1、照组大鼠放回鼠笼，训练 6 h 后对 6-12 h RSD 组大鼠进行 REM 睡眠剥夺；第四天在场景 A 中进行恐惧消退再现检测 20 min（无任何刺激呈现）。研究表明实验一和实验二两种任务不依赖于海马，实验三和实验四两种任务是海马依赖性的。在恐惧条件化、恐惧消退训练及消退再现检测阶段记录分析大鼠的僵直行为。结果：实验一：在恐惧条件化以及恐惧消退训练阶段，0-6 h RSD 组、6-12 h RSD组与各自对照组大鼠的僵直水平组间差异都无显著性；在恐惧消退再现检测阶段，0-6h RSD 组大鼠的僵直水平显著高于对照组，6-12 h RSD 组与对照组大鼠的僵直水平组间差异无显著性。实验二：
2、在恐惧条件化以及恐惧消退训练阶段，0-6 h RSD 组、6-12h RSD 组与各自对照组大鼠的僵直水平组间差异都无显著性；在恐惧消退再现检测阶段，0-6 h RSD 组大鼠的僵直水平显著高于对照组，6-12 h RSD 组与对照组大鼠的僵直水平组间差异无显著性。实验三：在恐惧条件化、恐惧消退训练以及恐惧消退再现检测阶段，0-6 h RSD 组、6-12 h RSD 组与各自对照组大鼠的僵直水平组间差异都无显著性。实验四：在恐惧条件化、恐惧消退训练以及恐惧消退再现检测阶段，0-6 h RSD组、6-12 h RSD 组与各自对照组大鼠的僵直水平组间差异都无显著性。结论：恐惧消退训练后的 RS
3、D 对于恐惧消退记忆的影响是复杂的，RSD 损害海马非依赖性恐惧消退再现，而对海马依赖性任务没有影响，并且这种损害依赖于恐惧消退训练后睡眠剥夺的时段，进一步说明 REM 睡眠选择性参与特定任务的记忆过程。关键词：睡眠剥夺，恐惧消退，海马，场景，僵直，大鼠4Effects of REM sleep deprivation on recall of fearextinction in ratsABSTRACTObjectives ： The present study was to examine the effects ofpost-extinction rapid eye movement s
4、leep deprivation(RSD) on recall of fearextinction。Methods： Experiment 1：On Day 1，rats were transported to context Ato habituate them to the context；On Day 2(fear conditioning phase)， Ratsreceived five pairings of tone and footshock in context A ； The nextday(extinction training phase)，rats received
5、ten tone-alone extinctiontrials in context A，immediately，0-6 h RSD rats were placed in the RSD apparatusand 6-12 h RSD rats and control rats were placed in their homecages，six hourslater，6-12 h RSD rats were placed in the RSD apparatus；On Day 4(recall testphase)，rats received ten additional extincti
6、on trials in context A。Experiment2：On Day 1 ，rats were transported to context A and context B to habituatethem to the context； On Day 2(fear conditioning phase)，rats received fivepairings of tone and footshock in context A；The next day(extinction trainingphase) ， rats received ten tone-alone extinct
7、ion trials in context B ，immediately， 0-6 h RSD rats were placed in the RSD apparatus and 6-12 h RSDrats and control rats were transported to their homecages，six hours later，6-12 h RSD rats were placed in the RSD apparatus；On Day 4(recall test phase)，rats received ten additional extinction trials in
8、 context B。Experiment 3：On Day 1，rats were transported to context A and context B to habituate themto the context；On Day 2(fear conditioning phase)， rats received five pairingsof tone and footshock in context A；On Day 3 (extinction training phase)，rats received ten tone-alone extinction trials in co
9、ntext B，immediately，50-6 h RSD rats were placed in the RSD apparatus and 6-12 h RSD rats and controlrats were transported to their homecages，six hours later，6-12 h RSD ratswere placed in the RSD apparatus；The next day(recall test phase)，rats receivedten additional extinction trials in context A。Expe
10、riment 4：On Day 1，ratswere transported to context A and to habituate them to the context；On Day2(fear conditioning phase) ， rats received five footshocks without tonepresentation in context A；On Day 3 (extinction training phase)，rats receiveda 20 min extinction session in same context and were immed
11、iately deprived ofREM sleep for six hours(0-6 h RSD) or placed in their home cages(6-12 h RSDand control groups)，six hours later，6-12 h RSD rats were placed in the RSDapparatus; The next day(recall test phase)，rats received an additional 20min extinction session。Previous stuies showed that recall of
12、 extinction ishippocampus-independent in experiment 1 and experiment 2，whereas they arehippocampus-dependent tasks in experiment 3 and experiment 4。Percent of timespent freezing was scored and analysed during fear condioning phase 、extinction training phase and recall test phase。Results：Experiment 1
13、：We found no significant group effect among 0-6h RSD、6-12 h RSD and control groups on fear conditioning phase and extinctiontraining phase；RSD from 0-6 h significantly increased freezing whereas thereis no significant group effect between 6-12 h RSD and control groups on recalltest phase。Experiment
14、2：We found no significant effect among 0-6 h RSD、6-12 h RSD and control groups on fear conditioning phase and extinctiontraining phase；RSD from 0-6 h significantly increased freezing whereas thereis no significant group effect between 6-12 h RSD and control groups on recalltest phase。There is no sig
15、nificant effect among 0-6 h RSD、6-12 h RSD andcontrol groups on fear conditioning phase、extinction training phase andrecall test phase in experiment 3 and experiment 4。6Conclusion：These results suggest that the effects of post-extinctionRSD on memory for fear extinction are complex。RSD impairs recal
16、l of fearextinction in hippocampus-independent tasks，but does not affect recall offear extinction in hippocampus-dependent tasks，and this effect is dependenton the time during which RSD is applied after extinction training。Our findingsfurther support the notion that REM sleep is involved in memory p
17、rocess ofcertain tasks。Fu Juan(Department of Physiology)Directed by Prof.Hu Bi and PhD.Tian ShaowenKey words：sleep deprivation ，fear extinction，hippocampus，context，freezing，rats7REM睡眠剥夺对大鼠恐惧消退再现的影响1.前言1.1 睡眠生理睡眠是人体最重要的周期性生理活动之一，人的一生将近有三分之一的时间在睡眠中度过，且每日需要保证适量的睡眠时间，可见睡眠对于机体的重要性。睡眠一旦被剥夺，则会对机体产生相应的生理和心理
18、影响，并会导致行为失常以及疾病的发生。有关睡眠的研究可以揭示睡眠的意义，从而为临床上相关疾病的防治提供新的方法。睡眠有两种时相：非快速眼动睡眠（non-rapid eye movement sleep,NREM，又称慢波睡眠，正相睡眠）和快速眼动睡眠（rapid eye movement sleep,REM，又称快波睡眠，异相睡眠）。NREM 睡眠时人体表现为一般熟知的睡眠状态，脑电图特征为同步化慢波，机体的体温和能耗降低，脑的能耗和神经元总体放电频率达日最低点，精神活动也降至日最低点，机体能够运动。NREM 睡眠的特征可表述为休闲的脑和可动的躯体；REM 睡眠的特征：脑电波表现为低幅快波，深
19、部体温下降，交感活动增强，脑的耗氧量增加，骨骼肌张力近乎完全丧失，出现快速眼球运动，其特征可概括为活跃的脑与瘫痪的躯体，做梦也是 REM 睡眠的特征。在整个睡眠过程中，REM 睡眠和 NREM睡眠相互转化。睡眠具有维持个体生存的功能：它可以促进生长发育，消除疲劳恢复体力，增强机体的免疫力等，另外睡眠还参与学习记忆过程。1.2 恐惧条件化与恐惧消退恐惧是植根于人心底的一种复杂的情绪，适当的恐惧可以帮助人们趋利避害，保护自己。但如果对常人不怕的事物感到恐惧，或者恐惧体验的强度和持续时间远远超出正常范围，则会给人们带来困扰，甚至出现焦虑症和恐惧症等神经官能症，严重影响人们的生活和工作。因此，阐明大脑
20、认知恐惧和消除恐惧的神经机制具有重要的理论意义和临床意义。截至目前,相对于条件化恐惧的获得、巩固与表达过程,对恐惧消退神经机制的研究尚处于起步阶段,许多问题有待阐明，近期对于这些问题的探讨已成为神经科学领域研究的热点之一。896 h RSD 导致大鼠在线索性任务和场景性任务中学习成绩降低 。在 C57BL/6 小鼠恐经典恐惧条件化是研究联合性学习的一种重要动物模型。其基本原理是中性刺激（如声、光刺激等）与厌恶性非条件化刺激(unconditioned stimulus,US)（如足部电击）通过配对训练，使中性刺激转化为条件化刺激（conditioned stimulus,CS)，从而获得厌恶性
21、强化特性即单独呈现 CS 也可以引起机体的恐惧反应。引起的恐惧反应称为条件化反应（conditioned response, CR）。按照 CS 的不同，可以分为线索性恐惧条件化和场景性恐惧条件化。条件化恐惧建立之后, 如果仅 CS 重复呈现而不呈现 US,则 CS 引起机体 CR 的能力将逐渐减弱甚至丧失，该过程即为条件化恐惧消退，简称恐惧消退。杏仁核与前额叶是恐惧消退涉及神经回路中最相关的两个脑区。杏仁核是脑中产生恐惧情绪，以及具有神经可塑性的情绪学习和恐惧记忆的主要部位。解剖上，前额叶有密集的兴奋性投射到达杏仁核；同时，杏仁核也有纤维投射至前额叶。前额叶与杏仁核间这种交互的纤维联系提示两
22、者在功能上紧密相关。杏仁核主要参与恐惧条件化，而恐惧消退则需要两者的同时参与。基于杏仁核与前额叶之间的纤维联系，很多研究推测恐惧消退是通过前额叶兴奋了杏仁核中的抑制性神经元来实现的。1.3 睡眠与学习记忆大量研究表明 REM 睡眠与 NREM 睡眠都参与了学习记忆过程1，而且睡眠对学习记忆的影响是复杂的，它取决于学习记忆任务类型，睡眠剥夺的时段，以及特定的学习关键期。在水迷宫实验中发现，给予隐藏平台的学习任务后立即对大鼠进行 REM睡眠剥夺（rapid eye movement sleep deprivation,RSD) 4 h 导致成绩下降，而在可见平台的学习任务后进行 RSD 成绩无变化
23、2。八臂迷宫任务学习后 4 h RSD 导致空间记忆下降，而对工作记忆无影响3。在恐惧条件化实验范式中，条件化训练前进行4惧条件化训练后立即进行 5 h 完全睡眠剥夺，结果显示小鼠场景性恐惧条件化的学习成绩降低，对线索性恐惧条件化的学习成绩没有影响5。然而，延时的 REM 睡眠剥夺或延时的完全睡眠剥夺对记忆的再现无影响2、3、5、6 。很多实验证明 REM 睡眠更倾向于在程序性记忆或涉及情感记忆的巩固中起作用710，而 NREM 睡眠则倾向于在外显性记忆的巩固中起作用 8、 11、 12 。9以前的研究已经证实恐惧消退不是对原有恐惧记忆的简单遗忘，而是一新的、主动的学习过程13，在某种程度上抑
24、制了恐惧行为的表达。解剖上，恐惧消退涉及皮层和皮层下的一些区域，前额叶（prefrontal cortex,PFC）与杏仁核是与之最相关的两个脑区14 17，海马在场景性依赖的恐惧消退中起到很重要的调节作用18。最近的研究表明：恐惧条件化以后立即进行 RSD 损害了线索性恐惧消退但对场景性任务没有影响19 ，而恐惧消退训练后 RSD 对于恐惧消退再现是否有影响还未见文献报道。本实验拟探讨在四种实验范式中 RSD 对恐惧消退再现的影响。102.材料与方法2.1 实验动物及分组清洁级成年雄性 SD（Sprague-Dawley ）大鼠 160 只，体重 275300 g，由南华大学实验动物学部提供
25、。在温度湿度一定的环境中单笼饲养，自由取食饮水，12 h光/暗循环，每天早上 7 点钟开灯。实验开始前一周每天逐一给予大鼠适当抚摸以使其适应实验人员。本实验严格按照美国国立卫生研究院（NIH）实验动物管理与使用条例（National Institutes of Health Guide for the Care and Use of LaboratoryAnimals）和南华大学实施的相应条例进行操作。在每个实验中 40 只大鼠被随机分为四组（每组 10 只）：0-6 h RSD 组与其对照组；6-12 h RSD 组与其对照组。2.2 行为装置实验场景包括两个：A 和 B，场景 A 由实验箱
26、 A 构成，场景 B 由实验箱 B 构成（如下页图，上海吉量公司提供）。实验箱 A(404050 cm)无顶，材料为黑色不透明的有机玻璃，且四壁上贴有直径为 5.5 cm 的白色圆形图案，间距为 3 cm。地板由 25根直径为 5 mm 的铜杆构成，每两铜杆中心间距为 1.5 cm，通过导线与电刺激器相连给予电击（US）。整个装置放置在更大的隔音柜（505060 cm）中。隔音柜的天花板上固定一小音箱给予声音刺激（CS），装有 15 W 的白炽灯提供照明；刺激的呈现由计算机程序控制。在每一只大鼠进行实验前用 5%的氢氧化铵溶液擦洗实验箱，并把盛有少量氢氧化铵溶液的不锈钢盘放在格子地板下以提供气
27、味。隔音柜内的风扇提供 65 dB 的背景噪声。实验箱 B 与实验箱 A 的不同之处在于四壁上贴有白色垂直竖条（宽 3 cm，间距 4.5 cm），地板铺有黑色平滑的塑胶垫，实验进行前用无水乙醇擦洗实验箱，并把盛有少量无水乙醇溶液的不锈钢盘放在格子地板下以提供气味，隔音柜内的风扇关掉，通过录制的电视噪音(65 dB)提供背景噪声，其他与实验箱 A 相同。11实验箱 A实验箱 B12。剥夺了 REM 睡眠，对 NREM 睡眠没有显著性影响2.3 REM睡眠剥夺RSD 利用经典的“小平台水环境法”（如下图）。睡眠剥夺装置由一个圆柱形塑料桶和一个圆形小平台组成。塑料桶上底直径 43 cm，下底直径
28、30 cm，高 46 cm，小平台高 16 cm，直径 10 cm，置于塑料桶中，加水至离平台水平面 1 cm，大鼠置于平台上，当进入 REM 睡眠时，由于骨骼肌的完全松弛使大鼠碰到水面或掉入水中而惊醒，造成 REM 睡眠的剥夺，RSD 后把大鼠放回鼠笼。以前的研究表明这种技术选择性20、21132.4 实验范式及程序：2.4.1 实验一：检测在 AAA 实验范式中 RSD 对恐惧消退再现的影响本实验采用 AAA 范式（恐惧条件化、恐惧消退训练、恐惧消退再现检测都在场景A 中进行），声音作为 CS，实验分为四个阶段。第一天是适应阶段，把大鼠从鼠笼取出放入实验箱 A，每只大鼠依次适应 30 mi
29、n。第二天进行恐惧条件化，把大鼠从鼠笼取出放入实验箱 A，3 min 后声音（4 kHz，80 dB ，持续 10 s）第一次呈现，与之配对的电击（0.4 mA, 持续 0.5 s）在声音结束前 0.5 s 呈现，与声音同时结束，给予每只大鼠 5 次这样的训练，相邻两次声音之间的平均间隔为 120 s（范围：90-150 s），最后一次训练 30 s 后把大鼠从实验箱拿出放回鼠笼。第三天是恐惧消退训练阶段，把大鼠从鼠笼取出放入实验箱 A，3 min 后声音（ 4 kHz，80 dB，持续 10 s）第一次呈现，无电击，呈现 10 次这样的声刺激，相邻两次声音之间的平均间隔为 120 s（范围：
30、90-150 s）。最后一次训练 30 s 后把大鼠从实验箱拿出，0-6 h RSD 组大鼠被立即放入睡眠剥夺装置进行 RSD，6 h 后取出放回鼠笼，若身上有水用毛巾擦干。恐惧消退训练后 6-12 h RSD 组和对照组大鼠被放回鼠笼，6 h 后把 6-12 h RSD 组大鼠从鼠笼取出放入睡眠剥夺装置进行 RSD，6 h 后取出放回鼠笼，若身上有水用毛巾擦干。第四天进行恐惧消退再现检测，把大鼠从鼠笼取出放入实验箱 A，3 min 后声音（4 kHz，80 dB，持续 10 s）第一次呈现，无电击，呈现 10 次这样的声刺激，相邻两次声音之间的平均间隔为 120 s（范围：90-150 s）
31、，最后一次训练 30 s 后把大鼠从实验箱拿出放回鼠笼。以前的研究证实，在这种实验范式中恐惧消退的再现过程是海马非依赖性的13、14、22。2.4.2 实验二：检测在 ABB 实验范式中 RSD 对恐惧消退再现的影响本实验采用 ABB 范式（恐惧条件化在场景 A 中进行，恐惧消退训练和恐惧消退再现检测在场景 B 中进行），声音作为 CS，实验分为四个阶段。第一天是适应阶段，把大鼠从鼠笼取出，每只大鼠依次分别适应实验箱 A 和实验箱 B 各 30 min。第二天进行恐惧条件化，把大鼠从鼠笼取出放入实验箱 A，3 min 后声音（4 kHz ，80 dB，持续 10 s）第一次呈现，与之配对的电击
32、（0.4 mA, 持续 0.5 s）在声音结束前 0.514s 呈现，与声音同时结束，给予每只大鼠 5 次这样的训练，相邻两次声音之间的平均间隔为 120 s（范围：90-150 s），最后一次训练 30 s 后把大鼠从实验箱拿出放回鼠笼。第三天是恐惧消退训练阶段，把大鼠从鼠笼取出放入实验箱 B，3 min 后声音（4 kHz，80 dB，持续 10 s）第一次呈现，无电击，呈现 10 次这样的声刺激，相邻两次声音之间的平均间隔为 120 s（范围：90-150 s）。最后一次训练 30 s 后把大鼠从实验箱拿出，0-6 h RSD 组大鼠被立即放入睡眠剥夺装置进行 RSD，6 h 后取出放回
33、鼠笼，若身上有水用毛巾擦干。恐惧消退训练后 6-12 h RSD 组和对照组大鼠被放回鼠笼，6 h 后把 6-12 h RSD 组大鼠从鼠笼取出放入睡眠剥夺装置进行 RSD，6 h后取出放回鼠笼，若身上有水用毛巾擦干。第四天进行恐惧消退再现检测，把大鼠从鼠笼取出放入实验箱 B，3 min 后声音（4 kHz，80 dB，持续 10 s）第一次呈现，无电击，呈现 10 次这样的声刺激，相邻两次声音之间的平均间隔为 120 s（范围：90-150s），最后一次训练 30 s 后把大鼠从实验箱拿出放回鼠笼。以前的研究证实，在这种实验范式中恐惧消退的再现过程是海马非依赖性的13、14、22 。2.4.
34、3 实验三：检测在 ABA 实验范式中 RSD 对恐惧消退再现的影响本实验采用 ABA 范式（恐惧条件化在场景 A 中进行，恐惧消退训练在场景 B 中进行，恐惧消退再现检测在场景 A 中进行），声音作为 CS，实验分为四个阶段。第一天是适应阶段，把大鼠从鼠笼取出，每只大鼠依次分别适应实验箱 A 和实验箱 B 各30 min。第二天进行恐惧条件化，把大鼠从鼠笼取出放入实验箱 A，3 min 后声音（4kHz，80 dB ，持续 10 s）第一次呈现，与之配对的电击（ 0.4 mA, 持续 0.5 s）在声音结束前 0.5 s 呈现，与声音同时结束，给予每只大鼠 5 次这样的训练，相邻两次声音之间
35、的平均间隔为 120 s（范围：90-150 s），最后一次训练 30 s 后把大鼠从实验箱拿出放回鼠笼。第三天是恐惧消退训练阶段，把大鼠从鼠笼取出放入实验箱 B，3 min 后声音（4 kHz，80 dB，持续 10 s）第一次呈现，无电击，呈现 10 次这样的声刺激，相邻两次声音之间的平均间隔为 120 s（范围： 90-150 s）。最后一次训练30 s 后把大鼠从实验箱拿出，0-6 h RSD 组大鼠被立即放入睡眠剥夺装置进行 RSD，6 h 后取出放回鼠笼，若身上有水用毛巾擦干。恐惧消退训练后 6-12 h RSD 组和对照组大鼠被放回鼠笼，6 h 后把 6-12 h RSD 组大鼠
36、从鼠笼取出放入睡眠剥夺装置进15行 RSD，6 h 后取出放回鼠笼，若身上有水用毛巾擦干。第四天进行恐惧消退再现检测，把大鼠从鼠笼取出放入实验箱 A，3 min 后声音（ 4 kHz，80 dB，持续 10 s）第一次呈现，无电击，呈现 10 次这样的声刺激，相邻两次声音之间的平均间隔为 120 s（范围：90-150 s），最后一次训练 30 s 后把大鼠从实验箱拿出放回鼠笼。以前的研究证实，在这种实验范式中恐惧消退的再现过程是海马依赖性的13、14、22 。2.4.4 实验四：检测在场景性任务中 RSD 对恐惧消退再现的影响本实验中场景作为 CS（恐惧条件化、恐惧消退训练、恐惧消退再现检测
37、都在场景 A 中进行），实验分为四个阶段。第一天是适应阶段，把大鼠从鼠笼取出放入实验箱 A，每只大鼠依次适应 30 min。第二天进行恐惧条件化，把大鼠从鼠笼取出放入实验箱 A，3 min 后第一次电击（0.4 mA, 持续 0.5 s）呈现，呈现 5 次这样的电刺激，相邻两次电击之间的平均间隔为 120 s（范围：90-150 s），最后一次训练 30 s 后把大鼠从实验箱拿出放回鼠笼。第三天是恐惧消退训练阶段，把大鼠从鼠笼取出放入实验箱 A，无任何刺激呈现，20 min 后把大鼠从实验箱拿出， 0-6 h RSD 组大鼠被立即放入睡眠剥夺装置进行 RSD，6 h 后取出放回鼠笼，若身上有水
38、用毛巾擦干。恐惧消退训练后 6-12 h RSD 组和对照组大鼠被放回鼠笼，6 h 后把 6-12 h RSD 组大鼠从鼠笼取出放入睡眠剥夺装置进行 RSD，6 h 后取出放回鼠笼，若身上有水用毛巾擦干。第四天进行恐惧消退再现检测，把大鼠从鼠笼取出放入实验箱 A，无任何刺激呈现，20 min 后把大鼠从实验箱取出放回鼠笼。以前的研究证实，在这种实验范式中恐惧消退的再现过程是海马依赖性的 13、14、22。162.5 数据分析：与以往的研究一致，我们采用僵直（freezing）作为恐惧行为的检测指标。僵直是啮齿类动物面对伤害性刺激时所特有的行为反应，其行为学表现为除呼吸相关运动外，动物处于静止状
39、态。通过实验录象用秒表记录恐惧条件化、恐惧消退训练以及消退再现检测阶段的僵直时间，计算僵直时间占检测时间的百分比。在实验一、实验二、和实验三中记录每次声音呈现时间内的僵直时间。实验四中，在恐惧条件化阶段，记录大鼠放入实验箱后每次电击呈现前时间内的僵直时间；在恐惧消退训练以及消退再现检测阶段，记录大鼠放入实验箱后前 10 分钟内每分钟的僵直时间。采用 Two-way RMANOVA (SigmaStat 3.1) 进行统计分析， Post hoc 检测采用 Tukey HSD 法，实验数据均采用均数标准误表示， P0.05 表示差异有显著性， P0.001 表示差异有极显著性。173.实验结果3
40、.1 实验一Two-way RM ANOVA 检测结果显示：在恐惧条件化阶段，0-6 h RSD 组与其对照组大鼠的僵直水平组间差异不显著（F (1,18)=0.0264，P0.05），但组内差异具有显著性（ F (4,72) =4.911，P 0.05），但组内差异显著（ F (4,72) =5.904，P0.05) (如图 1-3)。在恐惧条件化阶段，6-12 h RSD组与其对照组大鼠的僵直水平组间差异不显著（F (1,18)=0.0251 ，P 0.05），但组内差异具有显著性（F (4,72)=5.002， P0.05；F(4,72) = 5.335，P0.05；F (4,72)=3
41、.743，P0.05），但组内差异显著（F(4,72) =4.832，P 0.05），但组内差异显著（F (4,72)=11.690 ，P0.05) (如图 2-3)。在恐惧条件化阶段，6-12 h RSD 组与其对照组大鼠的僵直水平组间差异没有显著性（F (1,18)=0.0191，P 0.05），但组内差异显著（F(4,72) =4.561，P0.05；F (4,72) = 8.442，P0.05；F(4,72) =4.837，P0.05），但组内差异显著（F(4,72) =4.502，P 0.05），但组内差异显著（F (4,72) =7.087，P0.05)，组间与组内交互效应显著（F
42、(4,72) =2.543，P0.05），但组内差异显著（ F(4,72) =4.785， P0.05； F (4,72) = 8.754，P0.05；F (4,72)=7.636 ，P0.05），但组内差异有显著性（ F (4,72) =4.751，P 0.05），但组内差异显著（F (4,72)=17.087 ，P0.05) ，组间与组内交互效应不显著(如图 4-3)。在恐惧条件化阶段，6-12 h RSD 组与其对照组大鼠的僵直水平组间差异没有显著性（F (1,18) =0.0802，P 0.05），但组内差异有显著性（ F(4,72) =5.032，P0.05；F (4,72) = 8
43、.175，P0.05；F(4,72) =4.85， P0.01)，组间与组内交互效应不显著(如图 4-6)，表明 6-12 h RSD 组与对照组大鼠在两个阶段都表现为同等程度的消退。本实验结果显示：0-6 h RSD 与 6-12h RSD 对大鼠恐惧消退再现没有影响。30Freezing(%)Freezing(%)Fear Conditioning Phase100RSD806040200C1 2 3 4 5Trials图 4-1 0-6 h RSD 组与对照组大鼠在恐惧条件化阶段的僵直百分比RSD=REM 睡眠剥夺组(n=10)，C =对照组(n=10)，Freezing(%) =僵直时
44、间占检测时间的百分比，Trials=电击呈现次数Extinction Training Phase100RSD806040200C1 2 3 4 5Time Blocks图 4-2 0-6 h RSD 组与对照组大鼠在恐惧消退训练阶段的僵直百分比RSD=REM 睡眠剥夺组(n=10)，C=对照组(n=10)，Freezing(%)=僵直时间占检测时间的百分比，Times=检测时间段（一分钟作为一个 trial, 相邻两个 trial 合为一个 block）31Freezing(%)Freezing(%)Recall Test Phase10080 RSDC60402001 2 3 4 5Tim
45、e Blocks图 4-3 0-6 h RSD 组与对照组大鼠在消退再现检测阶段的僵直百分比RSD=REM 睡眠剥夺组(n=10)，C=对照组(n=10)，Freezing(%)=僵直时间占检测时间的百分比，Times=检测时间段（一分钟作为一个 trial, 相邻两个 trial 合为一个 block）Fear Conditioning Phase100RSD806040200C1 2 3 4 5Trials图 4-4 6-12 h RSD 组与对照组大鼠在恐惧条件化阶段的僵直百分比RSD=REM 睡眠剥夺组(n=10)，C=对照组(n=10)，Freezing(%)=僵直时间占检测时间的百
46、分比，Trials=电击呈现次数32Freezing(%)Freezing(%)Extinction Training Phase100806040200RSDC1 2 3 4 5Time Blocks图 4-5 6-12 h RSD 组与对照组大鼠在恐惧消退训练阶段的僵直百分比RSD=REM 睡眠剥夺组(n=10)，C=对照组(n=10)，Freezing(%)=僵直时间占检测时间的百分比，Times=检测时间段（一分钟作为一个 trial, 相邻两个 trial 合为一个 block）Recall Test Phase100RSD806040200C1 2 3 4 5Time Blocks图 4-6 6-12 h RSD 组与对照组大鼠在消退再现检测阶段的僵直百分比RSD=REM 睡眠剥夺组(n=10)，C=对照组(n=10)，Freezing(%)=僵直时间占检测时间的百分比，Times=检测时间段（一分钟作为一个 trial, 相邻两个 trial 合为一个 block）33
