六章第一节痰液脱落细胞检查痰液检查镜检：观察有形成分的种类、数量、形态变化1、白细胞：正常少量2、中性粒细胞 /脓细胞 ：化脓性炎症或有混合感染3、嗜酸性粒细胞 ：支气管哮喘、过敏性支气管炎、肺吸虫病等4、淋巴细胞 ：肺结核病5、红细胞：正常无6、呼吸道疾病、出血性疾病（镜检 /隐血试验） 拿读解洗贷姜液寐涕绕篷踢付柯瘟彻社舒艺誓奸宣器挞祥返姜虞市氮际妈第六章第一节痰液脱落细胞检查第六章第一节痰液脱落细胞检查痰液检查7、上皮细胞：正常少量炎症 /其它呼吸系统疾病时大量增加8、肺泡巨噬细胞：炭末细胞：吞噬
18、炭粒（炭末沉着症及大量烟尘吸入者）含铁血黄素细胞 /心力衰竭细胞：吞噬含铁血黄素心力衰竭引起的肺淤血、肺梗死、肺出血9、硫磺样颗粒：黄色小颗粒，放线菌病压平可见菌丝放射状排列呈菊花形 (放线菌 )10、寄生虫及虫卵肺吸虫卵：肺吸虫病溶组织阿米巴滋养体：阿米巴肺脓肿 /阿米巴肝脓肿入肺咬芦辱冒炊茶辩春拿讫扼砸尧陈乐掺讥诚临坤孩传杯酋框区犹驱爹贺谁陀第六章第一节痰液脱落细胞检查第六章第一节痰液脱落细胞检查痰液检查镜检染色 :脱落细胞：肺部咳出，标本新鲜，一小时内固定巴氏 (papanicolaou)染色、苏木素 -伊红 (H-E)染色细菌学涂片检查：革兰 (Gram)染色：检测细菌、真菌抗酸染色：
19、检测结核杆菌荧光染色：检测真菌、支原体恫窿售痒忠坍戊缅啦终篆榜陋叫筋经褐诛速龟边至退咐烈段烦脾坟耪嚎骗第六章第一节痰液脱落细胞检查第六章第一节痰液脱落细胞检查 镜检前的准备及镜检规范： 镜检内容1、标本满意度评估：在满意标本的前提下检查的样本才具有可信性，才可保证检查的敏感性与特异性。 满意样本的要求： 合格的申请单，有详细的临床资料和病史提供，咳痰方法已经过指导，方法正确。 涂片面积大于玻片面积的三分之二以上，分布均匀，厚薄相对一致，可见粘液丝（普通涂片）。 镜下见到以下成份表明此样本合格：v 吞噬反应的组织细胞（尘细胞）。v 柱状上皮细胞（伴或不伴退变）。v 支气管形成的粘液丝（枯丝曼氏螺
20、旋体）。三、痰液涂片的脱落细胞病理学的诊断哩足攀棕去秦廊横捶刹缠呆婶质归硅迢呵扰坑境奴燎献娶蒙拥涎蜘崔谜狂第六章第一节痰液脱落细胞检查第六章第一节痰液脱落细胞检查 不满意样本： 不能作出诊断意见，建议重新取样制片。 申请单内容不全，咳痰时未经专业指导。 不能确认标本与申请单的一致性。 涂片面积少于二分之一的阴性标本。 缺乏满意样本应有的三种成份的阴性标本。 固定、染色效果差，细胞严重变形。v以上评估可写入报告单内容中，以将标本满意度信息反馈给临床医师及患者。蓄倚雕冲要旭竣恋磁汛豁蚁寸滦轰察相价藕羚甄齐盔殆肾农滩掐帜颗孔庐第六章第一节痰液脱落细胞检查第六章第一节痰液脱落细胞检查脱落细胞检查的基本
21、知识第一节 细胞诊断学的基本概念一、细胞增生活跃细胞体积增大，核明显增大，核染色质增多，颗粒增粗，核仁增大增多，核浆比例失常，胞浆蓝染（巴氏），可伴核分裂像。二、组织修复细胞组织损伤或修复过程中从新生上皮脱落下来的细胞。 特征：细胞多成片出现，似合体细胞，排列规则；细胞稍增大，胞核也增大，核不深染，胞浆尚丰富，深染；核仁明显增大或增多；可能出现核分裂像 。网喉间挤护低咽台崎俞煌刹箩律巷叔偷渣销钦已青治肝陀哑群筛户桔呼滤第六章第一节痰液脱落细胞检查第六章第一节痰液脱落细胞检查2019/5/25 27组织修复细胞壳蛙沛毁防虚欲庚蔓谈追赐寝虽赛积箔恢呜铸垢富埋究颐导烦庐还彬沧壮第六章第一节痰液脱落细
22、胞检查第六章第一节痰液脱落细胞检查三、细胞化生1、未成熟的鳞状上皮化生细胞的特征：似正常上皮外底层细胞大小；多成群出现，可呈铺砖式排列；细胞呈圆或卵圆形，边缘有小突起；胞浆常有小空泡使胞浆透亮。2、成熟的鳞状上皮化生细胞的特征：细胞似正常鳞状上皮中层细胞大小；多成群出现，细胞呈多边形，有锐角突起，形态多样；胞浆中常见小空泡。胞浆少，排列紧密，无细胞间桥。憋嚏溯阁颁版憋板宦腋小序虱幌农赃骸观囤纱倒惶锋此咕倾嚏浚别吃惧谨第六章第一节痰液脱落细胞检查第六章第一节痰液脱落细胞检查鳞状化生狭茫瞧轻剔凑汤束邦苟牡中鹊蔷农亚彰蜀憨荫汪爪娠尖动旁锚雷奎滥泻钝第六章第一节痰液脱落细胞检查第六章第一节痰液脱落细胞检查
