1、ISO15189 质量管理体系范本文件(第三册)临检室作业指导书文件编号:ABCD-3-LJ-0150第 A 版编制: 审核: 批准: 生效日期:2006 年 8 月 8 日ABCD 人民医院检验科文件编号: ABCD人民医院检验科 临检室作业指导书版本/修订号:A/0生效日期:20060808 主题内容 目 录第 2 页 共 144 页目 录序号 主 题 内 容 代 号 页 号1 血红蛋白电泳检查(电泳法) ABCD-3-LJ-01 52 精液常规检查 ABCD-3-LJ-02 93 粪便常规检查(直接涂片法) ABCD-3-LJ-03 124 粪便潜血试验定性(纸片法) ABCD-3-LJ
2、-04 145 尿沉渣检查(UD-S 仪器法) ABCD-3-LJ-05 166 血疟原虫(MP)厚血片检查法 ABCD-3-LJ-06 217 血疟原虫(MP)薄血片检查法 ABCD-3-LJ-07 238 尿人绒毛膜促性腺激素定性 ABCD-3-LJ-08 259 阴道分泌物常规检查 ABCD-3-LJ-09 2710 一小时尿沉渣计数 ABCD-3-LJ-10 2911 Xt2000i红细胞计数 ABCD-3-LJ-11 3112 Xt2000i白细胞检验 ABCD-3-LJ-12 3313 Xt2000i白细胞分类计数 ABCD-3-LJ-13 3614 Xt2000i血红蛋白检测 A
3、BCD-3-LJ-14 3915 全血血细胞沉降率测定 ABCD-3-LJ-15 4116 Xt2000i红细胞比积的测定 ABCD-3-LJ-16 4317 Xt2000i平均红细胞体积检测 ABCD-3-LJ-17 4618 Xt2000i血小板(PLT)测定 ABCD-3-LJ-18 4819 红细胞平均血红蛋白含量测定 ABCD-3-LJ-19 5120 红细胞平均血红蛋白浓度测定 ABCD-3-LJ-20 5321 尿液酸碱度测定(干法学法) ABCD-3-LJ-21 5522 尿葡萄糖定性实验(干化学法) ABCD-3-LJ-22 5823 尿蛋白定性测定(干法学法) ABCD-3
4、-LJ-23 6124 尿血红蛋白测定(干化学法) ABCD-3-LJ-24 64文件编号: ABCD人民医院检验科 临检室作业指导书版本/修订号:A/0生效日期:20060808 主题内容 目 录第 3 页 共 144 页25 尿胆原定性测定(干法学法) ABCD-3-LJ-25 6726 脑脊液蛋白定性试验(潘氏法) ABCD-3-LJ-26 7027 脑脊液外观检查(目测法) ABCD-3-LJ-27 7328 脑脊液有形成分检查(显微镜法) ABCD-3-LJ-28 7529 尿亚硝酸盐定性测定(干法学法 ABCD-3-LJ-29 7930 凝血酶原时间(PT)测定 ABCD-3-LJ
5、-30 8131 活化部分凝血活酶时间测定 ABCD-3-LJ-31 8532 凝血酶时间(TT)测定 ABCD-3-LJ-32 8933 血浆纤维蛋白原(Fbg)测定 ABCD-3-LJ-33 9334 骨髓巨核细胞计数 ABCD-3-LJ-34 9735 过氧化物酶染色(Washburn 法) ABCD-3-LJ-35 9936 糖原染色(Schiff 法) ABCD-3-LJ-36 10137 中性粒细胞碱性磷酸酶染色 ABCD-3-LJ-37 10338 尿微量白蛋白定量 ABCD-3-LJ-38 10539 全血 C-反应蛋白定量 ABCD-3-LJ-39 11040 尿乳糜定性检查
6、 ABCD-3-LJ-40 11441 前列腺液常规检查(玻片法) ABCD-3-LJ-41 11642 血浆硫酸鱼精蛋白副凝固时间 ABCD-3-LJ-42 11743 异常白细胞检查(显微镜法) ABCD-3-LJ-43 11944 异常红细胞检查(显微镜法) ABCD-3-LJ-44 12345 浆膜腔积液粘蛋白定性检查 ABCD-3-LJ-45 12846 浆膜腔积液化学检查 ABCD-3-LJ-46 13147 浆膜腔积液外观检查(目测法) ABCD-3-LJ-47 13448 浆膜腔积液有形成分检查 ABCD-3-LJ-48 13649 血球分析仪操作维护规程 ABCD-3-LJ-
7、49 13950 血球分析仪操作手册 ABCD-3-LJ-50 143文件编号:ABCD-3-LJ-01 ABCD人民医院检验科 临检室作业指导书版本/修订号:A/0生效日期:20060808 主题内容 血红蛋白电泳检查第 4 页 共 144 页修 订 页序号 文件编号 页码 需更改的内容 更改内容 批准人 批准日期123456789101112131415161718192021文件编号:ABCD-3-LJ-01 ABCD人民医院检验科 临检室作业指导书版本/修订号:A/0生效日期:20060808 主题内容 血红蛋白电泳检查第 5 页 共 144 页血 红 蛋 白 电 泳 检 查 ( 电
8、泳 法 )1. 原 理血 红 蛋 白 是 由 两 对 多 肽 链 组 成 的 复 杂 分 子 。 每 一 条 链 含 有 血 红 素 和 络 合 铁 原 子 的 卜 啉 。所 有 血 红 蛋 白 的 血 红 素 部 分 都 是 相 同 的 。 所 测 定 的 血 红 蛋 白 的 蛋 白 部 分 称 之 为 珠 蛋 白 。 正常 人 血 红 蛋 白 多 肽 链 包 括 、 、 和 。 血 红 蛋 白 的 结 构 、 分 子 特 性 取 决 于 形 成 其肽 链 的 氨 基 酸 顺 序 和 性 状 。 氨 基 酸 不 同 可 形 成 不 同 的 血 红 蛋 白 , 其 表 面 电 荷 不 同 ,
9、在 电 场中 的 泳 动 率 不 同 。 本 实 验 在 碱 性 ( PH=8.60) 条 件 下 , 以 琼 脂 糖 凝 胶 电 泳 的 方 法 进 行 ,对 红 细 胞 洗 涤 后 造 成 溶 血 , 电 泳 分 离 血 红 蛋 白 后 以 氨 基 黑 染 色 。 多 余 的 染 色 液 用 酸 性 液 体洗 去 。 待 琼 脂 糖 凝 胶 板 干 燥 后 , 肉 眼 可 直 接 判 别 有 无 电 泳 条 带 异 常 。 运 用 光 密 度 扫 描 仪 检测 准 确 定 量 分 析 电 泳 条 带 异 常 情 况 。 血 红 蛋 白 异 常 有 二 种 类 型 : 血 红 蛋 白 性 质
10、 或 结 构 的 异常 称 之 为 血 红 蛋 白 病 。 血 红 蛋 白 中 的 一 条 链 合 成 减 少 引 起 血 红 蛋 白 性 质 异 常 , 称 之 为 地 中海 贫 血 。2. 标 本 采 集2.1 标 本 采 集 前 病 人 准 备 : 受 检 者 应 空 腹 。2.2 标 本 种 类 : 抗 凝 血2.3 标 本 要 求 : 抗 凝 剂 选 用 EDTA, 柠 檬 酸 或 肝 素 均 可 , 避 免 碘 乙 酸 。 常 规 静 脉 采 血1.8ml, 加 入 含 有 109mmol/L 枸 橼 酸 钠 溶 液 0.2ml 的 干 燥 。 清 洁 试 管 中 , 充 分 混
11、匀 。4. 标 本 储 存 : 储 存 于 2-8 冰 箱 中 , 5 天 。5. 标 本 运 输 : 储 存 于 2-8 状 态 下 的 冰 壶 或 泡 沫 箱 密 封 运 输 。6. 标 本 拒 收 标 准 : 细 菌 污 染 、 溶 血 或 脂 血 标 本 不 能 作 测 定 。7. 试 剂7.1 试 剂 名 称 : 血 红 蛋 白 电 泳 检 查 试 剂7.2 试 剂 生 产 厂 家 : 法 国 Sebia 公 司7.3 包 装 规 格 : 150tests7.4 试 剂 盒 组 成琼 脂 糖 凝 胶 10 块 溶 血 素 1 瓶缓 冲 液 条 带 10 包 2 条 薄 滤 纸 110
12、 张氨 基 黑 ( 浓 缩 液 ) 1 瓶 100ml 点 样 模 具 滤 纸 10 条 1 盒7.5 试 剂 储 存 条 件 及 有 效 期 : 贮 存 于 室 温 ( 15 30 ) 或 冰 箱 ( 2 8 ) , 不 能 冷冻 。 有 效 期 两 年 。文件编号:ABCD-3-LJ-01 ABCD人民医院检验科 临检室作业指导书版本/修订号:A/0生效日期:20060808 主题内容 血红蛋白电泳检查第 6 页 共 144 页8. 仪 器 设 备8.1 仪 器 名 称 : SEBIA 电 泳 仪8.2 仪 器 厂 家 : 法 国 Sebia 公 司8.3 仪 器 型 号 : HYDRAS
13、YS9. 操 作 步 骤9.1 血 红 蛋 白 液 制 作 : 抗 凝 血 离 心 , 5000rpm, 5 分 钟 , 去 掉 血 浆 , 用 10 倍 体 积 的生 理 盐 水 洗 涤 红 细 胞 3 次 , 若 红 细 胞 体 积 小 于 10ul, 需 特 别 小 心 。 取 10ul 红 细 胞加 入 130ul 溶 血 液 造 成 溶 血 。 震 荡 混 匀 10 秒 钟 , 室 温 下 培 育 5 分 钟 待 测 。9.2 启 动 电 泳 仪9.3 将 加 样 器 放 在 一 平 板 上 , 有 数 字 的 一 端 向 上 。 各 加 样 孔 加 入 10ul 溶 血 的 样 品
14、 ,2 分 钟 内 加 样 完 毕 。 将 加 样 器 放 入 保 湿 盒 内 , 齿 端 向 上 ( 转 运 时 用 塑 料 齿 保 护 架 ) 。等 待 5 分 钟 , 使 样 品 扩 散 至 齿 端 。 打 开 电 泳 仪 盖 , 抬 起 电 极 和 加 样 器 支 架 。9.4 使 用 HYDRAGEL 15 HEMOGLOBINCE 时 选 择 仪 器 的 “HBTOTAL”程 序 ( 位 于 链 盘 左侧 ) 。9.5 从 包 装 袋 内 取 出 缓 冲 条 , 拿 出 末 端 的 塑 料 片 , 将 缓 冲 条 两 端 塑 料 片 固 定 在 电 极 支 架背 侧 的 钉 上 ,
15、 塑 料 片 应 紧 贴 支 架 。9.6 取 出 凝 胶 板 。 将 薄 的 滤 纸 轻 轻 吸 去 凝 胶 板 表 面 的 多 余 液 体 , 然 后 立 即 丢 弃 滤 纸 。 在电 泳 仪 温 度 控 制 板 表 面 的 边 线 内 加 200ul 蒸 馏 水 或 去 离 子 水 。 凝 胶 面 朝 上 , 放 置 凝 胶板 , 边 缘 对 齐 边 线 。 略 略 将 凝 胶 弯 曲 , 然 后 放 平 , 使 水 均 匀 分 布 在 凝 胶 板 下 面 而 不 含 气 泡 。9.7 降 低 支 架 , 使 缓 冲 条 不 接 触 到 凝 胶 板 。9.8 从 保 温 盒 里 取 出
16、加 样 器 。 取 时 拿 保 护 框 。 折 断 加 样 器 齿 端 保 护 框 。 将 加 样 器 放 在 4 号位 置 。9.9 关 上 电 泳 仪 盖 子 , 按 下 键 盘 左 侧 的 绿 色 箭 头 “START”键 , 电 泳 开 始 。9.10 凝 胶 染 色 扫 描9.10.1 打 开 盖 子9.10.2 取 出 并 丢 弃 加 样 器9.10.3 升 高 两 个 支 架 , 握 住 塑 料 端 取 出 并 丢 弃 缓 冲 条 。9.10.4 打 开 凝 胶 托 架 , 平 放 , 将 干 燥 的 凝 胶 片 放 入 两 层 间 , 然 后 关 上 托 架 。9.10.5 将
17、 凝 胶 支 架 放 入 染 色 池9.10.6 取 出 凝 胶 支 架 , 打 开 盖 子 , 取 出 干 燥 的 凝 胶 片 。9.10.7 在 光 密 度 仪 的 570nm 处 或 以 黄 色 滤 光 片 扫 描 测 定 。 使 用 HYDRYS, DVSE 或文件编号:ABCD-3-LJ-01 ABCD人民医院检验科 临检室作业指导书版本/修订号:A/0生效日期:20060808 主题内容 血红蛋白电泳检查第 7 页 共 144 页PREFERENCE 光 密 度 仪 时 , 使 A2 片 段 的 标 记 置 于 扫 描 板 5mm 的 标 志 处 。10. 结 果 判 断 与 参
18、考 范 围扫 描 得 到 的 只 是 每 种 血 红 蛋 白 条 带 的 相 对 浓 度 值 。 取 出 胶 片 后 , 首 先 清 洁 胶 片 的 背 面 。判 断 溶 血 液 的 浓 度 是 否 合 适 , 主 要 看 基 质 带 的 浓 度 , 如 基 质 带 浓 度 过 淡 , 说 明 溶 血 液 的 浓度 太 淡 。 正 常 时 A2 浓 度 大 约 为 基 质 带 浓 度 的 1-2 倍 。半 岁 -成 人 :HbA 94.5 ,HbF 2.0 ,HbA2 3.51 个 月 : HbA 12-40 ,HbF 60-93 ,HbA2 0.1-1.06 个 月 : HbA 86-98
19、,HbF 0.84-10.7 ,HbA2 0.87-2.9脐 带 血 : HbA 4-40 ,HbF 30-96 ,HbA2 1.011. 质 量 控 制建 议 测 定 每 一 批 样 本 时 都 附 有 一 控 制 品 或 含 有 血 红 蛋 白 A,F,C 和 S 的 血 样 本 。12. 临 床 意 义12.1 检 测 -地 中 海 贫 血12.1.1 轻 型 : HbA2 轻 度 升 高 , 大 多 在 4 -812.1.2 中 间 型 : HbA1A2 缺 如 , HbF 可 达 1012.1.3 重 型 : HbF: 30 -90 , HbA 多 低 于 40 或 甚 至 012.
20、2 检 测 -地 中 海 贫 血12.2.1 标 准 型 -地 中 海 贫 血 : 新 生 儿 期 HbBart s 可 达 5 -15 , 几 个 月 后 消 失 。经 煌 焦 油 蓝 温 育 后 , 少 数 红 细 胞 内 有 H 包 涵 体 。 血 红 蛋 白 电 泳 无 异 常 发 现 。12.2.2 血 红 蛋 白 H 病 : HbH 在 PH8.6 或 8.8 电 泳 时 , 向 阳 极 方 向 移 动 , 泳 速 快 于HbA;在 PH6.5 电 泳 时 , 仍 向 阳 极 方 向 移 动 。12.2.3 血 红 蛋 白 Bart 胎 儿 水 肿 综 合 症 : Hb Bart
21、s 占 80 -100 , 可 有 少 量HbH。 HbA、 A2 及 F 均 缺 如 。12.3 检 测 血 红 蛋 白 病 : 引 起 临 床 注 意 的 异 常 血 红 蛋 白 有 四 种 : S, C, E 和 D。12.3.1 血 红 蛋 白 S: 在 碱 性 缓 冲 条 件 下 血 红 蛋 白 S 的 条 带 位 于 A 和 A2 片 段 之 间12.3.2 血 红 蛋 白 C: 在 碱 性 缓 冲 条 件 下 血 红 蛋 白 C, E 和 A2 的 条 带 重 叠 在 一 起 。 若这 一 片 段 15 , 应 怀 疑 有 血 红 蛋 白 C 或 E 的 异 常 。12.3.3
22、血 红 蛋 白 E: 与 血 红 蛋 白 C 不 同 的 是 , E 在 酸 性 凝 胶 电 泳 中 不 与 A2 分 离 。12.3.4 血 红 蛋 白 D: 在 碱 性 缓 冲 条 件 下 , 血 红 蛋 白 D 和 S 的 条 带 重 叠 在 一 起 , 但D 在 酸 性 凝 胶 电 泳 中 不 与 A2 分 离 。13. 操 作 性 能 : 灵 敏 度 高 、 特 异 性 强 、 操 作 简 便 , 重 复 性 好 。14. 注 意 事 项 :文件编号:ABCD-3-LJ-01 ABCD人民医院检验科 临检室作业指导书版本/修订号:A/0生效日期:20060808 主题内容 血红蛋白电
23、泳检查第 8 页 共 144 页14.1 试 剂 贮 存 于 室 温 ( 15 30 ) 或 冰 箱 ( 2 8 ) 内 , 不 能 冷 冻 。14.2 不 要 应 用 溶 血 标 本14.3 若 检 测 到 异 常 血 红 蛋 白 , 而 又 与 常 见 的 异 常 血 红 蛋 白 S,C,D 或 E 不 同 , 可 使用 其 他 方 法 ( 如 球 蛋 白 链 电 泳 ) 检 测 , 或 求 助 于 有 关 专 门 实 验 室 。14.4 HbF 小 于 全 部 血 红 蛋 白 的 2 -3 时 , 扫 描 检 测 HbF( 或 其 它 一 些 较 少 见 的 血 红蛋 白 ) 只 是 半
24、 定 量 的 , 结 果 不 十 分 准 确 。14.5 对 于 中 度 或 重 度 贫 血 的 病 例 , 点 样 量 应 增 大 为 15ul 或 20ul, 其 结 果 不 受 影 响 。14.6 电 泳 过 程 中 不 能 打 开 盖 子 。 在 染 色 脱 色 以 及 干 燥 过 程 中 , 仪 器 的 一 些 程 序 处 于 锁 定状 态 。14.7 最 后 染 色 后 立 即 扫 描 测 定 。 若 欲 保 存 , 可 用 一 保 护 物 覆 盖 后 置 于 干 燥 、 暗 处 , 避 免受 热 , 可 保 存 约 3 个 月 。文件编号:ABCD-3-LJ-02 ABCD人民医
25、院检验科 临检室作业指导书版本/修订号:A/0生效日期:20060808 主题内容 精液常规检查第 9 页 共 144 页精 液 常 规 检 查1. 实 验 原 理纪 录 精 液 量 、 颜 色 、 透 明 度 、 粘 稠 度 和 是 否 液 化 。 显 微 镜 检 查 包 括 精 子 计 数 、 活 动 力 、活 动 率 、 形 态 。2. 标 本 采 集2.1 标 本 采 集 前 病 人 准 备 : 必 须 禁 欲 ( 包 括 遗 精 和 手 淫 ) 3 7 天 。 这 是 因 为 少 于48 小 时 采 取 的 精 液 , 因 相 距 时 间 太 短 , 精 液 中 精 子 的 数 量
26、可 能 偏 少 , 容 易 造 成 少 精 症 的假 象 。 如 果 超 过 7 天 , 精 子 活 率 、 活 力 都 有 所 下 降 , 也 可 造 成 弱 精 子 症 的 假 象 。 精 液 检查 应 间 隔 一 周 或 两 周 , 要 进 行 2 3 次 检 查 。 因 为 一 个 人 精 子 的 产 生 在 一 年 中 , 可 因 季节 、 气 候 等 ,诸 多 因 素 的 影 响 而 有 一 些 变 化 。2.2 标 本 种 类 : 精 液 2.3 标 本 要 求 : 用 清 洁 干 燥 小 瓶 收 集 , 不 应 采 用 避 孕 套 内 精 液 。3. 标 本 储 存 : 立 即
27、 送 检 。4. 标 本 运 输 : 室 温 运 输 , 冬 季 需 保 温 运 输 。5. 标 本 拒 收 标 准 : 久 置 标 本 , 污 染 标 本 , 避 孕 套 内 标 本 。6. 操 作 步 骤7.1 纪 录 精 液 量 、 颜 色 、 透 明 度 、 粘 稠 度 和 液 化 时 间 。7.2 精 子 活 动 率 : 取 新 鲜 标 本 混 匀 后 , 在 温 玻 片 上 用 高 倍 镜 观 察 100 个 精 子 , 计 数活 动 精 子 与 不 活 动 精 子 的 比 例 , 计 算 精 子 活 动 的 百 分 率 。精 子 活 动 率 =活 动 精 子 数 /( 活 动 精
28、 子 数 +不 活 动 精 子 数 ) 100%7.3 取 上 述 新 鲜 湿 片 标 本 , 观 察 精 子 的 活 动 力 , 可 按 下 列 五 级 报 告 :0 级 : 精 子 完 全 不 活 动 , 加 温 后 仍 不 活 动 ;I 级 : 精 子 运 动 不 良 , 运 动 迟 缓 , 原 地 打 转 或 抖 动 , 向 前 运 动 能 力 差 ;II 级 : 精 子 活 动 较 好 , 运 动 速 度 尚 可 , 游 动 方 向 不 定 , 呈 直 线 或 非 直 线 运 动 , 带 有回 旋 ;III 级 : 为 中 速 运 动 ;IV 级 : 精 子 活 动 好 , 快 速
29、直 线 运 动 , 很 快 超 越 一 个 视 野 , 活 泼 有 力 。7.4 精 子 计 数 :7.4.1 于 试 管 内 加 精 子 稀 释 液 0.38ml, 吸 液 化 精 液 20l, 加 入 稀 释 液 内 摇 匀 。7.4.2 充 分 摇 匀 后 , 滴 入 血 细 胞 计 数 池 内 , 静 置 1-2min, 待 精 子 下 沉 后 , 以 精 子 头文件编号:ABCD-3-LJ-02 ABCD人民医院检验科 临检室作业指导书版本/修订号:A/0生效日期:20060808 主题内容 精液常规检查第 10 页 共 144 页部 作 为 基 准 进 行 计 数 。7.4.3 如
30、 精 子 数 少 , 可 计 数 两 个 大 方 格 内 精 子 数 , 总 数 乘 以 10 万 即 为 每 毫 升 精 液 内精 子 数 , 再 换 算 成 109/L 报 告 。7.4.4 如 精 子 数 多 , 可 计 数 5 个 中 方 格 内 精 子 数 , 总 数 乘 以 100 万 即 为 每 毫 升 精 液内 精 子 数 , 再 换 算 成 109/L 报 告 。7.5 精 子 形 态 观 察 : 革 兰 氏 或 瑞 氏 染 色 后 用 油 镜 观 察 。 异 常 精 子 可 有 : 头 部 过 大 、 过 小 、尖 细 、 外 缘 不 齐 、 双 头 等 ; 中 部 消 失
31、 、 分 枝 或 肿 胀 ; 尾 部 呈 双 尾 , 卷 曲 度 短 或 消 失 ( 缺 尾 )。7.6 细 胞 : 红 、 白 细 胞 40 的 精 子 活 动 不 良 , 常是 导 致 男 性 不 育 的 重 要 原 因 。 精 子 活 动 力 低 , 主 要 见 于 精 索 静 脉 曲 张 、 泌 尿 生 殖 系 统 非 特异 性 感 染 , 应 用 某 些 药 物 如 抗 疟 药 、 雄 激 素 等 所 致 。8.2.3 精 子 计 数 : 正 常 人 精 子 计 数 为 10 130109/L, 相 当 于 一 次 排 出 的 精 子 总 数 为400106 600106。 当 精
32、子 计 数 值 20 , 将 会 导 致 不 育 , 可 能 是 由 于 精 索 静 脉 曲 张 、 血 液 中 有 毒 代 谢 产 物 、 铅污 染 等 或 应 用 大 剂 量 放 射 线 及 使 用 细 胞 毒 性 药 物 导 致 的 精 子 形 态 异 常 。 如 果 精 液 中 发 现 1 的 病 理 性 未 成 熟 细 胞 , 包 括 精 原 细 胞 、 精 母 细 胞 和 发 育 不 完 全 的 精 细 胞 , 提 示 睾 丸 的曲 细 精 管 的 生 精 功 能 受 到 药 物 或 其 他 因 素 影 响 或 损 伤 。 如 果 精 子 凝 集 10 , 提 示生 殖 道 感 染
33、 或 免 疫 功 能 异 常 。9. 注 意 事 项9.1 出 现 一 次 异 常 结 果 , 应 隔 一 周 后 复 查 , 反 复 查 2-3 次 才 能 得 出 比 较 正 确 的 结 果 。9.2 如 低 倍 镜 、 高 倍 镜 检 查 均 无 精 子 , 应 将 精 液 离 心 沉 淀 后 再 涂 片 检 查 , 如 两 次 均 无 精子 , 报 告 “无 精 子 ”。10. 操 作 性 能 : 快 速 简 便11. 方 法 局 限 性 : 易 受 人 为 主 观 经 验 不 足 影 响 结 果 判 断 。12. 参 考 文 献中 国 人 民 共 和 国 卫 生 部 医 政 司 编
34、.全 国 临 床 检 验 操 作 规 程 ( 第 二 版 ) .1997,149-150文件编号:ABCD-3-LJ-03 ABCD人民医院检验科 临检室作业指导书版本/修订号:A/0生效日期:20060808 主题内容 粪 便 常 规 检 查第 12 页 共 144 页粪 便 常 规 检 查 ( 直 接 涂 片 法 )1. 实 验 原 理 : 本 实 验 是 利 用 肉 眼 观 察 粪 便 的 颜 色 和 性 状 , 以 及 利 用 粪 便 生 理 盐 水 涂 片在 显 微 镜 下 观 察 涂 片 中 是 否 有 虫 卵 、 幼 虫 、 各 种 细 胞 、 包 囊 、 结 晶 等 。2. 标
35、 本 采 集2.1 标 本 采 集 前 病 人 准 备 : 无 须 特 殊 准 备 。2.2 标 本 种 类 : 粪 便 2.3 标 本 要 求 : 标 本 应 取 自 粪 便 的 不 同 部 位 特 别 是 病 理 性 改 变 比 较 明 显 的 部 位 。3. 标 本 储 存 : 粪 便 应 取 指 头 大 小 存 放 于 干 燥 、 清 洁 、 无 吸 水 性 的 容 器 内 。 粪 便 的 容 器必 须 有 盖 且 有 明 显 的 标 记 。4. 标 本 运 输 : 室 温 运 输 。5. 标 本 拒 收 标 准 : 尿 液 、 植 物 、 泥 土 、 污 水 等 污 染 标 本 ;
36、干 结 粪 便6. 操 作 步 骤6.1 肉 眼 观 察 粪 的 颜 色 、 性 状 。6.2 再 用 竹 片 搜 集 少 量 不 同 部 位 的 粪 便 标 本 , 涂 抹 于 滴 有 一 滴 生 理 盐 水 的 洁 净 玻 片 上 。6.3 盖 上 盖 玻 片 , 涂 片 的 厚 度 以 能 透 过 印 刷 物 字 迹 为 准 。6.4 先 在 低 倍 镜 下 观 察 有 无 包 囊 、 虫 卵 、 幼 虫 等 , 再 在 高 倍 镜 下 观 察 有 无 红 细 胞 、 白 细胞 、 各 种 结 晶 , 并 观 察 粪 便 中 的 菌 群 分 布 。7. 结 果 判 断 与 分 析7.1
37、粪 便 颜 色 根 据 观 察 所 见 报 告 , 如 黄 色 、 褐 色 、 土 灰 色 、 绿 色 、 红 色 、 柏 油 样 等 。 正常 粪 便 因 粪 胆 素 而 呈 棕 黄 色 , 但 可 因 饮 食 、 药 物 或 病 理 原 因 影 响 而 改 变 粪 便 颜 色 : 灰 白 色见 于 钡 餐 后 、 服 硅 酸 铝 、 阻 塞 性 黄 疸 、 胆 汁 减 少 或 缺 乏 ; 绿 色 见 于 食 用 含 叶 绿 素 的 蔬 菜 后及 含 胆 绿 素 时 ; 红 色 见 于 下 消 化 道 出 血 、 食 用 西 红 柿 、 西 瓜 等 ; 柏 油 样 便 见 于 上 消 化 道
38、 出血 等 。 酱 色 常 见 于 阿 米 巴 痢 疾 、 食 用 大 量 咖 啡 、 巧 克 力 等 ; 米 泔 水 样 见 于 霍 乱 。7.2 性 状 可 报 告 为 软 、 硬 、 糊 状 、 泡 沫 状 、 稀 汁 样 、 血 水 样 、 血 样 、 粘 液 血 样 、 粘 液 脓样 、 有 不 消 化 食 物 等 。 正 常 时 为 有 形 软 便 。7.2.1 球 形 硬 便 : : 便 秘 时 可 见 。7.2.2 粘 液 稀 便 : 见 于 肠 壁 受 刺 激 或 发 炎 时 , 如 肠 炎 、 痢 疾 和 急 性 血 吸 虫 病 等 。7.2.3 粘 液 脓 性 血 便 :
39、 多 见 于 细 菌 性 痢 疾 。7.2.4 酱 色 粘 液 ( 可 带 脓 ) 便 : 多 见 于 阿 米 巴 痢 疾 。文件编号:ABCD-3-LJ-03 ABCD人民医院检验科 临检室作业指导书版本/修订号:A/0生效日期:20060808 主题内容 粪 便 常 规 检 查第 13 页 共 144 页7.2.5 稀 汁 样 便 : 可 见 于 急 性 肠 胃 炎 , 大 量 时 见 于 伪 膜 性 肠 炎 及 了 隐 孢 子 虫 感 染 。7.2.6 米 泔 样 便 并 有 大 量 肠 粘 膜 脱 落 , 见 于 霍 乱 等 。7.2.7 扁 平 带 状 便 : 可 能 因 直 肠 或
40、 肛 门 狭 窄 所 致 。7.3 蛔 虫 、 蛲 虫 、 绦 虫 节 片 等 较 大 虫 体 , 肉 眼 即 可 分 辩 。 钩 虫 虫 体 常 需 将 粪 便 冲 洗 过 筛后 方 可 看 到 。 服 驱 虫 剂 后 排 便 时 应 检 查 有 无 虫 体 。 驱 绦 虫 后 应 仔 细 寻 找 有 无 虫 头 。8. 临 床 意 义 : 为 各 类 消 化 道 疾 病 提 供 协 助 性 诊 断 ; 查 找 并 鉴 别 寄 生 虫 。9. 操 作 性 能 : 快 速 简 便10. 方 法 局 限 性 : 有 时 会 受 主 观 因 素 的 影 响11. 参 考 文 献中 国 人 民 共
41、和 国 卫 生 部 医 政 司 编 .全 国 临 床 检 验 操 作 规 程 ( 第 二 版 ) .1997,139-14112. 注 意 事 项12.1 虫 卵 的 报 告 方 式 : 未 找 到 者 注 明 “未 找 到 虫 卵 ”, 找 到 一 种 报 告 一 种 , 找 到 几 种报 告 几 种 , 并 在 该 虫 卵 后 面 注 明 数 量 若 干 , 以 低 倍 视 野 计 算 。12.2 应 注 意 将 植 物 纤 维 及 其 细 胞 与 寄 生 虫 、 人 体 细 胞 相 鉴 别 , 并 注 意 有 无 肌 纤 维 、 结 缔组 织 、 弹 力 纤 维 、 淀 粉 颗 粒 、
42、脂 肪 小 滴 球 等 。 若 大 量 出 现 , 则 提 示 消 化 不 良 或 胰 腺 外 分 泌功 能 不 全 。12.2 细 胞 中 应 该 注 意 红 细 胞 、 白 细 胞 、 嗜 酸 性 粒 细 胞 ( 直 接 涂 片 干 后 用 瑞 氏 染 色 ) 、 上皮 细 胞 、 巨 噬 细 胞 等 。12.3 夏 科 -雷 登 结 晶 : 为 无 色 或 浅 黄 色 两 端 尖 而 透 明 具 有 折 光 性 的 菱 形 结 晶 , 大 小 不 一 。常 见 于 肠 道 溃 疡 , 尤 以 阿 米 巴 感 染 粪 便 中 最 易 检 出 。 过 敏 性 腹 泻 及 钩 虫 病 患 者
43、粪 便 亦 常 可见 到 。12.4 细 菌 : 占 粪 便 净 重 的 1/3( 4000 亿 /g 干 粪 ) , 正 常 菌 群 主 要 是 大 肠 杆 菌 和 肠 球菌 , 占 80%; 而 过 路 菌 ( 产 气 杆 菌 、 变 形 杆 菌 、 绿 脓 杆 菌 等 ) 不 超 过 10%; 芽 孢 菌( 如 梭 状 菌 ) 和 酵 母 菌 为 常 住 菌 , 但 总 量 不 超 过 10%。正 常 菌 群 消 失 或 比 例 失 调 可 因 大 量 应 用 抗 生 素 所 致 , 除 涂 片 染 色 找 细 菌 外 , 应 采 用 不同 培 养 基 培 养 鉴 定 。文件编号:ABC
44、D-3-LJ-04 ABCD人民医院检验科 临检室作业指导书版本/修订号:A/0生效日期:20060808 主题内容 粪便潜血试验(ST-OBT)定性第 14 页 共 144 页粪便潜血试验(ST-OBT)定性(纸片法)1. 实 验 原 理 : ASK 粪 便 潜 血 纸 片 法 是 一 种 用 于 检 测 粪 便 中 是 否 含 有 潜 血 的 试 剂 。 反 应 原理 如 下 :血 红 素 ( Hb) + 双 氧 水 ( H2O2) 水 (H2O) + 氧 ( O2)氧 ( O2) + 氨 基 比 林 蓝 紫 色2. 标 本 采 集2.1 标 本 采 集 前 病 人 准 备 : 收 集 标
45、 本 前 三 天 禁 食 动 物 性 食 物 、 肝 脏 及 含 叶 绿 素 食 物 、 铁剂 、 中 药 以 免 引 起 假 阳 性 反 应 。2.2 标 本 种 类 : 粪 便 2.3 标 本 要 求 : 标 本 应 取 自 粪 便 的 不 同 部 位 ; 收 集 标 本 后 迅 速 检 查 , 以 免 因 长 时 间 放 置使 潜 血 反 应 的 敏 感 度 降 低 。3. 标 本 储 存 : 粪 便 应 取 指 头 大 小 存 放 于 干 燥 、 清 洁 、 无 吸 水 性 的 容 器 内 。 粪 便 的 容 器必 须 有 盖 且 有 明 显 的 标 记 。4. 标 本 运 输 : 室
46、 温 运 输 。5. 标 本 拒 收 标 准 : 久 置 硬 结 粪 便6. 试 剂6.1 试 剂 名 称 : ASK 粪 便 潜 血 检 测 试 纸6.2 试 剂 生 产 厂 家 : 东 耀 生 物 科 技 有 限 公 司6.3 包 装 规 格 : 25 人 份 /筒6.4 试 剂 盒 组 成 :6.4.1 潜 血 试 纸 ( OB Paper) : 试 纸 上 涂 有 氨 基 比 林 。6.4.2 呈 色 液 ( Developer) :溶 液 中 含 有 3-5%双 氧 水 。6.4.3 竹 片 ( Sticks)潜 血 试 纸 5pcs*60呈 色 液 4*15ml竹 片 300 支6
47、.5 试 剂 储 存 条 件 及 有 效 期 : 室 温 保 存 , 有 效 期 内 皆 可 使 用 。7. 操 作 步 骤7.1 打 开 潜 血 试 纸 正 面 封 盖 , 用 竹 片 搜 集 少 量 粪 便 检 体 , 涂 抹 于 A 窗 。文件编号:ABCD-3-LJ-04 ABCD人民医院检验科 临检室作业指导书版本/修订号:A/0生效日期:20060808 主题内容 粪便潜血试验(ST-OBT)定性第 15 页 共 144 页7.2 再 用 竹 片 搜 集 少 量 不 同 部 位 之 粪 便 检 体 , 涂 抹 于 B 窗7.3 盖 上 封 盖 。7.4 打 开 背 面 呈 色 窗
48、, 各 滴 两 滴 呈 色 液 于 A 窗 及 B 窗 之 背 面 。7.5 30 秒 内 判 读 完 毕 。8. 结 果 判 断 与 分 析8.1 滴 完 呈 色 液 , 立 刻 产 生 蓝 紫 色 , 报 告 为 “+”8.2 滴 完 呈 色 液 , 5 秒 内 产 生 蓝 紫 色 , 报 告 为 “+”8.3 滴 完 呈 色 液 , 5 秒 后 产 生 蓝 紫 色 , 报 告 为 “+”8.4 滴 完 呈 色 液 , 无 蓝 紫 色 产 生 , 报 告 为 “阴 性 ” 9. 临 床 意 义9.1 适 合 于 检 测 粪 便 之 潜 血 。9.2 消 化 道 出 血 时 ( 如 溃 疡
49、病 、 恶 性 肿 瘤 、 肠 结 核 、 伤 寒 、 钩 虫 病 等 ) 本 试 验 可 阳 性 。9.3 消 化 道 恶 性 肿 瘤 时 , 粪 便 潜 血 可 持 续 阳 性 。10. 操 作 性 能 : 快 速 简 便 、 安 全 性 高 、 灵 敏 度 适 中11. 方 法 局 限 性 : 呈 色 反 应 与 判 读 的 时 间 控 制 会 受 主 观 因 素 影 响12. 参 考 文 献中 国 人 民 共 和 国 卫 生 部 医 政 司 编 .全 国 临 床 检 验 操 作 规 程 ( 第 二 版 ) .1997,142-14313. 注 意 事 项13.1 本 品 为 一 次 性 使 用 体 外 诊 断 试 剂 。13.2 超 过 有 效 期 , 不 能 使 用 。文件编号:ABCD-3-LJ-05 ABCD人民医院检验科 临检室作业指导书版本/修订号:A/0生效日期:20060808 主题内容 尿 沉 渣 检 查第 16 页 共 144 页尿 沉 渣 检 查