1、 动物学论文：小鼠四倍体补偿技术的初步探讨【中文摘要】胚胎干细胞(embryonic stem cell, ESC)是具有自我更新和多向分化潜能的胚胎细胞,具有向机体各种组织细胞分化的能力,又称为全能干细胞。小鼠二倍体胚胎经电融合可产生四倍体胚胎,这些胚胎与孤雌、孤雄生殖一样不能发育成正常个体。ES 细胞与四倍体胚胎形成嵌合体的过程中,ES 细胞广泛参与胚体、尿囊、羊膜、绒毛膜中胚层和卵黄囊中胚层的形成,而四倍体来源的细胞主要分布在胚外组织,如滋养层、卵黄囊膜、尿囊膜、胎盘等,几乎不参与胎儿本身的形成。因此,如果将 ES细胞与四倍体胚胎嵌合,使二者的发育能力互相补偿,就有可能得到完全由 ES细
2、胞发育而来的个体,这种技术被称为四倍体补偿技术(tetraploid embryo complementation),所得到的小鼠称为 ES小鼠。Nagy 等在 1993年首次用聚合法得到了完全由 ES细胞发育而来的 ES小鼠。随后,更多人利用四倍体囊胚注射法来获得 ES小鼠。1.电融合获得四倍体胚胎及其发育能力比较利用昆明小白鼠 2细胞期胚胎进行电融合、经体外培养得到四倍体囊胚,对电融合条件进行了摸索,结果在交流电 1-2V排序、直流电 50V电击、脉冲时程 35s、脉冲次数 2次的.【英文摘要】Embryonic stem (ES) cells are drived from the in
3、ner cell mass (ICM) of balstocysts with potential capacity of self-renewal and differentiation. ES cells possess the capacity of differentiation to various somatic cell lineages, so they are called pluripotent stem cells. The diploid embryo of mice may produce tetraploid embryo by electrofusion. The
4、 tetraploid embryo whose developmental capacity is the same as parthenogenetic and androgenesis, cant develop into normal individuals. During the formation of chim.【关键词】四倍体胚胎 ES 细胞 电融合 囊胚注射【英文关键词】Tetraploid embryo Embryonic stem cell Electrical fusion Blastocyst injection【目录】小鼠四倍体补偿技术的初步探讨 摘要 4-6 AB
5、STRACT 6-8 缩略词表 11-13 第一部分 实验研究 13-45 第一章 电融合获得四倍体胚胎及发育能力比较 13-20 1 材料 13-14 2 方法 14-15 3 结果 15-17 4 讨论 17 5 结论 17-18 参考文献 18-20 第二章 胚胎干细胞的常规培养及鉴定 20-30 1 材料 20-22 2 方法 22-26 3. 结果 26 4. 讨论 26-27 5. 结论 27-28 参考文献 28-30 第三章 ES 细胞的囊胚注射及胚胎移植 30-38 1 材料 30-31 2 方法 31-34 3 结果 34-35 4 讨论 35-36 5 结论 36-37
6、参考文献 37-38 结论 38-39 图版一 39-40 图版二 40-41 图版三 41-42 图版四 42-43 图版五 43-44 图版六 44-45 第二部分 文献综述 45-61 一 胚胎干细胞的研究进展 45-52 1、胚胎干细胞的研究历史 45-46 2、胚胎干细胞的生物学特性 46-48 3、影响胚胎干细胞的关键因素 48-50 4、胚胎干细胞的应用前景 50-52 二 四倍体补偿技术的研究进展 52-56 1、四倍体胚胎的制备 52-53 2、四倍体胚胎的基因表达 53-54 3、ES/4n 嵌合体胚胎的发育 54 4、利用四倍体补偿技术生产 ES小鼠存在的问题 54-55 5、四倍体补偿技术的应用前景 55-56 参考文献 56-61 致谢 61-62 硕士期间论文发表情况 62
