1、水稻 DNA 提取，扩增与电泳实验一、1 掌握 DNA 的提取技术 2 掌握 PCR 的相关操作 3 掌握了解电泳操作方法和步骤二、实验原理：1、提取 DNA 一般用水稻幼叶，先用机械方法液氮研磨植物组织使组织细胞破碎，然后加 TPS 抽提液水浴提取 DNA，最后用无水乙醇沉淀 DNA 即可。 （DNA 提取原理）2、DNA 在高温时可以发生变性解链，当温度降低后又可以复性成为双链。 （PCR 原理）3、琼脂糖凝胶电泳：借助琼脂糖凝胶的分子筛作用，核酸片段因其分子量或分子形状不同，电泳移动速度有差异而分离。三、实验仪器和药品液氮、镊子、手套、移液枪、枪头 2ML 和 1.5ML 离心管、水稻幼
2、叶、研磨棒、琼脂糖、天平、PCR 仪、Loading Buffer 染色剂、灭菌双蒸水、摇床、离心仪、Taq 酶、Mg2+Buffer、dNTP 溶液、引物、TPS 抽提液、无水乙醇、电泳槽、GoldView、TBE 溶液、微波炉、锥形瓶、量筒、PCR 板、PCR 盖、水浴箱、Marker四、实验步骤1、 DNA 提取（1 ）取水稻叶子少量置于 2ML 离心管内，加入液氮研磨，带磨成粉状后，加 1MLTPS 抽提液，然后将离心管放入 75恒温水浴箱中至少半小时。同时将无水乙醇放入 -40下冷冻（2 ）水域结束后，取出离心管放入离心仪中，13600r/min 离心 12min，然后小心的取出离心
3、管，将上清液转移到 1.5ml 离心管中 0.5ml，加入 600ul 冷冻的无水乙醇，放入-80下冻10min，拿出放入离心仪 13600r/min 离心 5min（3 ）到处上清液，倒置，晾干约 3h（4 ）加入双灭菌水 60ml，放入摇床中振荡一夜。2、 PCR（1 ）按所需配料表，向 PCR 板中加入双蒸水,mix, 前引物，后引物，然后加入提取的DNA，混匀（2 ）将 PCR 板放入 PCR 仪中运行 SSR 程序3、电泳（1 ）称取 0.3g 琼脂糖和 30mlTBE 溶液。混匀倒入锥形瓶中，加热溶解混匀。待冷却至不烫手时加入 GoldView，混匀，倒入已经插好梳子的配胶槽中，冷却 30min 至 1h（2 ）将冷却好的凝胶拔掉梳子后放入电泳槽中（将有点样孔的一端靠近负极）然后按照顺序点样，每个样的用来那个为 4ul，在中间的空上点 Marker 溶液 3ul（3 ）打开电泳开关，电泳 32min 左右（4 ）电泳结束后，将胶取出，放入透视镜下照射，拍照，读带五注意事项1、 提取 dna 的时候用乙醇是沉淀时，必须将乙醇冰冻2、 在 PCR 之前加 2ulDNA 时要将枪头插入液面下
