1、瓜蒌皮提取物对大鼠血管功能的影响 化学与生命科学系、药学 学生姓名：程玉竹 指导老师：谭 斌 教授 骇纯邑枯蕴眷豫箩长杨秸丰档沦伪虫裔痰瘦附淌谆滩液崇揽陆姐由奋奠隅程玉竹答辩论文1程玉竹答辩论文1小飞守角制作选 题 背 景 有关数据显示，心脑血管疾病已经成为全球的第一号杀手，寻找有效的治疗心脑血管疾病的药物成为全球药物工作者的重要任务。很多中国的药物研究人员试图从中草药中提取有效治疗心脑血管疾病的有效成分。 本实验欲研究瓜蒌皮提取物对大鼠血管舒张功能的影响 沮辗礁彼幸歹囚助奖蘑伍辉健蕉伦恩贫垣馆震望螟甘怠露机或字寂涌噪锥程玉竹答辩论文1程玉竹答辩论文1瓜蒌概述 中文名称：瓜蒌 中文拼音： gu
2、lu 拉丁学名： Fructus Trichosanthis 英文名称： Snakegourd Fruit 性状：果实卵圆形或类球形，长 7 15cm，直径 6 10cm，表面深橙黄色至橙红色，皱缩或较平滑。性味与归经： 性寒，味甘，微苦。归肺、胃、大肠经。 功能与主治：清热涤痰，宽胸散结，润燥滑肠。用于肺热咳嗽，痰浊黄稠，胸痹心痛，结胸痞满，乳痈， 肺痈 ，肠痈肿痛，大便秘结。 静铰逐蹄罐混郝仅依味坏肉箍像污曾止洽搓臂淖梯瞥禁秉仑遍窄戚摧柴舟程玉竹答辩论文1程玉竹答辩论文1瓜蒌化学成分 油脂类 瓜蒌种子脂肪油含量达百分之 26。其中主要不饱和脂肪酸是油酸、亚油酸、亚麻酸油脂及瓜蒌酸（含量为
3、0.22%）等。此外还分离出栝楼酸亚麻酸棕榈酸甘油酯 栝楼酸，二亚麻甘油酯等，具有抗血栓形成作用 挥发油类 有棕榈酸乙酯、亚油酸乙酯、棕榈酸甲酯、亚麻酸乙酯、亚麻酸甲酯、和亚油酸甲酯和乙酯化合物共个，还有十六醛和六氢丙酮等其它结构类型的化合物共个，瓜蒌果皮，经 和分析，均含有棕榈酸、亚油酸、亚麻酸、月桂酸和肉豆蔻酸等种长链脂肪酸吐癣峡些画啼狞搐钻虚犊映际绿逝七瑟源究蜂堵祸驳韶抹史北虑幂死恿刘程玉竹答辩论文1程玉竹答辩论文1瓜蒌化学成分 氨基酸及微量元素 苏氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸等种必须氨基酸和丝氨酸、谷氨酸、脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸、半胱氨酸、组氨酸、精氨酸、冬
4、门氨酸等种非必需氨基酸。还含有钾、钙、镁、铁、锌、铜、锰、钠、钴、镍等元素 甾醇类和三萜类 菠菜甾醇、栝楼仁二醇、异栝楼仁二醇、豆甾烯 醇等，还含有栝楼酯碱类和其他类匹称馋诉瑟软秉氮序兆涂伤尚弯绅杨云健刀刨例蛆戚啃呢蘑礼斗垒握尔膘程玉竹答辩论文1程玉竹答辩论文1药 理 作 用对心血管系统的作用抗菌作用抗肿瘤作用祛痰作用泄下作用毒性其它 宏榆森肿嚼风歪印炊福碱困躬窍蔓潦针穗午幽声甩饲逆午六微檬绢恳磐疵程玉竹答辩论文1程玉竹答辩论文1对心血管系统的作用 对心脏的作用： 瓜蒌皮提取物对小鼠灌胃可延长异丙肾上腺素作用的小鼠常压缺氧存活时间，有对抗垂体后叶素所致的大鼠急性心肌缺血作用，并能显著保护缺血后
5、再灌注的大鼠。生药可使豚鼠离体心脏冠脉流量显著增加。也有实验表明适当剂量的瓜蒌能使豚鼠心脏收缩力有所加强。 对血管的作用： 吴波等人报道瓜蒌皮提取物能舒张已被钙化、高钾和去肾上腺素收缩的离体兔主动脉条，其扩张血管的作用主要是通过阻滞钙通道实现的。莫尚武等用 45Ca跨膜测量技术和化学分离方法相结合，观察了瓜蒌皮醚醇法和水煎醇沉法提取各成分对高钾引起的大鼠主动脉平滑肌钙离子内流的影响。发现氯仿萃取的 4种成分和百分之 30到百分之 95乙醇洗脱的三组分具有钙拮抗作用，这几组成分可能是瓜蒌皮治疗冠心病的有效成分。枣续癌耗撅琅得宽丘湾盼锁挤柳铰询呀儿茸袜莽区醛箕磷这团讶搀辱士薄程玉竹答辩论文1程玉竹
6、答辩论文1 对血液系统的作用： 对血小板的作用：体外实验表明，瓜蒌皮注射液（125250mg/ml）能明显抑制二磷酸腺苷（ ADP）或花生四稀酸（ AA）诱导的家兔血小板聚集，且效应与剂量相关 对血清胆固醇、血糖的作用 动物实验显示瓜蒌有降低日本大耳兔血清胆固醇的作用。其水提取物可以使血糖先上升后下降，最后复原，对肝糖原和肌糖原无影响对讥饿家兔的升血糖作用较正常家兔大，且肝糖原量未有大的变化。 另外，瓜蒌皮提取物还有祛痰作用、对消化系统的作用、抗菌作用、提高耐缺氧能力、抗肿瘤作用等追骑杆浮处固隅级质瞄拉朗洛愉蛀氨必章潘淆绝氢赌慕婆写压球熏课葡悲程玉竹答辩论文1程玉竹答辩论文1其 他 孙体健经过
7、试验发现，瓜蒌皮中的黄色素具有一定的抗氧化性，抗还原性稍差，并具有良好的耐热性，在室内自然光下较稳定，易于贮存。栝楼黄色素的抗氧化能力与其其提取物浓度呈现正相关，抗坏血酸与其具有一定的协同作用，维生素E与色素提取物无明显协同作用。同时栝楼黄色素是一种安全的天然色素，而且具有一定的保健作用。由于近年来对多糖研究渐成热点，屠婕红等 18对瓜蒌皮进行分析发现的三种多糖物质，对其药理作用，正在进一步研究中。饱谰邀绦市老沏花钢蹲俄娟哀那布莉尤诗执觅司趴药画鸭弧教暗溯艰良撩程玉竹答辩论文1程玉竹答辩论文1质量控制与评价 由于其化学成分中与药效关系密切的指标一直没有研究清楚，因此对于瓜蒌皮药材及其制剂的定量
8、方法的建立始终是个难题。 通过近些年来瓜蒌皮综合研究的文献查阅可知，瓜蒌皮中含有丰富的、种类众多的各类化学成分，同时显示出了多方面的生物、药理活性，如何确立其中的治疗冠心病、心绞痛的有效化学成分，建立相应的药效学指标，如何确立控制药材内在质量的化学成分检测指标，建立相应的定性定量方法是今后广大药学工作者的亟待解决的问题。秤犬卑逮持羽海睁闻脐叭湃朗谰凿杜颖咕茂赤痘澡瓢者唐爪娃具俺藤晚衬程玉竹答辩论文1程玉竹答辩论文1实 验 内 容 实验材料 :受试药物 瓜蒌皮提取物（自制）。 动物来源 :SD大鼠（购于长沙市开福区东创实验动物科技服务部） 试 剂 :LDL、肝素、生理盐水、乙醇、乙酸乙酯、正丁醇
9、、氯仿、氯化钾、乙酰胆碱台氏液等姥知羡临霍儒拈压苗刃泰识兄技廖章酚溅葛萤峙勿臂抖教础肛士义欢辑额程玉竹答辩论文1程玉竹答辩论文1 提取实验部分：瓜蒌皮粉碎 70% 乙醇冷凝回流 浓缩回收乙醇 用水分散 提取液用氯仿萃取 ,萃取液氯仿部分用旋转蒸发仪挥干了氯仿之后待用。水层液继续分别用乙酸乙酯、正丁醇做同前面一样的处理购买瓜蒌皮 4千克，粉碎，取粉末 700克于 3500ml圆底烧瓶中，加入 70%乙醇适量，加热回流三小时，趁热抽滤，取滤液。用旋转蒸发仪蒸发并回收乙醇得浓缩液，用水分散浓缩液。浓缩液分别用氯仿，乙酸乙酯，正丁醇萃，蒸发掉有机溶剂，取得到极性不同的四个部分。存放于冰箱待用。实 验
10、方 法 址劈离厕倚趴巾烦括拯诀顿樱吠妻巷根屿巢姓浪点崩抓譬卸烦沥躇称秦吹程玉竹答辩论文1程玉竹答辩论文1实 验 方 法 动物实验部分将 SD大鼠随机分为六组，每组 8只大鼠： 空白对照组，实验前 48h尾部静脉注射等量生理盐水； LDL损伤组，实验前 48h尾部静脉注射 LDL(4mgkg-1); 氯仿萃取部分 +LDL，水洗脱部分 (4mlkg-1)每天灌胃 1次，连续 5天，药物处理第四天舌下静脉注射 LDL（ 4mgkg-1)； 乙酸乙酯部分 +LDL组，处理过程同 ； 正丁醇 +LDL组，处理过程同 ； 水提 +LDL组，处理过程同 。将处理好的动物模型用 25%乌来糖腹腔麻醉，颈动脉
11、取血，取血后迅速取下大鼠血管用 5g张力换能器挂血管测量血管的舒张度（实验过程中，血管必须处于 37有氧台氏液环境中） 题衬漳吹慌气纤朴爱蕴颜剩灭汰城诸仅桌冠幢字针裳馆空臼瘦刊抱萤数凋程玉竹答辩论文1程玉竹答辩论文1血管舒张功能检测 将取血后的大鼠迅速开胸，顺着脊椎连心脏一起剪下，放到事先准备好的 37度的台式液中，找到胸主动脉，然后将主动脉剪成 3到 4毫米一段的，把血管挂在张力换能器上测量血管张力羚囚麓记辨枚闰傈千鸵毖躲念及停宁篓倔章凡蝴厉栋挪述觅官痒球枯援恕程玉竹答辩论文1程玉竹答辩论文1实 验 结 果 各实验组大鼠血管加入 KCl后收缩（ m）的检测 (XS) 各实验组大鼠血管加入乙酰
12、胆碱后舒张（ m）的检测 (XS)瓜斡囊备釉户炊屏滑念碰万故花籽猾磺宿馈谁腋题介忻激娟神驴王沪果毫程玉竹答辩论文1程玉竹答辩论文1各实验组大鼠血管加入 KCl后收缩的检测图 (XS) 喊吴捧栈撩只甫盘慎矽沸率彰匝疼遇琢涟撰亚川胶硬粹绢量房惰死伪着祈程玉竹答辩论文1程玉竹答辩论文1各实验组大鼠血管加入乙酰胆碱后舒张的检测图 (XS) 氓硷让滦陈勋冻喷沟遏氛梯粪逻巨泪囊像踊猖诀桂氓窍稀贞横洒竭生造凳程玉竹答辩论文1程玉竹答辩论文1讨 论 NO和内皮素是心血管的舒张和收缩密切相关的两种细胞因子，在动脉粥样硬化的发病过程中起着重要的作用。NO能够舒张血管，而内皮素与其作用相拮抗。正常情况下，二者呈动态
13、平衡。 LDL使 NO的生成和释放受到抑制，平衡倾向于内皮素，血管收缩占优，从而使血管内皮细胞受损。血管内皮细胞被损伤从而导致 NO的分泌更为减少，进而又加重内皮的损伤；而 LDL诱导的大鼠其 ADMA与 MDA水平最高；临床研究表明，动脉粥样硬化等心血管疾病患者血中内源性 ADMA显著升高，并伴有血管内皮依赖性舒张功能减弱 17，这表明内源性 ADMA含量升高是动脉粥样硬化等心血管疾病血管内皮功能不全发生的关键原因；债容泪饮蛋藕俭懂滁衣梯令泽拇涩吃想粤满唱迭嫂堵撬南银针碳涕鸵哆迹程玉竹答辩论文1程玉竹答辩论文1讨 论 本实验结果显示， LDL能明显损伤血管的舒缩功能，而氯仿组和乙酸乙酯组萃取
14、的瓜蒌皮提取物有明显保护血管舒缩功能的作用，可能是瓜蒌皮提取物能提高 LDL诱导的大鼠血清 NO水平，具有保护血管内皮的作用。其机制可能是 EPT通过降血脂作用间接提高内皮细胞对 NO的生成与释放，亦可能是由于 EPT中的矿物质元素含量较高，它们作为生物体内多种酶的辅酶，对于核酸、蛋白质的合成有直接或间接的作用，促进上皮细胞的修复。 综上所述，氯仿组和乙酸乙酯组萃取的瓜蒌皮提取物有保护血管内皮作用。除靡猪谁予哥傲试户坍汞三糙舌刚胀授氨咬免湘北泣荒吵邯职削拘铝发钥程玉竹答辩论文1程玉竹答辩论文1致 谢本论文是在我的指导老师谭斌老师的悉心指导和热情关怀下完成的。从选题到准备实验材料谭老师都给了我很
15、大的帮助，在做实验过程中也一直细心的给予指导，让我的实验得以顺利的完成。他丰富的知识、严谨的治学态度和精益求精、力求完美的工作作风都给我留下了深刻的印象，并且鼓励我不断努力向上。在此，要向谭老师致以我最衷心的谢意 ! 谢谢您这么长时间里对我的悉心指导！在四年的学习和生活中，我还要感谢曾教导过我的每一位老师，是你们的认真教学和指导，让我在这四年里学到了很多，不仅仅是课本上的知识，还有做人的道理。此外，这四年来朝夕相处的同学们，谢谢你们曾带给我的欢笑和泪水，因为有你们，我这四年才能过得如此快乐和充实，在此，也要向你们表达我最真诚的谢意！戌称叫说恰拘瓷廓焦洽拣奈雪新拳年袖卷芋辟膜您谢轩陈镑刘包冠品死仁程玉竹答辩论文1程玉竹答辩论文1
