BIORAD 纯化介质（Profinity IMAC Resins）纯化蛋白2011 年 1 月 10 日用 BIORAD 亲和层析纯化柱纯化蛋白后发现蛋白不能与柱子稳定偶联，蛋白在各个浓度的咪唑浓度下均能被洗脱。具体操作步骤如下：1. 用含有 8M 尿素的缓冲液 PH7.5 1:10(w/v)重悬包涵体,超声波裂解，置于 4上 1h 离心,10000g,10min,离心取上清2. 用 0.45m 过滤器过滤上清。3. 5V 的 Binding Buffer（含尿素） 平衡柱子，1ml/min4.上样5.10V 的 Wash Buffer 洗去未结合的样品6. 5V Elution Buffer 洗脱样品（ 50mM、100、250、500 咪唑）7.10V Binding Buffer（含尿素）平衡柱子，停止取样8.10V 水洗柱子1-2：为上样前样品3：为流穿4-6：为 wash buffer(10mM 咪唑)过柱7-8：为 50mM 咪唑洗脱9-10：为 100mM 咪唑洗脱11-12：为 250mM 咪唑洗脱13：为 500mM 咪唑洗脱
