1、牛肉膏蛋白胨培养基(培养细菌用)牛肉膏 3g蛋白胨 5g氯化钠 10g琼脂 1520gpH 7.07.2水 1000mL121灭菌 20min。2、高氏(Gause)1 号培养基(培养放线菌用) 可溶性淀粉 20g 硝酸钾 1g氯化钠 0.5g磷酸氢二钾 0.5g硫酸镁 0.5g硫酸亚铁 0.01g琼脂 20g水 1000mLpH 7.27.4配制时,先用少量冷水将淀粉调成糊状,倒入煮沸的水中,在火上加热,边搅拌边加入其他成分,溶化后,补足水分至 1000mL。121灭菌 20min。3、查氏(Czapek)培养基(培养霉菌用) 硝酸钠 2g磷酸氢二钾 1g氯化钾 0.5g硫酸镁 0.5g硫酸
2、亚铁 0.01g蔗糖 30g琼脂 1520g水 1000mLpH 自然121灭菌 20min。 4、马丁氏(Martin)琼脂培养基(分离真菌用) 葡萄糖 10g蛋白胨 5g磷酸二氢钾 1g七水合硫酸镁 0.5g1/3000孟加拉红(rose bengal,玫瑰红水溶液)100mL 琼脂 1520gpH 自然蒸馏水 800mL112灭菌 30min。 临用前加入 0.03%链霉素稀释液 100mL,使每毫升培养基中含链霉素 30g。5、马铃薯培养基(简称 PDA)(培养真菌用)马铃薯 200g蔗糖(或葡萄糖) 20g琼脂 1520gpH 自然培养基的配制:马铃薯去皮,切成块煮沸 30min,然
3、后用纱布过滤,再加糖及琼脂,熔化后补足水至 1000mL。121灭菌 30min。6、麦芽汁琼脂培养基培养基的配制: (1)、取大麦或小麦若干,用水洗净,浸水 612小时,至 15阴暗处发芽,上面盖纱布一块,每日早、中、晚淋水一次,麦根伸长至麦粒的两倍时,即停止发芽,摊开晒干或烘干,贮存备用。 (2)、将干麦芽磨碎,一份麦芽加四份水,在 65水浴中糖化 34小时,糖化程度可用碘滴定之。加水约 20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。(3)、将糖化液用 46层纱布过滤,滤液如混浊不清,可用鸡蛋白澄清,方法是将一个鸡蛋白加水约 20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中
4、搅拌煮沸后再过滤。 (4)、将滤液稀释到 56波美度,pH 约 6.4,加入 2%琼脂即成。121灭菌 30min。 7、无氮培养基(自生固氮菌、钾细菌)甘露醇(或葡萄糖) 10g磷酸二氢钾 0.2g七水合硫酸镁 0.2g氯化钠 0.2g二水合硫酸钙 0.2g碳酸钙 5g蒸馏水 1000mLpH 7.07.2113灭菌 30min。8、半固体肉膏蛋白胨培养基 肉膏蛋白胨液体培养基 100mL琼脂 0.350.4gpH 7.6121灭菌 20min。9、合成培养基 偏磷酸铵 1g氯化钾 0.2g七水合硫酸镁 0.2g豆芽汁 10mL琼脂 20g蒸馏水 1000mLpH 7.0加 12 mL0.0
5、4%的溴钾酚紫(pH5.26.8,颜色由黄变紫,作指示剂)。121灭菌20min。10、豆芽汁蔗糖(或葡萄糖)培养基黄豆芽 100g蔗糖(或葡萄糖) 50g水 1000mLpH 自然培养基的配制:称新鲜豆芽 100g,放入烧杯中,加入水 1000mL,煮沸约 30min,用纱布过滤。用水补足原量,再加入蔗糖(或葡萄糖)50g,煮沸熔化。121灭菌 20min 。11、油脂培养基 蛋白胨 10g牛肉膏 5g氯化钠 5g香油或花生油 10g1.6%中性红水溶液 1mL琼脂 1520g蒸馏水 1000mLpH 7.2121灭菌 20min 注:(1)、不能使用变质油。 (2)、油和琼脂及水先加热。
6、(3)、调好 pH值后,再加入中性红。 (4)、分装时,需不断搅拌,使油均匀分布于培养基中。 12、淀粉培养基 蛋白胨 10g牛肉膏 5g氯化钠 5g可溶性淀粉 2g蒸馏水 1000mL琼脂 1520g121灭菌 20min 13、明胶培养基 牛肉膏蛋白胨液 100mL明胶 1218gpH 7.6在水浴锅中将上述成分溶化,不断搅拌。溶化后调 pH7.27.4。 121灭菌 30min。14、蛋白胨水培养基蛋白胨 10g氯化钠 5g蒸馏水 1000mLpH 7.6121灭菌 20min。 15、糖发酵培养基 蛋白胨水培养基 1000mL1.6%溴钾酚紫乙醇溶液 12mLpH 7.6另配制 20%
7、糖溶液(葡萄糖、乳糖、蔗糖等)各 10mL。 培养基的配制: (1)、将上述含指示剂的蛋白胨水培养基(pH7.6)分装于试管中,在每管内放一倒置的小玻璃管(Durham tube),使之充满培养液。 (2)、将已分装好的蛋白胨水和 20%的各种糖溶液分别灭菌,蛋白胨水 121灭菌20min;糖溶液 112灭菌 30min。 (3)、灭菌后,每管以无菌操作分别加入 20%无菌糖溶液 0.5 mL(按每 10mL培养基中加入 20%的糖液 0.5mL,则成 1%的浓度)。配制用的试管必须洗干净,避免结果混乱。16、葡萄糖蛋白胨水培养基 蛋白胨 5g葡糖糖 5g磷酸氢二钾 2g蒸馏水 1000mL将
8、上述各成分溶于 1000mL水中,调 pH7.07.2,过滤。分装试管,每管10mL,112灭菌 30min。17、麦氏(Meclary)琼脂(酵母菌) 葡萄糖 1g氯化钾 1.8g酵母浸膏 2.5g醋酸钠 8.2g琼脂 1520g蒸馏水 1000mL113灭菌 20min。 18、柠檬酸盐培养基 磷酸二氢铵 1g磷酸氢二钾 1g氯化钠 5g硫酸镁 0.2g柠檬酸钠 2g琼脂 1520g蒸馏水 1000 mL1%溴麝香草酚蓝乙醇液 10 mL培养基的配制:将上述各成分加热溶解后,调 pH6.8,然后加入指示剂,摇匀,用脱脂棉过滤。制成后为黄绿色,分装试管,121灭菌 20min后制成斜面,注意
9、配制时控制好 pH,不要过碱,以黄绿色为准。19、醋酸铅培养基 pH7.4的牛肉膏蛋白胨琼脂 100 mL硫代硫酸钠 0.25g10%醋酸铅水溶液 1 mL培养基的配制:将牛肉膏蛋白胨琼脂 100 mL加热溶解,待冷却至 60时加入硫代硫酸钠 0.25g,调至 pH7.2,分装于三角瓶中,115灭菌 15min。取出后待冷却至 5560,加入 10%醋酸铅水溶液(无菌的)1mL,混匀后倒入灭菌试管或平板中。20、血琼脂培养基 pH7.6的牛肉膏蛋白胨琼脂 100 mL脱纤维羊血(或兔血) 10 mL培养基的配制:将牛肉膏蛋白胨琼脂加热熔化,待冷却至 50时,加入无菌脱纤维羊血(或兔血)摇匀后倒
10、平板或制成斜面。37过夜检查无菌生长即可使用。21、玉米粉蔗糖培养基 玉米粉 60g磷酸二氢钾 3g维生素 B1 100mg蔗糖 10g七水合硫酸镁 1.5g水 1000 mL121灭菌 30min,维生素 B1单独灭菌 15min后另加。22、酵母膏麦芽汁琼脂 麦芽粉 3g酵母浸膏 0.1g水 1000 mL121灭菌 30min。24、棉籽壳培养基 培养基的配制:棉籽壳 50%,石灰粉 1%,过磷酸钙 1%,水 65%70%,按比例称好料,充分搅拌均匀后装瓶,较薄地平摊盘上。25、复红亚硫酸钠培养基(远藤氏培养基)蛋白胨 10g乳糖 10g磷酸氢二钾 3.5g琼脂 2030g蒸馏水 100
11、0 mL5%碱性复红乙醇溶液 20 mL培养基的配制:先将琼脂加入 900 mL蒸馏水中,加热溶解,再加入磷酸氢二钾及蛋白胨,使溶解,补足蒸馏水至 1000 mL,调 pH至 7.27.4。加入乳糖,混匀溶解后,115灭菌 20min。称取亚硫酸钠置一无菌空试管中,加入无菌水少许使溶解,再在水浴中煮沸 10min后。立刻滴加于 20 mL 5%碱性复红乙醇溶液中,直至深红色褪成淡粉红色为止。将此亚硫酸钠与碱性复红的混合液全部加至上述已灭菌的并仍保持熔化状态的培养基中,充分混匀,倒平板,放冰箱中备用,贮存时间不宜超过 2周。26、伊红美蓝培养基(EMB 培养基) 蛋白胨水培养基 100 mL20
12、%乳糖溶液 2 mL2%伊红水溶液 2 mL0.5%美蓝水溶液 1 mL培养基的配制:将已灭菌的蛋白胨水培养基(pH7.6)加热熔化,冷却至 60左右时,再把已灭菌的乳糖溶液,伊红水溶液及美蓝水溶液按上述量以无菌操作加入。摇匀后,立即倒平板。乳糖在高温灭菌易被破坏必须严格控制灭菌温度,115灭菌 20min。27、乳糖蛋白胨培养液(“水的细菌学检查”用) 蛋白胨 10g牛肉膏 3g乳糖 5g氯化钠 5g1.6%溴甲酚紫乙醇溶液 1 mL蒸馏水 1000 mL培养基的配制:将蛋白胨、牛肉膏、乳糖及氯化钠加热溶解于 1000 mL蒸馏水中,调 pH至 7.27.4。加入 1.6%溴甲酚紫乙醇溶液
13、1 mL,充分混匀,分装于有小倒管的试管中。115灭菌 20min。28、石蕊牛奶培养基 牛奶粉 100g石蕊 0.075g水 1000 mLpH 6.8121灭菌 15min。29、LB(Luria-Bertani)培养基 蛋白胨 10g酵母膏 5g氯化钠 10g蒸馏水 1000 mLpH 7.0121灭菌 20min。30、基本培养基 磷酸氢二钾 10.5g磷酸二氢钾 4.5硫酸铵 1g二水合柠檬酸钠 0.5g蒸馏水 1000 mL121灭菌 20min。 需要时灭菌后加入:糖(20%) 10 mL维生素 B1(硫胺素)(1%) 0.5 mL七水合硫酸镁(20%) 1 mL链霉素(50mg
14、/ mL)4 mL,终浓度 200g/ mL 氨基酸(10mg/ mL)4 mL,终浓度 40g/ mL pH 自然(7.0)31、庖肉培养基 培养基的配制: (1)、取已去肌膜、脂肪之牛肉 500g,切成小方块,置 1000 mL蒸馏水中,以弱火煮 1小时,用纱布过滤,挤干肉汁,将肉汁保留备用。将肉渣用绞肉机绞碎,或用刀切成细粒。 (2)、将保留的肉汁加蒸馏水,使总体积为 2000 mL,加入蛋白胨 20g,葡萄糖 2g,氯化钠 5g,及绞碎的肉渣,置烧瓶摇匀,加热使蛋白胨溶化。 (3)、取上层溶液测量 pH,并调整其达到 8.0,在烧瓶壁上用记号笔标示瓶内液体高度,121灭菌 15min后
15、补足蒸发的水分,重新调整 pH值 8.0,再煮沸 1020min,补足水量后调整 pH7.4。 (4)、将烧瓶内容物摇匀,将溶液和肉渣分装于试管中,肉渣约占培养基的 1/4左右。经 121灭菌 15min后备用,如当日不用,应以无菌操作加入已灭菌的石蜡凡士林,以隔绝氧气。32、乳糖牛肉膏蛋白胨培养基 乳糖 5g牛肉膏 5g酵母膏 5g蛋白胨 10g葡萄糖 10g氯化钠 5g琼脂粉 15gpH 6.8水 1000mL33、马铃薯牛乳培养基 培养基的配制:200g 马铃薯(去皮)煮出汁,脱脂鲜乳 100mL,酵母膏 5g,琼脂粉 15g,加水 1000mLpH7.0。制平板培养基时,牛乳与其他成分分开灭菌,倒平板前再混合。34、尿素琼脂培养基 尿素 20g琼脂 15g氯化钠 5g磷酸二氢钾 2g蛋白胨 1g酚红 0.012g蒸馏水 1000mLpH 6.80.2培养基的配制:在蒸馏水或去离子水 100mL中,加入上述所有成分(除琼脂外)。混合均匀。过滤灭菌。将琼脂加入 900mL蒸馏水或去离子水中,加热煮沸腾。在 15磅121灭菌 15min。冷却至 50,加入灭菌好的基本培养基,混匀后,分装于灭菌的试管中,放在倾斜位置上使其凝固。