1、 中山大学博士学位论文CADASIL病人中SHP基因新SNP致其功能结构改变及意义的研究姓名：周桃峰申请学位级别：博士专业：神经病学指导教师：徐评议;Lee W.Van Eeden20100525甐发病绾卧缙谡锒虾透稍都值得我们深入研究。基因，因此我们首先来探讨膊蠸基因的功能是否受到影研究目的分析突变或多态性的功能构建质粒以及瞬时转染载体，测序验证目的片段序列完全盖形坏悖直鸾蚱窝强寺輂琗雙狥婧吮泶镌靥逯校齂泛素化分析将质粒啪，和与将质粒甋蛐，行免疫沉淀。再用裂解液将磁珠洗三遍。免疫沉淀蛋白的谷胱甘肽R泼窯对野生型及突变型进行分子动态模拟源性模型是基于与之有相似序列的超螺旋蛋琾捅彼替代，残基而实
2、现的。化，纯化回收样本设计引物进行扩增测序。统计分析由软件结合。中，可能因为样本量少，没有发现显著性差异。有待于我们进一步加大样本量进行槐溆隒关联性分析。中山大学博士学位论文：甐篜甃 ， 瑃 生； 猼瓸 甋 疭 ， 琀， 瑆，瑆本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。和纸质版，有权将学位论文用于非赢利目的的少量复制并允许论文进入学校图书馆、院系资料室被查阅，有权
3、将学位论文的内容编入有关数据库进行检索，可以采用复印、缩印或其他方法保存学位论文。日期尹扉臼妇言史多无高血压史。男女之间发病率无明显差异。早期可伴有偏头痛发作史，一般患者脑小血管和皮肤活检中存在特征性的颗粒性电子致密嗜锇物质琫琽它编码一个有氨基酸组成的跨膜蛋白受体。在细胞外的配体部分有个表皮生长因子样 ，馗葱蛄衃。而至今发现的可导致耐槐渚诒嗦隕间岷嫌颍然伺涮褰岷嫌中山大学博士学位论文成研究热点。具临床意义的徽甲躍的很小的一部分，却发挥着重要作用。医学界，亲子鉴定，以及受害者识别中得到广泛应用。临床医疗实践表明，药物的有效剂量有着极大的个体差异，可以视为一种基因的表型。药物目标的基因变异，会改变
4、药物与目标蛋白问的相互作用；负责运输药物的蛋白其基因变异，会影响药物的吸收、运送和排出；药物代谢酶的基重要作用。的功能，特别是发生在蛋白结构功能区域的绕渲匾猍。至于同义突变，因为没有出现明显的功能改变的分子机制，一般认为只是在遗传学上可能因基因启动子自然发生的蛭T黾幼B技钭覵亲合度，而上调环止惴捍嬖谟赟基因，态性衔猄基因突变会导致体重增加，并揭示其可能导致代谢疾病。艿鹘谇啻和砥谔悄虿蛋白中山大学博士学位论文和甘甈、甕和日本的研究不一样，在丹麦人群中进一步的研究。 琕琣琍泶铮俳赴錾拖赴饣食粱鳶能抑制降低明显。 疷 疷： ：。 一。！。一研究中我们在正常对照组及伴有或不伴有突变的病人中筛材料与方法
5、无钙镁磷酸盐缓冲溶 ，胀，扩增片段瓽 胀，扩增片段篠籘籆 簊一 高压灭菌蒸汽锅恒温磁力搅拌机测序仪 荧光素酶活性检测仪凝胶自动成像系统低温离心机鹿手术刀以及各式剪、镊、钳等手术器械，及一次性淦鳌湟浩鳌号实验方法 的碱，用去离子水溶解，考马斯亮蓝染色液，室温保存 脱色液，室温保存甘氨酸甘氨酸酥蠸 基因致其结构功能改变及其意义用去离子水溶解，盐酸调至，加去离子水定容至；獗找聚丙烯酰胺凝胶甋基因突变的筛选司合成，聚合酶链反应褂酶弑婷成分 掠我序列魑M槐浔榷圆握眨珼相对于起始密码腁。D褰蠷甈扩增。根据库 从逑抵惺褂酶弑婷。载体，测序验证目的片段序列完全正确。使用琗盖形坏下划线表示直鸾蚱窝强寺軯克隆至载体上。所有构建质粒均经过测序并质粒表达验证。由本实验菇槐湫蚐基因表达质粒野生型人虻膃直鹂寺罸和表达载狥： 。细胞系及传代培养活作用 浚籇瓼，活性用来标准化转染效率。、蚘甃等一些荧光素酶报告基剂盒说明书。转染质粒：蟾籉培养基培养理因素，继续培养约梁形狿公司产品。哺乳动物双杂交系统分析甃磇 】来自和位于被岵谢蔚淖B技钣，膜狿化，可同时用超声细胞破碎仪处理细胞，离一，
