1、,CFW处理对玉米大斑病菌生长发育的影响,答辩人： 张盼 指导老师：马文奇 教授谷守芹 教授 专业班级：环境科学0803班,目的与意义 材料与方法 结果与分析 结论与讨论 致谢,主要内容,目的与意义,玉米大斑病是玉米生产上的重要病害，危害十分严重，常造成严重的经济损失。,目前对玉米大斑病的防治主要是利用抗病品种并辅以药剂防治，但由于该病菌变异频繁，品种抗性丧失较快，所用的化学杀菌剂防治效果较差，施药困难。因此研究病菌的发育和致病机理，寻找病害防治的新策略、新方法具有重要意义。,研究发现，许多生物的生长发育均受到细胞信号转导途径的调控，如MAPK 、Ca2+及cAMP等信号转导途径。其中MAPK
2、级联途径在生物体内占有非常重要的地位。在玉米大斑病菌中存在HOG1、FUS3/KSS1、 Slt2 三条MAPK级联途径，其中Slt2 -MAPK途径又称为CWI -MAPK ，热胁迫、低渗胁迫、氧胁迫、细胞壁抑制剂等均可以激活该条途径。 CFW（Calcofluor white）即荧光增白剂为植物病原真菌Slt2-MAPK途径的特异性细胞壁抑制剂，常用于该条途径功能的研究。,本研究拟通过CFW处理玉米大斑病菌野生型菌株，观察其对病菌生长速度、菌落形态、菌丝形态、分生孢子产量的影响，进而初步明确玉米大斑病菌Slt2-MAPK级联途径的功能，为研究病菌生长发育和致病性的机制奠定基础。,1 供试菌
3、株玉米大斑病菌野生型菌株01-232 供试材料PDA培养基DMSO购自生工生物工程（上海）有限公司CFW（Calcofluor white）购自Sigma公司,材料与方法,3 实验步骤3.1 CFW的配制 3.2 CFW处理下病菌菌落形态的观察3.3 CFW对病菌菌丝生长影响的测定3.4 对突变菌株菌丝形态的显微观察3.5 CFW处理下病菌产孢量测定,结果与分析,1.CFW对病菌生长速度的影响,2.CFW对菌落形态的影响,3.CFW对菌丝形态的影响,4.CFW对病菌分生孢子产量的影响,结论与讨论,本实验用不同浓度的CFW对玉米大斑病菌进行处理，在此基础上研究CFW对病菌生长发育的影响： (1)
4、随着CFW浓度的升高，玉米大斑病菌的生长速率明显减小； (2)随着CFW浓度的升高，菌丝则更加致密，低矮，呈辐射状生长，菌落边缘的新生菌丝颜色较浅；,(3)随着CFW浓度的升高,菌丝细胞壁变薄，分隔不均匀，黑色素化程度低，且大部分菌丝干瘪，推测可能是由于细胞壁合成受阻从而细胞壁缺陷，部分内容物外泄所致； (4)当CFW处理之后，分生孢子产量下降，且随着CFW浓度的升高分生孢子的数目下降的程度越大。,在玉米大斑病菌中，Slt2 MAPK级联途径调控病菌的细胞壁发育，而细胞壁的成分一直被用作新型抗菌药物的靶标，因此细胞壁抑制剂对病菌影响机制研究，为新型杀真菌剂的研究奠定基础。 细胞壁抑制剂影响玉米大斑病菌的生长速度、菌丝形态、分生孢子产量。但至于其转导途径还未清楚，因此在下步试验中，要利用Western、 RT-PCR等试验手段来进一步研究CFW如何激活Slt2 MAPK级联途径。,致 谢,感谢马文奇教授和谷守芹教授的悉心指导！ 感谢各位老师莅临指导! 感谢各位师兄师姐以及一同实习的同学们的关心和照顾！,
