1、先看一下megalign的简单介绍 MegAlign 提供6 列队(aligment)方法,进行DNA 和蛋白质序列的配对和多序列比较(multiple aligment) 。多序列比较(multiple aligment)可以在MegAlign 的worktable 进行查看和编辑。可以根据队列(aligment)的结果制作进化树(Phylogenetic trees),并且,有关序列距离的数据和残基替代可以容易地作成表格。一般多序列比较(multiple aligment)的结果展示于队列(aligment)窗口,相似性和差异用彩色的直方图展示。 打开方法与editseq一样,只不过点选m
2、egalign图标,然后进入其界面 选择File-Enter Sequences 首先进行2个序列比对,选中所需序列1和2,点击add,使从左侧添加到右边的框中,单击Done 出现如图所示界面,选中1与2(可按control点选),之后选择Align-One Pair-By Wilbur-Lipman method 出现如图所示界面,即为blast结果,但画面不美观,可对其进行调整,点击鼠标所处位置按钮 出现此对话框,里面可进行一系列设置,可根据自己喜好进行,使界面更美观形象 设置后可看到错配碱基,如下,还是比较直观吧 比对之后可对其进行结果查看,点选View-Alignment report
3、即可 结果如图 对于多序列的比对,添加序列与一对序列一样,不过选择的Align-Clustal或者Jotun Hein命令 如点了2之后出现点选Jotun He次变成4条后点选View-P现如下结果,in后,出现如条了 ) hylogenetic因我用序列如图界面,图Tree进行系列太少,体现图中红线部分系统树分析 不出很好效果分代表同源序果,欢迎大家序列(偷懒了家自己尝试 了,2个序列添加简单的把Alignment report参数设置介绍下 关于Alignment report,参考图8,之后选择options-Alignment Report Contents 出现如图对话框,为使Ali
4、gnment report界面更美观一点,首先调整其界面,点选break alignment,填入适当的碱基数,我一般选择80个,可填满整个界面,点击OK 出现如图所示界面,是不是更好看些? 继续选择上面对话框中的show consensus disagreement,会标示出错配碱基(绿色部分) 如继续选择show consensus strength,则出现如图所示结果,一致序列用红线代表 谢谢,正需要这些,不过请问AlignClustal或者Jotun Hein命令有什么区别呢?Clustal还有V、W之分,有什么区别? 在一对比对是,One PairBy WilburLipman me
5、thod时要输入一些参数,那些参数怎么填,有什么作用呢?谢谢楼主 关于第一个问题,见附件 关于第二个问题,见下面介绍,希望对你有所帮助 1 ) KTUPLE SIZE: This is the size of exactly matching fragment that is used. 2 )GAP PENALTY: This is a penalty for each gap in the fast alignments. It has little affect on the speed or sensitivity except for extreme values. 3 )WINDOW SIZE: This is the number of diagonals around each of the best diagonals that will be used. Decrease for speed; increase for sensitivity.