1、MS 培养基一、大量元素母液 1：大量 A500 ml 母液称取：50NH4NO3 KNO3 MgSO47H2OKH2PO441.25 g 47.5 g 9.25 g 4.25 g母液 2：大量 B500 ml 母液称取：100CaCl22H2O CaCl222 g或16.6 g母液 3：Fe 盐1000 ml 母液称取：100FeSO47H2O Na2-EDTA 或 EDTA-Fe(10mM-100M)2.78 g 3.73 g 4.211 g注：配制顺序如下1. 称取 3.73 g Na2-EDTA2H2O 溶解于 200 ml 去离子水中，并置于 70 预热 (A)；2. 称取 2.78
2、 g FeSO47H2O 溶解于 200 ml 去离子水中 (B)；3. 将 B 缓慢倒入 A 中混合，边倒边搅动，置于 70 水浴锅中螯合 2 h；4. 冷却后定容至 1 L。二、微量元素母液 4：微量1000 ml 母液称取：1000MnSO44H2O ZnSO47 H2O H3BO3 KI22.3 g 8.60 g 6.20 g 0.83 gNa2MoO42 H2O CuSO45 H2O CoCl26 H2O0.25 g 0.025 g 0.025 g三、有机物质母液 5：有机（不含肌醇）1000 ml 母液称取：100盐酸硫胺素 VB1 盐酸吡哆醇 VB6 烟酸 VB3 VPP 甘氨酸
3、（氨基乙酸）0.01g 0.05 g 0.05 g 0.2 g1 L 工作液的配制:母液 1： 母液 2： 母液 3： 母液 4： 母液 5： 肌醇 蔗糖大量 A 大量 B Fe 盐 微量 有机20 ml 10 ml 10 ml 1 ml 10 ml 0.1 g 30 g定容至 1 L，用 1 M NaOH 调 pH 至 5.8，于 121 ，高压灭菌 20 min。注：配固体培养基可在调 pH 后加适量 Agar 或 Phytagel；肌醇也可加入有机母液。四、抗生素和激素母液试剂名称 配制方法 母液浓度Amp（氨苄青霉素） 双蒸水溶解，定容，过滤灭菌 50 mg/ mlKm（卡那霉素） 双
4、蒸水溶解，定容，过滤灭菌 50 mg/ mlStr（链霉素） 双蒸水溶解，定容，过滤灭菌 50 mg/ mlCb（羧苄青霉素） 双蒸水溶解，定容，过滤灭菌 250 mg/ ml6-BA (6-苄基嘌呤)1M NaOH 或盐酸溶解，双蒸水定容，高压灭菌1 mg/ mlNAA（萘乙酸） 1M NaOH 溶解，双蒸水定容，高压灭菌 1 mg/ mlIAA 95% 乙醇溶解，双蒸水定容，过滤灭菌 1 mg/ ml五、乙酰丁香酮 (Acetone-syringone, AS)称取 196.2 mg AS 用 10 ml DMSO 溶解，母液浓度 100 mM，-20避光保存，工作浓度 100 200 M
5、六、MS 溶液的混合配制 MS 培养基时，每 1L 培养基取：母液 1：大量 A母液 2：大量 B母液3：Fe 盐母液 4：微量母液5：有机肌醇 蔗糖 6-BA NAAMS0 无菌苗(1/2 MSAmp)10 ml 5 ml 5 ml 0.5 ml 5 ml 0.05 15g MS1 共培养(AS6-BA, NAA)20 ml 10 ml 10 ml 1 ml 10 ml 0.1g 30g 500 L100 LMS2 分化(Km Cb6-BA, NAA)20 ml 10 ml 10 ml 1 ml 10 ml 0.1g 30g 500 L100 LMS3 生根(Km CbIAA)10 ml 5 ml 5 ml 0.5 ml 5 ml 0.05g 15g 5 种母液分别依次加入到 800 ml 蒸馏水中，混匀后加入肌醇、蔗糖和能高压灭菌的激素（6-BA 和 NAA） ，定溶至 1000 ml，用 1M NaOH 调 pH 至 5.8。最后加 Phytagel （Sigma）4.4g 或 Agar 10g。灭菌完后，在培养基凝固前加入 AS 或 抗生素及不能高压灭菌的激素（IAA） 。
