1、实验四 紫外分光光度法测定水中磺基水杨酸的含量一、实验目的1了解紫外分光光度计的基本结构。2学会正确使用和维护紫外分光光度计。3掌握紫外分光光度计的比色皿配套方法4. 学会磺基水杨酸吸收曲线的绘制和用标准曲线法测定其含量.二、实验原理磺基水杨酸为白色结晶或结晶性粉末,对光敏感,高温时分解成酚和水杨酸,遇微量铁时即变粉红色,易溶于水和乙醇,溶于乙醚。磺基水杨酸用途广泛:用于医药中间体,如生产强力霉素;染料工业,用于制造表面活性剂的中间体;有机合成工业,用于制造表面活性剂;润滑酯工业,用于添加剂;用作生化试剂、分析试剂及络合指示剂,如比色分析测定高铁离子等。磺基水杨酸对紫外光有特征吸收因此可根据朗
2、伯-比尔定律,采用标准曲线法测定其含量。本实验首先通过绘制磺基水杨酸的吸收曲线,确定其最大吸收波长 max,进而采用标准曲线法测定待测组分的含量。磺基水杨酸的分子结构三、仪器紫外分光光度计、1cm 石英比色皿、50ml 具塞比色管、吸量管、移液管四、试剂1、磺基水杨酸贮备液(2.000g/L):在分析天平上准确称取维生素 2g,用蒸馏水定容至 1000mL,混匀,即为 2.000g/L 的贮备液。(实验室已准备好)2、磺基水杨酸标准使用液(200mg/L):准确移取贮备液 10.00ml 于 100ml 容量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀。此溶液中磺基水杨酸的质量浓度为200mg/L。(学生配制)
3、五、测定步骤:1、磺基水杨酸吸收曲线的测定:取适量使用液,以水为参比,用 1cm 比色皿,在 220-400nm,每隔 5-10nm测定吸光度,绘制吸光度波长曲线,选择测量波长(max)。2、磺基水杨酸标准曲线的绘制:(1)分别移取磺基水杨酸的标准使用液0.00、1.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00ml 于 7 支 50ml 比色管中,定容至刻度,摇匀。(2)以纯水为参比,在 max 处测定标准系列磺基水杨酸溶液的吸光度。(3)以磺基水杨酸的质量(g)为横坐标、以校正后的吸光度 A 为纵坐标绘制标准曲线。3、试样中磺基水杨酸含量测定:移取待测水样溶液 5.00ml 于
4、50ml 比色管中,按绘制标准曲线的操作,测得水样的吸光度 A,由标准曲线查得相应的磺基水杨酸含量,计算出试样的磺基水杨酸的质量浓度。做平行样。4、数据记录:紫外光度计型号: 吸收波长 max: 比色皿类型: 比色皿校正值: 磺基水杨酸标准使用液(200mg/L) 水样比色管编号0 1 2 3 4 5 6 7 8移取的体积, mL0.00 1.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.00 5.00 5.0050mL 溶液含磺基水杨酸量,g吸光度校正值校正后吸光度5、数据处理及结果计算:以测得的标准系列的吸光度为纵坐标,相对应的 50mL 溶液磺基水杨酸含量(g)为横坐标绘制工作曲线。从工作曲线上查出所测水样吸光度对应的磺基水杨酸含量。水样中磺基水杨酸含量 x 以 mg/L 表示,按下式计算:mv式中:m工作曲线上查得的以 g 表示的磺基水杨酸含量;V移取水样的体积,mL。测定次数 1 2水样中磺基水杨酸含量,mg/L测定结果(算术平均值),mg/L平行测定结果的相对平均偏差%