1、1 材料1.1 实验动物Wistar 雄性大鼠 50 只, 体重在 220202 模型21 分组将 Wistar 大鼠随机分为:(1)空白对照组 8 只,余 42 只大鼠模型复制后通过检测筛选合格大鼠。具体做法是:TC 小于 2.6 mmol/L 的动物被剔除,血糖小于 16.7 mmol/L 的被剔除。(2)取造模合格大鼠 30 只,再随机分为模型组、qkl 组、jz 组。其中正常组喂养普通饲料 ,其他组均喂养高脂饲料。22 复制 高脂血症的模型复制 大鼠饲料基本配方为:14%胆固醇,10% 猪油,02% 甲基硫氧嘧啶,86%89%基础饲料 (其中面粉 20%,米粉 10%,玉米 20%,麸
2、皮 25%,豆粉 20%,骨粉 2%,鱼粉 2%)。因为大鼠对高脂肪、高胆固醇有耐受性,对外源性胆固醇的吸收率为 40%,较难形成斑块,所以饲料中除胆固醇外,另又加入了甲基硫氧嘧啶。1520g/只d,持续 4 周后检测证实,大鼠血胆固醇是否明显升高。 复合高糖血症的模型复制 在高脂血症即将形成的第 4 周复制高糖血症模型,即使用链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)腹腔注射形成高糖血症,使两种模型同时成功复制。临用前配制 01mol/L 柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。再向此溶液加入柠檬酸钠,配制成 05%溶液,其 pH 值为。另有:大鼠术前 30 分钟按 39/kg 腹腔注射 50%葡萄
3、糖,对照组大鼠注射等容积复方氯化钠溶液,分别在葡萄糖注射前、缺血 30 分钟、再灌注 24 小时用微量血糖分析仪测量鼠尾血血糖浓度。方法 大鼠 40 只(实验前测血糖、尿糖均正常) 按随机数字表法随机分为 5 组。按体重标准 50mg/kg 次性腹腔注射 05%链脲佐菌素溶液,正常对照组同样按照体重标准 50mg/kg 予 09%生理盐水腹腔注射。注射 5h 后,予以 25%葡萄糖水灌胃,每只 2mL,防止造模早期大鼠出现严重的低血糖反应。正常对照组予以 2mL/只蒸馏水灌胃。72h 从大鼠眼眶球后静脉丛取血测定空腹血糖水平。将血糖值16mmol/L 者确定为高糖血症模型大鼠,再随机分为 3
4、组。灌胃给药或同体积蒸馏水,每天 1 次,连续 10 天。末次给药后腹腔注射麻醉,腹主动脉取血,离心分离血清按试剂盒方法测定 vWF。3 脑缺血模型0.1M 柠檬酸 -柠檬酸三钠配置:0.1M 柠檬酸母液 :2.1g 柠檬酸(FW:210.14)溶于 100ml ddH2O0.1M 柠檬酸三钠液母液:2.94g 柠檬酸三钠 (FW:294.10)溶于 100ml ddH2O然后将 0.1M 柠檬酸母液和 0.1M 柠檬酸三钠母液按 1:1.32 配制造模时配制 1的 stz 的溶液。是每次配 30 只老鼠的量左右。0.5g的 stz 加入 50ml 的柠檬酸钠缓冲液。混合均匀没有固体沉淀后,用锡纸包住 stz 溶液的瓶子就可以注射了。按照 65mg/kg 的量注射的。1 只 200g 的老鼠注入 1stz 溶液的量是 1.3ml