1、 北京华运安特科技有限责任公司咨询服务电话:010-82752212,82751994,83251657,13521152728表 三 次 重 复 细 菌 量 基 数 表生 长指 标细 菌 量基 数 (个/ml)生 长指 标细 菌 量基 数(个 /ml)生 长指 标细 菌 量基 数 (个 /ml)生 长指 标细 菌 量基 数 (个 /ml)生 长指 标细 菌 量基 数 (个 /ml)000 0.0 110 0.7 211 2.0 300 2.5 320 9.5001 0.3 111 1.1 212 3.0 301 4.0 321 15.0010 0.3 120 1.1 220 2.0 302
2、6.5 322 20.0011 0.6 121 1.5 221 3.0 310 4.5 323 30.0020 0.6 130 1.6 222 3.5 311 7.5 330 25.0100 0.4 200 0.9 223 4.0 312 11.5 331 45.0101 0.7 201 1.4 230 3.0 313 16.0 332 110.0102 1.1 202 2.0 231 3.5 333 140.0210 1.5 232 4.0表 细 菌 量 总 数 结 果 报 告 示 例 表长 菌 观 察1 号瓶2 号瓶3 号瓶4 号瓶5 号瓶示例0 级 1 级 2 级 3 级 4 级 生 长
3、指 标级数细 菌 量 总数 (个/ml)1 +- - - - - 100 100 0.61002 + + - - - 200 101 2.51013 + + + +- - 320 102 9.51024 + + + + + 300 104 2.51044简易细菌测试瓶使用说明书谢谢使用北京华运安特科技有限责任公司出品的测 试 瓶 系列产品,请在使用前仔细阅读该使用说明手册。一、产品品种:细菌总数测试瓶(BT)大肠菌群测试瓶(FCB) 腐生菌测试瓶(TGB) 铁细菌测试瓶(FEB) 硫酸盐还原菌测试瓶(SRB)石油烃降解菌测试瓶(HDB)二、方法原理:采用绝迹稀释法,即用无菌注射器将待测定的水样
4、逐级注入到测试瓶中,进行接种稀释后,置于培养箱培养,根据测试瓶阳性反应和稀释的倍数,计算出水样中细菌量总数。三、操作步骤: 将同一品种测试瓶排成一组,依次编上序号(按照估计的细菌量确定测试瓶个数,建议参考数值为:X 100 的细菌量用个测试瓶、X10 1 的细菌量用个测试瓶、 X102 的细菌量用个测试瓶、X10 3 的细菌量用个测试瓶) 。做二个平行样重复试验时应排为二组;做三个平行样重复试验时应排为三组。 用无菌注射器取 1ml 代表性水样(采样方法依据 GB/T12997-1991、GB/T12998-1991、GB/T12999-1991、GB/T14581-1993 的规定进行)注入
5、 1 号瓶内稀释,充分振摇,待用(平行样亦按此操作,下同) ; 北京华运安特科技有限责任公司咨询服务电话:010-82752212,82751994,83251657,13521152728 用另一支无菌注射器从 1 号瓶内抽取 0.5 ml 经充分振摇后的水样注入 2 号瓶内稀释,充分振摇,待用; 再用一支无菌注射器从 2 号瓶中内抽取 0.5ml 经充分振摇后的水样注入 3 号瓶内稀释,充分振摇,待用; 依次类推稀释直到最后一瓶为止,待用。 将上述所有稀释过的测试瓶放入恒温培养箱中培养,按表进行细菌生长的鉴别。表 细 菌 生 长 的 鉴 别 方 法细菌瓶品种 规格型号 培养温度 培养 时间
6、阳性反应特征细菌总数测试瓶BT 372 242h 瓶中液体由红变黄、或液体混浊、或液体表面出现菌膜、或液体底部出现沉淀。总大肠菌群TCB 372大肠菌群测试瓶 粪大肠菌群TCB 442242h 瓶中液体由紫红变黄腐生菌测试瓶 TGB 242h 瓶中液体由红变黄铁细菌测试瓶 FEB 7d 瓶中液体棕色褪去,生成棕色或黑色沉淀(硫化亚铁/铁单质)硫酸盐还原菌测试瓶SRB现场采样温度37d 瓶中微黄色液体变黑或生成黑色沉淀(硫化亚铁)2四、细菌量计量:在一定温度下培养一定时间后,按瓶号列出稀释梯度,并根据细菌瓶阳性反应的个数,确定生长指标和级数(参见附录及示例) 根据生长指标查表或表,确定细菌量基数
7、并乘以级数,即为细菌量总数。细菌量总数细菌量基数级数二组平行样重复试验查表三组平行样重复试验查表3、细菌量总数结果报告示例见表五、注意事项1、测试瓶中若有白色沉淀为过量营养成份,属正常现象,不影响测试。2、常温条件下,测试瓶储存有效期为一年。3、测试瓶经稀释后,一定要用力振摇 12 分钟,以保证测试结果的准确性。表 二 次 重 复 细 菌 量 基 数 表生 长指 标细 菌 量 基 数 (个 /ml)生 长指 标细 菌 量 基 数 (个 /ml)生 长指 标细 菌 量基 数 (个 /ml)生 长指 标细 菌 量 基 数 (个 /ml)生 长指 标细 菌 量基 数 (个 /ml)000 0.0 0
8、20 0.9 111 2.0 201 5.0 220 25.0001 0.5 100 0.6 120 2.0 210 6.0 221 70.0010 0.5 101 1.2 121 3.0 211 13.0 222 110.0011 0.9 110 1.3 200 2.5 212 北京华运安特科技有限责任公司咨询服务电话:010-82752212,82751994,83251657,135211527283例 2、 即 则此生长指标为 321,级数为 1。查三次重复计数表。321 对应的细菌量为 15 个/ml。此系列报告结果为:1510 1=150 个 /ml。例 3、 即 则此生长指标为
9、 121,级数0。查三次重复计数表。121 对应的细菌量为 1.5 个/ml。此系列报告结果为:1.510 0 既1.5 个/ml 。例 4、 即 8 附录一、 生长指标的确定原则 全部呈阳性反应的最后一列平行样应为生长指标的第一位数 同一平行样,有个阳性反应瓶,生长指标即为二、级数的确定原则全部呈阳性反应的最后一列平行样的瓶号数减去,即为级数,以 表示号瓶的或个平行样未全部发生阳性反应时,级数为,即为 示例 + - - - -+ + - - -+ + + - -生长指标: 级 数: ()示例 + + + - -+ + + - -+ + + + +生长指标: 级 数: ()+ + + - -+
10、 + + - -+ + - + -3 2 1 - + - - -+ + + - - - - - -1 2 1 北京华运安特科技有限责任公司咨询服务电话:010-82752212,82751994,83251657,135211527285示例 + + - + -+ + + - -生长指标: 级 数: ()示例 - + - - -+ - + - -生长指标: 级 数: 6细菌测试瓶测试方法及结果报告示例例、做三个平行样重复试验,每个样稀释 5 个梯度: 即分别在 号瓶中注入 0.5ml 水样,摇匀后取出 0.5ml再分别注入 号瓶中;摇匀后取出 0.5ml 再分别注入到 号瓶中,依次类推,直至
11、 号瓶。在恒温下放置一定时间后(大肠菌群 37,24 小时)观察测试瓶阳性(变色)反应个数。例 1、 (打者为阳性反应-以+表示) 即则此生长指标为 321,级数为 0。查三次重复计数表。321 对应的细菌量为 15 个/ml。此系列报告结果为:1510 0=15 个/ml。+ - - - -+ + + - -+ + - - -3 2 1 北京华运安特科技有限责任公司咨询服务电话:010-82752212,82751994,83251657,135211527287例 4 中的生长指标第 1 位数 3 对应 号瓶依次类推。 如果第一列( 号瓶)未全部发生阳性反应,报告结果应注明“” ,如例
12、3;如果至最后一列( 号瓶)全部发生阳性反应,报告结果应注明“” , (如例 5) 。此情况下说明细菌量大,应增加测试瓶的个数,以求得较准确的结果。 测试瓶注入水样(稀释)后应用力振摇,以保证结果的准确性;逐级稀释水样时,应更换无菌注射器,以保证结果的准确性。北京华运安特科技有限责任公司电话:010-82752212,13521152728 10即 则此生长指标为 312,级数为 2。查三次重复计数表。312 对应的细菌量为 11.5 个/ml。此系列报告结果为:11.510 2 个/ml。例 5、 即 即则此生长指标为 300,级数为 4。查三次重复计数表。300 对应的细菌量为 2.5 个
13、/ml。则此系列报告结果为2.510 4 个/ml。注意事项: 做几个平行样对应查几次重复计数表(即生化检测方法中的 MPN 表) 。 计算公式为:瓶号数-1=级数 n,即在结果后应 10 n。如 1 号瓶级数为 0 级,即在结果后10 0;2 号瓶级数为 1 级,即在结果后10 1;3 号瓶级数为 2 级,即在结果后10 2; 全部阳性反应的最后一列应为生长指标的第 1 位数。如例 1 中的生长指标第 1 位数 3 对应 号瓶例 2 中的生长指标第 1 位数 3 对应 号瓶9+ + + + + + + - + + + - -3 1 2+ + + + + + + + + + + + +3 0 北京华运安特科技有限责任公司咨询服务电话:010-82752212,82751994,83251657,13521152728