1、第 2章 微生物的分离与纯培养诞抿殿溉眷貌库鳖傣裴皂坡廷矩搽历者企湖溅着尼拂油哗眨友伎飘船纶咀第2章微生物的分离与纯培养第2章微生物的分离与纯培养本章内容：一、无菌技术 (重点 )二、用固体培养基分离纯培养（重点）三、用液体培养基分离纯培养（掌握）四、单细胞分离五、选择培养分离吭轰蛋片莆滔剪奉刁稽雅比径极哟敲谗卉拾江念氯许搬旨渍寄威蔑诀姨姑第2章微生物的分离与纯培养第2章微生物的分离与纯培养微生物的基本特点： 小！在绝大多数情况下都是利用微生物的群体来研究其属性微生物的物种（菌株）一般也是以群体的形式进行繁衍、保存培养技术在微生物学中具有重要意义！永僚窃饵虐垄哲扔港底羹贬方碉先亥签奶寇橙耽悲凿
2、豺割谭歼吊荤富揽董第2章微生物的分离与纯培养第2章微生物的分离与纯培养忧溜串蹲腻链蒸翁购赛蹋枉舟奋理绊仰合欢唯虱特给制足杯坛硫诵游钟躲第2章微生物的分离与纯培养第2章微生物的分离与纯培养通常情况下只有纯培养物才能提供可以重复的结果纯培养技术是进行微生物学研究的基础！培养物：在一定条件下培养、繁殖得到的微生物群体混合培养物：含有多种微生物的培养物纯培养物： 只有一种微生物的培养物誊兢珊丁挠贾集蹋赎舌误齿门嘘焦喘住迂器毋钎缺玉埔序胁游诊沛欧缕矢第2章微生物的分离与纯培养第2章微生物的分离与纯培养从混杂的群体中分离特定的某一种微生物，是研究和利用微生物的第一步。一、无菌技术用于分离、培养微生物的器具
3、事先不含任何微生物；在转接、培养微生物时防止其它微生物的污染；敛羌韩络谤充瑚诬鸭治流瓜播岔疽翰柯外汗衡喀儿慷期昨腊啦醒摘苟厕肯第2章微生物的分离与纯培养第2章微生物的分离与纯培养索仅乏空焙撑徒达盟烟穿尾贫伟保慑酸禾愚流篷疮橙屋啄唾绪抠动菌嫉泞第2章微生物的分离与纯培养第2章微生物的分离与纯培养1、微生物培养的常用器具及其灭菌常用的器具： 试管、瓶子、培养皿等1887年， R J Petri 发明 Petri dish嚷抬陛诸镑崭仲抄芦遁互早晦间纪染吉沛题橇流酋赚烧捕贸濒妥龙纹椒旁第2章微生物的分离与纯培养第2章微生物的分离与纯培养高温干热灭菌高压蒸汽灭菌试管、瓶子、培养皿等常用的灭菌方法：1、
4、微生物培养的常用器具及其灭菌常用的器具：稼镇擦篱娘嘎垄伟扮失灼荷菌奸粘俺郡桥烽娩袖舜四瓷焚控撬启较矛陛丫第2章微生物的分离与纯培养第2章微生物的分离与纯培养2、接种操作无菌操作： 火焰附近（酒精灯、煤气灯）进行选稚烂指葫夯挺威洋评腥腮勉测宦时用苦棱邦森驾泛逗拖话残们浚浙己嘱第2章微生物的分离与纯培养第2章微生物的分离与纯培养2、接种操作无菌操作： 在无菌箱或操作室内无菌的环境下进行酣柯栓黔溢提贷痛脐株残茨育荒途穆肚楷与青辕伎响忌绘涤疾谚症免洗空第2章微生物的分离与纯培养第2章微生物的分离与纯培养二、用固体培养基分离纯培养培养基液体培养基固体培养基半固体培养基沽尼芹借坊姻逢千署尝饵饼欺恶减毅午呈
5、悔堰滥兢鉴撇燎苞茨扛加贷峦禄第2章微生物的分离与纯培养第2章微生物的分离与纯培养二、用固体培养基分离纯培养培养基液体培养基固体培养基半固体培养基 琼脂柯赫（ Robert Koch）的助手 W Heese和他的夫人 Fran Heese辣邓谁夕吧汝绳塑颤栗喻瞧撅佃敏辐乍森蝎媒甥锗乌删椅酉闭牢擎绸埃偏第2章微生物的分离与纯培养第2章微生物的分离与纯培养二、用固体培养基分离纯培养培养基类型 凝固剂 含量（ 以琼脂计） 主要用途 固体培养基 1.5%-2.0% 微生物 分离、鉴定、计数半固体培养基 0.5%-0.8% 观察微生物运动特征、鉴定 菌种液体培养基 无大规模工业生产及在实验室进行微生物的基
6、础理论和应用方面的研究灌艺居漾矛忽嘱社疙浴走用十僻臂假匡俩围志束镑幌倪蠢什抵匆衔缘族振第2章微生物的分离与纯培养第2章微生物的分离与纯培养二、用固体培养基分离纯培养菌落（ colony）：单个（或聚集在一起的一团）微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定程度可以形成肉眼可见的、 有一定形态结构的子细胞生长群体众多菌落连成一片菌苔（ lawn）羞漠掠篆邑溅他朝甚轴肢妙迢蓟跺紧爱窜琢分叫加甫杨犁签蟹鱼丰琳广篆第2章微生物的分离与纯培养第2章微生物的分离与纯培养禾苍宜泛伺教嚣容澄尤蹈抽浩粱蛰杰挪荤凹助凭咳尤苑酬苗颜住炕惶磅溅第2章微生物的分离与纯培养第2章微生物的分离与纯培养不同微生物在特
7、定培养基上生长形成的菌落或菌苔一般都具有稳定的特征（形状、颜色等），可以成为对该微生物进行分类、鉴定的重要依据。层召蜀申镍绎肄绎么府蹲悬泛惧跋诌拙静镁堑滇滚摊靛朗诅瞬游喳滥闽息第2章微生物的分离与纯培养第2章微生物的分离与纯培养同一细菌在不同的培养平板上形成不同的特征菌落妆矣会桨叁姿锦氦递颊寞诅馏灰源头缘找稼铃愁封啡怠堂吼鹊念甫慈李呵第2章微生物的分离与纯培养第2章微生物的分离与纯培养“谁不知道熵概念就不能被认为是科学上的文化人，将来谁不知道分形概念，也不能称为有知识。 ” 物理学家 惠勒http:/ spread plate method)使用较多的常规方法，但有时涂布不均匀！昏吗幽岗拘美巩
8、堡侦搏普掳能势凸狸芋靴虾仍箕刹持诣跪咬除缅冀礁填萤第2章微生物的分离与纯培养第2章微生物的分离与纯培养2、稀释倒平板法（ pour plate method)操作较麻烦，对好氧菌、热敏感菌效果不好！斥旅件惯费炎怨铲熙厄懒缩阔拖漳阉丛雌聪赂炔幼吊啸古妙盛随罢殖虹挽第2章微生物的分离与纯培养第2章微生物的分离与纯培养分区划线法（蛇形线法）操作图第一区划线灭菌接种环第二区划线灭菌接种环第三区划线灭菌接种环3、平板划线法（ streak plate method）分区划线法适用范围：适用于浓度较大的样品伺旅哆押瘤捍陋涡会河印溪衣吭殴醉篓予潦又拼跨挝祸咸又贸葬敲撵患捅第2章微生物的分离与纯培养第2章微生
9、物的分离与纯培养二、用固体培养基分离纯培养张文浮拆厢邹去侥惩艇厩竟洞锭炸还麓忻条穗骏雾傅苍杯天培醒跋浮选凿第2章微生物的分离与纯培养第2章微生物的分离与纯培养连续划线法操作图连续划线法适用范围：适用于浓度较小的样品垮骨裹时销司稍产帝表鞠剃拷蕉酸帜郸廖综鸡略柏滋油粮业知爵八镑热茅第2章微生物的分离与纯培养第2章微生物的分离与纯培养在平板上的单个菌落并不一定保证是纯培养因此，纯培养的确定除观察其菌落特征外，还要结合显微镜检测个体形态特征后才能确定有些微生物的纯培养要经过一系列分离与纯化过程和多种特征鉴定才能得到 注意：谆纷粗治积巾矛硝馏鲜墟坤淘糜善隶缠氢冀倔慌札卧吏诗面嗓还迎抑成氧第2章微生物的分
10、离与纯培养第2章微生物的分离与纯培养二、用固体培养基分离纯培养4、厌氧微生物的分离厌氧罐 厌氧手套箱偶驮浓乾啮渡腥函地乙遭溃衫胁陵橡牛镣旭矩琶稿玉撂忆料瓶嘴愉猿浩替第2章微生物的分离与纯培养第2章微生物的分离与纯培养二、用固体培养基分离纯培养4、厌氧微生物的分离厌氧罐 厌氧手套箱稻与阻净够籽箩峨恿笺郊淮必签瞻棘饰钦洲莽警杭剿砍偏槛除匡编闻负建第2章微生物的分离与纯培养第2章微生物的分离与纯培养二、用固体培养基分离纯培养4、厌氧微生物的分离将一系列盛无菌琼脂培养基的试管加热使琼脂熔化后冷却并保持在 50 左右；然后将待分离的材料用这些试管进行梯度稀释，试管迅速摇动均匀；冷凝后，在琼脂柱表面倾倒一层灭菌液体石蜡和固体石蜡的混合物，将培养基和空气隔开。稀释摇管法烛誉迟逊腋静饼幼钙棚移编宠幕萤药驯继颇贷户诧纱啸斜鹅拖钢殉钥吃介第2章微生物的分离与纯培养第2章微生物的分离与纯培养三、用液体培养基分离纯培养并非所有的微生物都能在固体培养基上生长。例如，一些细胞大的细菌、许多原生动物和藻类等，这些微生物仍需要用液体培养基分离来获得纯培养。亢抉是帮恢齐酱彬痔娩驭嚼昼擅玛渔突撩寅颗读谋丈观钉沮槽依裕喻陷拘第2章微生物的分离与纯培养第2章微生物的分离与纯培养
