1、实验二十一 马丁氏培养基的制备一、目的要求通过对分离真菌用的马丁氏(Martin )培养基配制,掌握对选择培养基的配制方法,并明确选择的原理。二、基本原理马丁氏培养基是一种用来分离真菌的选择性培养基。此培养基是由葡萄糖、蛋白胨、KH2PO4、MgSO 47H2O、孟加拉红(玫瑰红,Rose Bengal)和链霉素等组成。其中葡萄糖主要作为碳源,蛋白胨主要作为氮源,KH 2PO4 和 MgSO47H2O 作为无机盐,为微生物提供钾、磷和镁离子。而孟加拉红和链霉素主要是细菌和放线菌的抑制剂,对真菌无抑制作用,因而真菌在这种培养基上可以得到优势生长,从而达到分离真菌的目的。马丁氏培养基配方如下:KH
2、 2PO4 1gMgSO 47H2O 05g蛋白胨 5g葡萄糖 10g琼脂 1520g水 1000mlpH 自然此培养液 1000ml 加 1%孟加拉红水溶液 33ml。临用时每 100ml 培养基中加 1%链霉素液 03ml。三、器材KH 2PO4,MgSO 47H2O,蛋白胨,葡萄糖,琼脂,孟加拉红,链霉素;试管,三角烧瓶,量筒,玻棒,培养基分装器,扭力天平,牛角匙,高压蒸汽灭菌锅等。四、操作步骤1称量和溶化按培养基配方,准确称取各成分,并将各成分依次溶化在少于所需要的水量中。待各成分完全溶化后,补足水分到所需体积。再将孟加拉红配成 1%的溶液,在 1000ml 培养液中加入 1%的孟加拉红溶液 33ml,混匀后,加入琼脂加热溶化(方法同实验十九)。2分装、加塞、包扎、灭菌,无菌检查与实验十九相同。3链霉素的加入由于链霉素受热容易分解,所以临用时,将培养基溶化后待温度降至 45左右时才能加入。可先将链霉素配成 1%的溶液,在 100ml 培养基中加 1%链霉素液 03ml ,使每毫升培养基中含链霉素 30g。五、实验报告思考题(1)什么是选择培养基?它在微生物学工作中有何重要性?(2)培养细菌、放线菌、酵母菌、霉菌的最适 pH 值各为多少?