1、白芍总苷微孔渗透泵片中芍药苷的含量测定【摘要】 目的 建立用 RP HPLC 法测定白芍总苷微孔渗透泵控释片中芍药苷含量的方法。方法 采用 Diamonsil C18 色谱柱(5 m,250 mm4.6 mm) ，以甲醇 水 磷酸（体积比 33670.2）为流动相，检测波长 230 nm。结果 芍药苷质量浓度在 20100 g/mL 范围内线性关系良好（r0.9995），平均加样回收率 100.6（n6）。结论 本法准确、简便、专属性强，可用于白芍 总苷微孔渗透泵控释片的质量控制。 【关键词】 高效液相色谱法 白芍总苷 芍药苷 微孔渗透泵控释片Abstract:Objective To est
2、ablish a RP HPL method for determination of paeoniflorin in controlled porosity osmotic pump tablets of total glucosides of paeony. Methods A Diamonsil C18 colum (5 m, 250 mm4.6 mm) was used by using methanol water phosphate(33670.2), as mobile phase. The detection wavelength was 230 nm. Results The
3、 linear range was 20100 g/mL (r=0.9995). Conclusion The method is convenient, accurate and specific, which could be used for the quality control of total glucosides of paeony controlled porosity osmotic pump tablets.Key words: paeoniflorin; total glucosides of paeony; controlled porosity osmotic pum
4、p tablets; HPLC白芍总苷（total glucosides of paeony ，TGP）为白芍干燥根中提取的有效成分1-2，芍药苷是其中的主要有效成分，占 总苷的 70以上。白芍总苷具有多种生理及药理作用，能多途径抑制自身免疫反应，对炎症免疫性疾病疗效很好，还具有保肝、止痛功效3-4 。市售白芍总苷胶囊主要用于治疗风湿性关节炎，系统性红斑狼疮，效果好，副作用小，但每日需服 23 次，每次 2 粒，长期使用剂量大，还具有腹泻的副作用。将白芍总苷制成 12 h 控制释放的微孔渗透泵控释片，可以减少病人服用剂量，降低副作用发生率，提高药物的安全性和稳定性，获得良好的治疗效果5。TGP
5、 微孔渗透泵控释片国内尚无报道，为有效的控制产品质量，本文用 RP HPLC 法测定该制剂中芍药苷的含量，本方法专属性强、准确、 简便。1 仪器与试药高效液相色谱仪：LC 10ATVP 泵，SPD 10AVP 紫外检测器（日本 SHIMADZU 公司）；色谱工作站：HW 2000 （南京千谱软件有限公司）。芍药苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号 110736-200527）；甲醇为色谱纯，水为超纯水；其他试剂均为分析纯；TGP 微孔渗透泵控释片（广东药学院药剂教研室提供，批号070622，070626，070627，规格 150 mg/片）。2 方法与结果2.1 色谱条件色谱柱：Diamo
6、nsiol C18 色谱柱（5 m,250 mm4.6 mm ）；流动相：甲醇 水 磷酸（体积比 33670.2）；流速：1 mLmin-1；温度：室温；检测波长：230 nm；进样量：10 L。2.2 溶液的制备2.2.1 对照品溶液称取经五氧化二磷减压干燥 24 h 的芍 药苷对照品 5 mg，精密称定，置 25 mL 量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。2.2.2 供试品溶液取本品 10 片，除去薄膜衣，精密称定，研 细，取约 0.1 g，精密称定，置 100 mL 量瓶中，加甲醇适量，超声处理 20 min，放冷，加甲醇至刻度，摇匀， 滤过，精密量取 续滤液 2 mL, 置 10 m
7、L 量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用 0.45 m 微孔滤膜滤过，取 续滤液，即得。2.2.3 阴性样品溶液按处方组成，取除白芍总苷外的其他成分，按工艺要求，制成不含白芍总苷得微孔渗透泵控释片，按“2.2.2”项下的要求操作，即得。2.3 系统适用性及专属性试验按“2.1”项下色谱 条件，取 对照品溶液，重复进样 6 次，RSD 为0.9，供试品溶液进样，芍药苷的保留时间约为 13 min，理论塔板数不低于 3 500，与最近峰的分离度为 3.3，拖尾因子 1.05，从图 1 可以看出，TGP 微孔渗透泵控释片和其他组分分离良好，且无阴性干扰，专属性好。图 1 空白辅料（A）、芍药苷对照品(B)
8、和白芍总苷(C)的色谱图（略）Fig.1 HPLC chromatograms of negative control (A), paeoniflorin standard substance (B) and total glucosides(C)2.4 线性关系考察取经五氧化二磷减压干燥 24 h 的芍药 苷对照品约 10 mg，精密称定，置 50 mL 量瓶中，用甲醇稀释至刻度，分别吸取1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL 于 10 mL 量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，配制浓度分别为 20，40，60，80，100 g/mL，按“2.1”项下的色谱条件，依次进样 10 L，测定峰
9、面 积，以峰面 积（A）为纵坐标，对照液质量浓度()为横坐 标绘制标准曲线，回归方程为 A1.2510-4-1.2567，r0.9995。结果表明在 20100 g/mL 范围内呈良好的线性关系。2.5 重复性试验 取同一批号 TGP 微孔渗透泵控释片，按“2.2.2”项下操作，配制平行样 6 份，每次进样 10 L测定，其峰面积 的 RSD 为 1.8。2.6 稳定性试验取供试品溶液，分别在 1，2，4，6，8，10，12 h 进样 10 L，得其峰面积的 RSD 为 1.7，表明供试品溶液在 12 h 内稳定。2.7 加样回收率试验取已知含量的 TGP 微孔渗透泵控释片细粉 6 份，分别加
10、入对照品适量， 按“2.2.2”项下方法处理后，依法测定，结果见表 1。2.8 样品的测定分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各 10 L, 依法测定，外标法计算 3 批 TGP 微孔渗透泵控释片（批号070622，070626，070627）含芍药苷的平均含量分别为（n3）48.26，49.36，47.96 mg/片。表 1 芍药苷回收率的实验结果（略）Tab.1 Recovery test of paeoniflorin平均回收率100.8, RSD 1.6%3 讨论 3.1 取对照品在 200400 nm 波长范围内进行扫描，结果显示芍药苷在 230 nm 处有最大吸收。3.2 在文献6-
11、7 基础上，考察了甲醇 水不同比例，甲醇 水冰醋酸（体积比 33670.2），甲醇 水 磷酸（体积比 33670.2）等多个流动相，结果表明：甲醇 水系统拖尾严重，柱效较低；加冰醋酸后有所改善，但重现性低；加磷酸后柱效高，重现性好，符合芍药苷分离度要求。3.3 试验结果表明，此方法精密度，重复性，稳定性及加样回收率结果均能满足分析要求,该方法简便、准确、专属性强，可用于白芍总苷微孔渗透泵控释片的质量控制。【参考文献】1 张晓燕，王金辉，李 铣.白芍的化学成分研究J. 沈阳药科大学学报，2001,18(1):30.2 张晓燕，李铣. 白芍的化学研究进展J. 沈阳药科大学学报，2002，19(1)
12、:70.3 魏伟，刘家骏，刘家琴，等 .白芍总昔对乙型肝炎的治疗作用及其前景J.中国药理学通报，2000,16(5):597.4 郭浩，魏伟，陈敏珠,等.白芍总苷对免疫调节细胞的作用J.中国 药理学与毒理学杂志，1993， 7(3):193.5 ZENTNER G M,RORK G S,HIMMELSTEIN K J.Controlled porosity osmotic pumpP:US，4968507.1990-07-28.6 徐康康,陈刚.HPLC 法测定正柴胡饮颗粒中芍药苷的含量J.江 苏药学与临床研究，2004,14(6):1331.7 王治平,樊化，杨珂,等.RP HPLC 法测定大败毒胶囊中芍药苷的含量J.药物分析杂志，2006,26(6):851.
