1、实验一 实验动物的捉拿和给药方法【目的】结合实验内容逐步学会实验常用动物的捉拿和给药方法。 【内容】(一)小自鼠的捉拿和给药方法 1捉拿法用右手捉住小白鼠的尾巴将鼠提起置于鼠笼上面或其他粗糙面上,向后拉轻鼠尾,迅速用左手拇指和示指挥住其两耳及头部皮肤,翻转鼠体,使腹部朝上,然后以无名指及小指压往鼠尾,使小鼠完全固定(实验图 1) 实验图 1 小白鼠的捉拿法2给药方法(1)灌胃 将小白鼠固定后,使口部向上,将颈部拉直,右手持灌胃器自口角插入口腔,沿上颚轻轻进入食管,如动物安静,呼吸元异常、口唇无紫绀现象,即可注入药液(实验图 2)灌胃器 01 一 O.25ml/10g。 实验图 2 小白鼠灌胃器
2、(左)和灌胃法(布)(2)腹腔注射 将小白鼠固定后,右手持注射器自下膜一侧向头部方向以 3045 度刺入腹腔(角度太小易刺入皮下)。针头刺入不宜太深或太近上腹部,以免刺伤内脏,注射量一般为 01O2 ml/10g 。(3)皮下注射 捉鼠方法同前,右手持注射器,将计头刺人背部皮下注人药液。注射量一般不超过 0.25 ml/10g。 (4)肌内注射 由两人合作,一人固定小白鼠后,另一入持注射器,将针头刺入后肢外侧肌肉内注入药液,注射量为每腿不超过 0.lml。(二)螗蜍或蛙的捉拿和给药方法1捉拿法通常用左手握蛙,食指和中指夹住蛙的两上肢,无名指和小指夹住蛙的两下肢,将蛙固定于手中。 2给药方法(淋
3、巴囊注射) 蛙皮下淋巴囊分布见实验图 3。多采用腹囊给药。由于蛙的皮肤弹性差,被针头刺破后,针眼不易闭合会便药波外溢,故注射针头必须通过一层隔膜,再进人皮下淋巴囊。如腹囊绐药时,针头应自大腿上端刺人,经过大腿肌层入腹壁肌层再浅出进人腹壁皮下入腹囊。注射量每只可达 0.251Oml.(三)家免的捉拿和给药方法 1捉拿祛 用左手抓住颈背部皮肤将兔提起,以右手托住其臀部,使兔呈坐位姿势。2.给药方法(1)灌胃两人合作,由一人固定兔身,另一人用兔开口器(实验图 4)将兔口张开,并将兔舌压在开曰器下边横放于兔口中。取涂以液状石蜡的导尿管,从开口器中央孔插入,沿上颚后璧缓缓送人食管,约 15cm 左右即可
4、进人胃内,注意勿插入气管,可将导尿管的外端放人水中,如未见气泡,兔未挣扎,无呼吸圆难,证明导尿管在胃中。连接已吸好药液的注射器,将药液缓缓推入,再推人少景空气,使管内药液全部进人胃中,然后将导尿管轻轻抽出,灌胃量一般不超过 20mlkg。实验图 3 蛙的皮下淋巴囊1颌下囊 2胸囊 3腹囊 4股囊 5胫囊 6.侧囊 7头背囊 8囊间隔实验图 4 兔开口器及灌胃法 (2)耳静脉注射 将兔置于固定器内或由一人将兔固定于胸臂之间,拔去兔耳外缘的毛,并用 75酒精棉球涂擦该部位皮肤,使血管扩张(兔耳外缘血管为静脉),再以手指征住耳根部的静脉,阻止血液回流并使其充血。注射者以左手拇指和中指制定兔耳,示指放
5、在耳缘下作垫,右手持注射器从静脉末端刺人血管,当针头进人血管约 0.5cm,即以拇指和中指将针头与兔耳固定住,同时解除耳根部的压力。开始注药,如无阻力感,并见血管立即变白,表明针头在血管内;如有阻力感或见局部发白、隆起,表示针头未刺人血管内,应将针头退回重刺(实验图 5)。注射完毕压住针眼拔出针头,继续压迫片刻以免出血.注射量一般为 0.22mlkg。实验图 5 家兔耳静脉注射法(3)皮下注射、肌内注射、腹腔注射 其部位同小白鼠。注射量分别为:o.5ml/kg、1ml/kg、5ml/kg。 实验二 药物剂量对药物作用的影响【目的】1观察不同剂最量对药物作用的影响。 2练习小白鼠的捉拿和腹腔注射
6、法。【材料】0.2苯甲酸钠咖啡因(简称安钠咖)溶液、2苯甲酸钠咖啡因济液、大烧杯、托盘天平、lml 注射器、小白鼠。【操作】取小白鼠 2 只,称重编号后分别放人大烧杯中,观察两鼠的正常活动,甲鼠腹腔注射 02安钠咖溶液 02ml/10g;乙鼠腹腔注射 2安钠咖溶液 02mL/10g,观察有无兴奋、紧尾、惊厥、甚至死亡等现象,记录发生的时问,并比较两鼠有何不同。【结果】实验三 不同给药途径对药物作用的影响(一)家兔静脉注射法和肌内注射法【目的】 1观察给药途径不同对药物作用的影响2练习家兔的捉拿法及耳静脉注射法、肌内注射法。【材料】5异戊巴比妥钠溶液、磅秤、5ml 注射器、兔固定器、酒精棉球、家
7、兔。【操作】取家兔 2 只,称重编号,观察两兔正常活动、翻正反射及呼吸情况。以 5异戊巴比妥钠溶液 1mlkg 分别给甲兔耳静脉注射;乙兔肌内注射。记录给药时问,观察两兔翻正反射消失的时间和对呼吸抑制程度有何不同。 【结果】(二)白鼠灌胃法和肌内注射法 【目的】 1观察给药途径不同对药物作用的影响。2,练习小白鼠的捉拿法和灌胃法、肌注法。 【材料】 10硫酸镁溶液、大烧杯、托盘天乎、 lml 注射器、小白鼠灌胃器、小自鼠。【操作】取小白鼠 2 只,称重编号,分别置于大烧杯内,观察正常活动后,用 10硫酸镁溶波 02ml/10g 给甲鼠灌胃;乙鼠肌注。观察两鼠的反应有何不同。【结果】 鼠号 体重
8、 药物和剂量 用药后反应及发生时间甲 02安钠咖溶液乙 2安钠咖溶液兔号 体重 给药前情况 药物和剂量 给药途径 用药后反应 甲 乙 实验四 普鲁卡因与丁卡因表面麻醉作用比较【目的】 比较普备卡因与丁卡因表面麻醉作用的差异,分析原因并联系临床应用。【材料】 l盐酸普鲁卡因溶液、l盐酸丁卡因溶液、兔同定器、剪刀、家兔.【操作】取家兔 1 只,置于兔固定器内或由一人固定,在每侧角膜的上、中、下、左、右各 5 点用兔须触及其角膜,测试其正常的眨眼反射,然后用手指将下眼睑拉成杯状并压住鼻泪管,向左右两眼分别滴入 1盐酸普鲁卡因溶液与 l盐酸丁卡因溶液各 3 滴,约1min(轻轻揉动下眼睑,使药液与角膜
9、充分接触)后将手放开,任药液自溢。滴药后每隔5min 分别测试两眼角膜 5 点有无眨眼反射,共侧 6 次,记录结果。如果 5 点眨服反射均存在,则记 55;5 点反射均消失,则记 05; 5 点中有 2 点反射存在,则记 2/5,依次类推,比较两眼有何差别。注意:刺激角膜用的兔须,前后及左右两眼应用同一根的同一端,刺激强度力求一致,且兔须不可触及双睑,以免影响实验结果。【结果】 实验五 普鲁卡因与丁卡因毒性比较【目的】 1比较普曾卡因与丁卡因的毒性大小,并联系临床应用。2练习小白鼠的捉拿及腹腔注射方法。 ,【材料】 l盐酸普鲁卡因溶液、 l盐酸丁卡因溶液、托盘天平、lml 注射器、大烧杯或鼠笼
10、、小白鼠。 【操作】取大小接近的小白鼠 2 只,称重编号,观察正常活动后,甲鼠腹腔注射 1盐酸普鲁卡因溶液 01ml20g,乙鼠腹腔注射 1盐酸丁卡因溶液 01ml20g。观察两鼠用药后反应有何差异,记录结果并分析原因。【结果】鼠号 体重 给药前情况 药物和剂量 给药途径 用药后反应 甲 乙 用药后眨眼反射眼 用药前眨眼反射 药物5 10 15 20 25 30左 l盐酸普鲁卡因 右 l盐酸丁卡因鼠号 体重 药物和剂量 用药后反应 出现反应时间甲 l盐酸普鲁卡因 乙 l盐酸丁卡因实验六 硫喷妥钠的静脉麻醉作用【目的】 1观察硫喷妥钠的静脉麻醉作用,并联系其临床应用。2练习家兔的捉拿及静脉注射方
11、法。【材料】 l5硫喷妥钠溶液、磅秤、5ml 注射器、酒精棉球、家兔。【操作】取家兔 1 只,称重,观察正常状态(呼吸、翻正反射、眼睑反射、痛觉反射、四肢肌肉紧张度等)并记录,用酒精棉球涂擦耳外缘使其静脉血管充盈,从耳静脉缓慢注射15硫喷妥钠溶液约 lml/kg(用药量可因动物个体差异而增减),当翻正反射及眼睑反射消失即为麻醉,记录麻醉开始时间及麻醉维持时问(从翻正反射消失至恢复的时间)。观察并记录用药后的表现,与用药前比较,联系临床用途。 【结果】 兔体重 KG ,l5硫喷妥钠溶液 ml,麻醉开始时间 麻醉维持时间 呼吸频率 翻正反射 眼睑反射 痛觉反射 四肢肌肉紧张度用药前 用药后 实验七
12、 苯巴比妥钠的抗惊厥作用【目的】观察惊厥的表现和苯巴比妥钠抗惊厥作用。 (一)药物致惊厥法【材料】05苯巴比妥钠溶液、25尼可刹米溶彼、生理盐水、托盘天平、1ml注射器小向鼠。 【操作】取小白鼠 2 只,称重编号,甲鼠腹腔注射 0.5苯巴比妥钠溶液01ml10g乙鼠腹腔注射等容量生理盐水作对照。30min 后,两鼠均于背部皮下注射25尼可刹米溶液 0.20.3ml10g,观察两鼠有无惊厥发作,惊厥出现的时间、程度和结果有何不同(后肢强直为惊厥指标)。 【结果】 (二)电刺激致惊厥浩【材料】05苯巴比妥钠溶液、生理盐水、荮理生理实验多用仪、lml 注射器、托盘天平、小白鼠。【操作】 取小白鼠 2
13、 只,称重编号。将多用仪刺激方式置于“单次”位置频率置于 4HZ, “时间”选择 025s,后面板开关拔向“电惊厥”一边,电压调节钮置于适当位置(一般刻度拨至 79,输出电压为 l00V 左右;将输出线上的两个鳄鱼夹用生理盐水浸湿,一个夹在小白鼠的两耳上(或两耳间的皮肤上),另一个夹在小自鼠的下唇,接通多用仪电源导线,打开电源开关,按下“启动”钮,即可使小白鼠产生惊厥(小白鼠惊厥分为 5 个时期:潜伏期僵直屈曲期后肢伸直期一阵挛期一恢复朔;以后肢强直作为惊厥的指标)。如未出现惊厥,可将电压再凋高,如仍不惊厥,可将频率调至 2HZ,仍不惊厥时,将该鼠弃之另换。按此法选出的 2 只小白鼠记录下各鼠
14、惊厥所需的刺激参数(电压强度和频率)。然后,甲鼠腹腔注射 05苯巴比妥钠溶液 01ml/10g,乙鼠注射等容量生理盐水作对照。30min 后,再用原来的刺激参数给予刺激比较两鼠给药前后反应有何不同,记录结果。【结果】鼠号 体重 药物和剂量 25尼可刹米溶液 惊厥出现时间 程度 结果甲 0.5苯巴比妥钠 乙 生理盐水鼠号 体重 药物和剂量 刺激参数 用药前反应 用药后反应甲 0.5苯巴比妥钠 乙 生理盐水实验八 地西泮的抗惊厥作用【目的】观察地出泮的抗惊厥作用。 【材料】25尼可刹米溶液、05地西泮溶液、磅秤、5ml 注射器、家兔。 【操作】取健康家兔 2 只,称重编号!然后两兔均由耳静脉注射
15、25尼可刹米溶液05mlkg,待家兔出玢惊厥(躁动、角弓反张等)后,甲兔立即由耳静脉注射 05地西泮溶液 5mgkg,乙兔耳静脉注射等容量生理盐水,观察两兔惊厥有何不同。【结果】兔号 体重 药物和剂量 结果甲 25尼可刹米溶液+05地西泮 乙 25尼可刹米溶液+生理盐水实验九 氯丙嗪的镇静和降温作用【目的】观察氯丙嗪的镇静、降温作用,掌握其降温作州特点。(一)小白鼠实验法 【材料】008盐酸氯丙嗪溶液、生理盐水、液状石蜡、托盘天平、肛表、大烧杯,1ml 注射器、冰箱、小白鼠。【操作】取小白鼠 4 只,称重编号,观察正常活动及精神状态。左手固定小白鼠,右手将涂有液状石蜡的肛表插入小白鼠肛门内约
16、l.52cm,3min 后取出读数,每隔 2mim 测1 次,连测 3 次,其 3 次的平均数为正常体温。然后甲、乙两鼠分别腹腔注射 0.08盐陵氯丙嗪溶液 0.1mll0g,丙、丁两鼠分别腹腔注射生理盐水 01 mll0g。用药后将乙、丙两鼠放人冰箱冷藏室。按表中规定时间各测 l 次体温,并观察小白鼠的活动悄况。【注意事项】1室温影响实验结果,必须在 30以下进行实验。2无冰箱时亦可在大盆中放入冰块,造战局部环境低温进行实验3测体温时,将小白鼠固定好。每只小白鼠最好固定用一支体温表,且每次插人深度和时间要尽量一致。 4实验前 24h,最好将小自鼠放在准备实验的环境中适应,并小笼喂养。【结果】
17、(二)家兔实验法【材料】25氯丙嗪溶液、生理盐水、液体石蜡、磅秤、肛表、兔固定器、冰袋、5ml 注射器、家兔。 【操作】取体重近似的健康家兔 46 只,分别放入固定器内,固定其头部,暴露下肢及尾部,便于探侧体温,左手提起兔尾,右手将涂有液体石蜡的肛表插人兔肛门内保约45cm,3min 后取出读数,每隔 2min 测 1 次,连测 3 次,取平均数为正常体温。选取体温在 385395 的家兔 3 只,称重编号,观察全身活动情况后,甲兔静注 2.5盐酸氯丙嗪溶液 0.3ml/kg,并在腹部放置冰袋降温;乙兔静注同量氯丙嗪,但不用冰袋降温。给药后每 20min 测堵体温 l 次。观察各兔体温变化及活
18、动。情况有何不同。【注意事项】1测体温时,小宜使家兔过度骚动。2测量时间和深度要尽最一致,每兔固定 l 支肛表。【结果】活动情况 体温鼠号 药物和剂量 环境用药前 用药后 用药前 用药后 15min 30min 45min甲 氯丙嗪 室温 乙 氯丙嗪 冰箱丙 生理盐水 室温丁 生理盐水 冰箱 实验十 镇痛药的镇痛作用【目的】观察镇痛药的镇痛作用并联系其临床应用。小白鼠扭体法(化学刺激法)【材料】 02哌替啶溶液、02罗通定济液、生理盐水、06醋酸溶液、托盘天平、大烧杯、秒表、1ml 注射器、小白鼠。【操作】取健康小白鼠 6 只称重厉分为甲、乙、丙三组,每组 2 只。甲组腹腔注射02哌替啶溶液
19、01ml10g,乙组腹腔注射 02罗通定溶液 01mll0g,丙组腹腔注射生理盐水 0.1ml/10g 作对照。给药 30min 后,各鼠腹腔注射 06醋酸溶波02ml/只,随即观察 10min 内出现扭体反应的动物数。扭体反应表现为腹部内凹,后腿伸张,躯体扭曲,臀部抬高。实验完毕后将各组的实验结果写在黑板上,综合全班的突验结果,计算出药物镇痛百分率。【结果】药物镇痛百分率计算方法:药物镇痛百分率=(实验组无扭体反应的鼠数-对照组无扭体反应的鼠数)/ 对照组无扭体反应的鼠数 X100用药后体温兔号 体重 药物和剂量 条件20min 40ming 60min温差甲 25氯丙嗪 冰袋 乙 25氯丙
20、嗪 室温丙 生理盐水 冰袋组别 鼠数 药物和剂量 扭体反应的鼠数 无扭体反应的鼠数甲组 乙组 丙组 实验十一 尼可刹米对呼吸抑制的解救【目的】 观察尼可刹米对吗啡所致呼吸抑制的解救作用,并联系其临床意义。【材料】 l盐酸吗啡溶液、5尼可剁米溶液、液体石蜡、兔固定器、磅秤、记纹鼓、铁支架、双凹夹、玛利气鼓、描记杠杆、鼻插管、5ml 及 lOml 注射器、胶布、酒精棉球、家兔。【操作】 取家兔 1 只,称重置于固定器内。将鼻插管与玛利气鼓连接,另一端涂以液状石蜡后,插人兔的一侧鼻孔待玛利气鼓上的画笔明显波动时,用胶布固定鼻插管记录正常的呼吸曲线(突验图 6)。然后由耳静脉注射 1盐酸吗啡溶液 12
21、ml/kg,观察呼吸频率及幅度,待频率极度减慢,幅度显著降低时,立即由耳静脉缓慢注射 5尼可刹米溶液l2ml,观察呼吸变化,待呼吸抑制被解除后,以稍快的速度追加尼可刹术 05ml观察惊厥的发实验图 6 家兔呼吸描记装置【注意事项】1.通气量调节好后不要再更动,否则会影响实验结果。2注射吗啡的速度应根据呼吸抑制情况调节,一般宜先快后慢。3尼可刹米应事先准备好,当出现呼吸明显抑制时立即注射,但注射速度不宜过快,否则容易引起惊厥。【结果】 观察并分析描记的呼吸曲线。实验十二 传出神经药对瞳孔的影响【目的】观察阿托品和毒扁豆碱对家兔瞳孔的影响。【材料】 1毛果芸香碱溶液、1硫酸阿托品溶液、剪刀、量瞳尺
22、、家兔。【操作】 取家兔 1 只,剪去睫毛后,测量并记录两眼正常瞳孔直径,然后将下眼睑拉成杯状并压住鼻泪管(防止药液流人鼻汨管及鼻腔)。左、右两眼分别渝入 l硫酸阿托品溶液、l毛果芸香碱各 3 滴,约 1min 后放开下眼睑任药液自溢,经 15min 后再测记瞳孔直径,当右眼用毛果芸香碱后,瞳孔已缩小,再滴人 1%硫酸阿托品溶液 3 滴,观察并比较用药前后有何不同。【注意事顼】用药前后测量瞳孔,应在光照强度一致的条件下进行。【结果】 兔眼 正常瞳孔直径 药物和剂量 用药后瞳孔直径左眼 右眼 右眼 实验十三 传出神经药对离体肠管的作用【目的】观察乙酰胆碱、毛果芸香碱和阿托品对肠平滑肌的作用,了解
23、阿托品的作用机制。【材料】001氯化乙酰胆碱溶液、l硝酸毛果芸香碱溶液、01硫酸阿托品溶液、台氏波、麦氏浴槽、 “L”形通气管、温度计、充气球胆、记纹鼓、铁支架、描记杠杆、弹簧夹、双凹夹、手术剪、小镊子、注射器、烧杯、培养皿、缝线、胶泥、螺旋夹、家兔。【操作】 取空腹家兔 1 只,击头致死,剖腹取出接近十二指肠的空肠一段(2030cm)。剪成长约 2cm 的小段数段,置于盛有台氏液的烧杯内备用。在肠段两端用缝合针各穿一线,将肠段的一端系在通气管的小钩上。将通气管连同肠段放入盛有 38 土 05台氏液的麦氐浴槽内(台氏液量约 30ml),以双凹夹将通气管的另一端固定在铁支架上,使充满空气的球胆和
24、通气管相连、微微开启球胆橡皮管上_的螺旋夹,使球胆内的空气以每秒 2 个气泡的速度从通气管尖端的小孔逸出,以给肠肌供氧气。将肠管另一端的连线与杠杆相连,调节杠杆,开动记纹鼓,记录一段正常收缩曲线(实验图 7),然后依次用药。1加 0.01氯化乙酰胆碱溶液 0.5ml,观察结果如何。2当肠段收缩明显时,立即加入 01硫酸阿托品溶淡 05ml,观察对肠段收缩的影响 3当描笔下降到基线时,加人 001氯化乙酰胆碱溶液 05ml,观祭结果。4更换浴槽中的台氏液 3 次,待肠段又有轻微收缩后,再加人 l硝酸毛果芸香碱溶液 03ml,观察肠段有何反应。5.当作用达稳定状态后,立剧加人 01硫酸阿托品溶液
25、0.5ml,观察结果如何。【结果】描绘或剪贴肠肌活动曲线图,标明所给药物的名称和剂量,分折讨论所得结果。实验图 7 离体肠实验装置实验十四 有机磷农药中毒般其解救【目的】 观察有机磷中毒症状,比较阿托品与碘解磷定对有机磷中毒的解救效果.【材料】 75乙醇、5敌百虫溶液、2.5碘解磷定溶液、01硫酸阿托品溶液、磅秤、注射器、量瞳尺、家兔。【操作】 取家兔 3 只,称重编号,先测家兔正常的瞳孔直径、呼吸状态、唾液分泌、骨骼肌活动等情况,然后每兔由耳静脉注射 5敌百虫溶液 2ml/kg(20min 后如无中毒症状,可再注射 05mlkg),观察其变化。待中毒症状(瞳孔缩小、呼吸困难、唾液外流、骨骼肌
26、震颤等)明显时,甲兔从耳静脉注射 01硫酸阿托品溶液 1ml/kg,乙免从耳静脉注射25碘解磷定溶液 2mlkg,丙兔由耳静脉法入与甲、乙两兔相同剂量的硫酸阿托品和碘解磷定药液。观寮并比较药物对各兔的解救效果。【结果】兔号 体重 药物和剂量 瞳孔直径 呼吸状态 唾液分泌 骨骼肌活动甲 5敌百虫01硫酸阿托品 乙 5敌百虫2.5碘解磷定丙 5敌百虫01硫酸阿托品和 2.5碘解磷定 实验十五 去甲肾上腺索的缩血管作用【目的】观察去甲肾上腺索的缩血管作用,并分祈其作用机制。【材料】001重酒石酸去甲肾上腺素溶液、脊髓破坏针、蛙板、蛙腿夹、大头针、手术剪、镊子、滴管、放大镜、青蛙或蟾蜍。 【操作】取青
27、娃或蟾蜍 l 只,用脊髓破坏针破坏其脑和脊髓后,固定于蛙板上,沿其腹壁的一侧剖开腹腔,找出肠系膜,用大头针固定于蛙板上,用放大镜观察肠系膜血管的粗细后,滴 0.01重酒石酸去甲肾上腺素溶液 1 滴于肠系膜上,3min 后,再观察肠系膜血管粗细与滴药前有何不同。 【结果】纪录滴药前、后肠系膜血管的粗细变化。 实验十六 肾上腺素对普鲁卡冈作用的影响【目的】观察肾上腺素对普鲁乍因作用的影响,联系临床意义.【材料】 4普鲁卡因溶液、4普鲁卡因含肾上腺素 1:20000 的混合液、调剂天平、大烧杯 1 个、1ml 注射器 2 副、针头 2 个、小白鼠.【操作】取小白鼠 2 只,称重编号,观察正常活动后;
28、甲鼠皮下注射 4普鲁卡因溶液 0.1mll0g,乙鼠皮下注射 4普鲁卡阿含肾上腺素 1:20000 混合液 01mllOg 给药后观察两鼠所发生的症状有何不同?为什么?【结果】 鼠号 药物和剂量 用药后反应甲 4普鲁卡因溶液 乙 4普鲁卡因含肾上腺素 1:20000 的混合液 实验十七 传出神经药对血压的影响【目的】观察传出神经药对犬血压的影响,分析其作用机制,并联系临床用途。【材料】 5枸橼酸钠溶液、3戊巴比妥钠溶液、传出神经药溶液(见下项)、生理盐水、犬手术台、记纹鼓、犬用汞检压记、电磁标、眼科剪、手术剪、血管钳、手术刀、犬用动脉套管、制压瓶、犬用气管套管、滴定管、注射器、丝线、线绳、纱布
29、块、犬 1 只。【操作】取犬 l 只,称重,用 3的戊巴比妥钠溶液 lmlkg 注入腿部隐静脉进行麻醉,仰卧缚于手术台上,在股三角动脉搏动处纵行切口。找出股动脉,插入与滴定管相连的静脉套管,以备输液及用药,再在颈正中纵行切口,分离气管并切口插入气管套管,结扎 固定,然后分离一侧颊动脉(注意与迷走神经分离),结扎其远心端,用动脉夹夹往近心端,再于结扎线及动脉夹之间剪口插入充满 5枸橼酸钠溶液并与汞检压计相连的动脉套管,扎紧固定。用制压瓶或大注射器将汞检压计表示的压力提高 l6kPa(120mmHG)左右,放开动脉夹,通过检压计之浮笔在记纹鼓上描记血压曲线(实验图 8)。描记一段正常血压曲线后,依
30、次由股静脉注入下列药物,观寨血压变化。(1)0.01氯化乙酰胆碱溶波 001ml/kg。 (2)0.05甲硫酸新斯的明溶液 0.04ml/kg。 (3)重复(1),与原效果比较。 (4)1硫酸阿托品济液 01ml/kg。 (5)重复(1),与原效果比较。 (6)0.1盐酸肾上腺素溶液 O.01 ml/kg。(7)02重洒石酸去甲肾上腺素溶液 001ml/kg. (8)3盐酸麻黄碱溶液 0040.1ml/kg。 实验图 8 狗血压突验装置1.静脉套管 2.动脉套管 3制压瓶 4.水很检压计 5.气管套管6.气鼓 3.通保温灯泡 8滴定管 9.呼吸曲线 10.血压曲线 11.计时(9)005盐酸异
31、丙肾上腺素溶液 0.O1mlkg。 。(10)1甲磺酸酚妥拉明溶彼 01 mlkg(缓慢注射)。(11)重复(6)、(7)、(9),与原效果比较。(12)01盐酸普萘洛尔溶液 0.51ml/kg(缓慢注射)。(13)重复(6)、(7)、(9),与原效果比较。【结果】记录血压变化,讨论实验结果。实验十八 强心苷的强心作用【目的】观察毒毛花苷 K 对心脏的作用及其与钙离子的关系,联系其临床应用。【材料】 任氏液、l 氯化钙溶液、缺钙任氏液、1:l5000 毒毛花苷 K 任氏液或毒毛花苷 K 注射液(O.25mg/ml)、蛙板、蛙心套管、脊髓破坏针、普通剪刀、普通镊子、眼科剪、眼科镊、蛙心夹、长柄夹
32、、杠杆、铁支架、记纹鼓、滴管、烧杯、注射器、胶泥、缝线、蛙或蟾蜍。【操作】按斯氏法制备离体心脏标本,取蛙(或蟾蜍)1 只,用脊髓破坏针从枕骨大孔插入,上下捣毁破坏脑及脊髓后,仰卧置于蛙板上,剖开胸腔,剪开心包膜。从主动脉干下穿一线,在左侧主动脉分支上剪一“v”形切口,右手取盛有任氏液的蛙心套管插入主动脉,经过主动脉球后,将套管尖端转向蛙心左后方(同时左手用眼科镊将主动脉球向右前方提起)插人心室,在主动脉处结扎固定于套管上,剪断两侧主动脉分支,提起套管及蛙心再结扎并剪断静脉窦远心端,使蛙心与蛙体分离。用滴管吸去蛙心套管内的血液,反复以任氐液冲洗,清除蛙心内的存血后,将系有长线的蛙心夹夹于心尖上,
33、以长柄夹固定蛙心套管于铁支架上。蛙心夹的线与杠杆相连,即可通过杠杆在记纹鼓上描记心跳曲线(实验图 9),待描记一段正常心跳曲线后,按下列顺序向蛙心套管山加药或换液,观察心跳的变化实验图 9 斯氏法离休蛙心实验装置1换缺钙任氏液。 21:15000 毒毛花苷 K 任氏液,或换以任氏液后逐渐滴加毒毛花苷 K 注射液约02ml(或滴至心跳加强为止)。3.逐渐滴加 1氯化钙溶液 36 滴(或滴至心跳出现明显变化为止)。【结果】记录每次换药或加药后的心跳变化结果,讨论、分析作用机制,联系临床应用实验十九 普萘洛尔的抗心律失常作用【目的】了解氯仿一肾上腺素引起心律失常的方法,观察普萘洛尔抗心律失常作用。【
34、材料】氯仿、00 l肾上腺素、01盐酸普萘洛尔、心电图机、心电示波器、兔手术台、兔头夹、麻醉口罩、铁支架、lml 和 5ml 注射器、家兔。【操作】取家兔 1 只,称重,仰位固定于兔手术台上。用兔头夹固定后,用氯仿将家兔以麻醉口罩进行麻醉以达到角膜反射消失为度。记录心电图后,依次注射下列药品,并观察心电图变化。1耳缘静脉快速注射 001肾上腺素 05ml/kg,能迅速出现心律失常(室性早搏、室性心动过速)56min 后恢复窦性心律。实验以心电示波器监视并记录30s,1、2、3、4、5min 心电图。2耳缘静脉缓慢注射 0.1盐酸普萘洛尔 0.25ml/kg,约 2min 注射完毕,以心电示波器
35、观察并用心电图记录 30s,1、2、3、4、5min 心电图。3再由耳静脉迅速注射 00l肾上腺素 05ml/kg,并以上述方法记录其结果。【注意事项】注射肾上腺素速度要快,引起心律失常时间很短,要及时观察。【结果】实验二十 普萘洛尔的抗缺氧作用【目的】观察普萘洛尔提高动物缺氧的耐受力作用分析其抗缺氧的作用机制,联系临床应用。 【材料】01盐酸普萘洛尔注射液、生理盐水、钠石灰、250ml 广口瓶 1 个、调剂天平 1 台、1ml 注射器 2 副、5 号针头 2 个、钟罩 l 个小白鼠。【操作】将厂口瓶内放入钠石灰 l5g,用以吸收二氧化碳的水分.取小白鼠 2 只,称重标记,一只腹腔注射 01盐
36、酸普萘洛尔 02ml/10g,另一只注射生理盐水0.2ml/10g,15min 后将 2 只小鼠放入广口瓶巾,密封瓶口,立即记录时间。观察两鼠的活动直至死亡,记录死亡时间,分别求得各鼠寄活时间。 【注意事项】1瓶口可涂凡士林密封.2各实验组所用的广口瓶必须等容量。【结果】 综合各实验组的实验结果,求得两组小鼠的平均存活时间,给药组与对照组比较,求得存活时间延长百分率。存活时间延长百分率=(给药组平均存活时间-对照组平均存活时间)/对照组平均存活时间 X100%实验二十一 呋塞米的利尿作用【目的】观察呋塞米的利尿效果,联系其用途.【材料】1呋塞米溶液、液体石蜡、磅秤、兔手术台、导尿管、缚带、胶布
37、、雄性家兔 l 只。【操作】取临用前喂过青菜的雄性家兔 l 只、称重,仰卧缚于手术台上。将充满水并涂过液体石蜡的导尿管由尿道插入膀胱(深约 79cm),用胶布固定于兔体上,压迫兔下腹部排空膀胱后,导尿管口下接量筒,先观察并记录正常每分钟尿液滴数及 30min 尿量,观察项目 对照 肾上腺素 普萘洛尔 肾上腺素心律心率 然后由耳静脉缓慢注射呋塞米溶液 05mlkg。待尿液开始增多时,记录每分钟尿液滴数及 30min 尿量,与给药前比较,观察其利尿效果。【结果】 实验二十二 可待因的镇咳作用【目的】学习引咳实验法,观察可特因的镇咳作用,联系其临床用途。【材料】0.5磷酸可待因溶液、浓氨水(2729
38、)、生理盐水、大烧杯、托盘灭平、秒表、1ml 注射器、普通镊子、小白鼠。【操作】取小白鼠 2 只,分别称重后放人倒置的大烧杯内,观察正常活动。甲鼠皮下注射 05磷酸可待因溶液 01 ml10g;乙鼠皮下注射生理盐水 0.lml/10g 作对照。20min 后,分别置入浸有浓氨水的棉球刺激引咳,观察并记录两鼠的咳嗽潜伏期及每分钟咳嗽次数(咳嗽表观为缩胸、张口,有时可听到咳声)。【结呆】实验二十三 硫酸镁的导泻作用【目的】1观察硫酸镁对肠道的影响,分析其作用机制,联系临床用途。 2练习小白鼠灌胃法、颈椎脱臼处死法及破坏蟾蜍大脑的方法。(一)蟾蜍肠容量法【材料】l0硫酸镁溶液、蛙板、蛙腿夹、脊髓破坏
39、针、手术剪、手术镊、丝线、1ml注射器、蟾蜍。 【操作】取蟾蜍 1 只,用脊髓破坏针破坏大脑后,腹部向上放于蛀板上,用蛙腿夹固定其四肢,剖开腹腔找出小肠,取小肠二段,每段长约 l.52cm,用丝线结扎其两端。在第一段小肠内注人 l0硫酸镁溶液 0203ml(要靠扎线端注入,为避免药液从针孔处漏出,可在注入处用线结扎)。同法在第二段小肠内注入等量蒸馏水作对照。给药后将小肠给药前 给呋塞米后每分钟尿液滴数30min 尿量 鼠号 体重 药物和剂量 咳嗽潜伏期(s) 咳嗽次数/min甲乙 置回腹腔内,并将腹壁封闭.1h 后打开腹腔,观察各段肠容量有何变化。如无变化应继续观察。 【结果】记录各段肠管膨胀
40、情况,并分析其作用机制。(二)小白鼠灌胃法 【材料】卡红盐水溶液(1卡红溶于 l2氯化钠溶液中、卡红硫酸镁溶液(1卡红溶于 10硫酸镁溶液中)、小白鼠灌胃器、蛙板、小尺子、手术剪、眼科镊、棉花、小白鼠。【操作】取已饥饿 68h,体重相似(25g 左右)的小白鼠 2 只,按下列方法给药:甲鼠以卡红硫酸镁溶液 1ml 灌胃;乙鼠以卡红盐水溶液 1ml 灌胃。40min 后,拉断颈椎处死,立即剖开腹腔,比较两鼠肠蠕动及肠膨胀情况有何不同。将幽门至直肠的肠系膜进行分离,并将肠拉直侧量自幽门至卡红到达远段处之问的距离,比较两鼠有无不同。最后将肠腔剪开,观察两鼠粪便性状有无不同。【结果】实验二十四 硫放镁
41、急性中毒及钙剂的解救作用【日的】观察硫酸镁急性中毒时的症状及钙盐的解救效果.【材料】l0硫酸镁溶液、5氯化钙溶液、磅秤、干棉球、酒精棉球、5ml 及 lOm1注射器、家免。【操作】取家兔 1 只,称重,戏察正常活动及肌张力后,由耳静脉缓慢注射 10硫酸镁溶液 2mlkg,观察症状,当家兔行动困难,低头卧倒时,立即由耳静脉缓慢注射 5氯化钙溶液 4.8ml,直至四肢立起为止。【结果】“用药后 40min鼠号 灌胃药液 肠蠕动 肠容积 卡红到达距离甲 卡红硫酸镁溶液 乙 卡红盐水溶液 动物 体重 正常活动情况和肌张力 用硫酸镁后症状和肌张力 用氯化钙后症状和肌张力兔 实验二十五 止血药与抗凝血药对
42、凝血时间的影响【目的】观察止血药与抗凝血药对凝血时间的影响。分析实验结果,并联系临床用途。【材料】25酚磺乙胺溶液、50U1ml 肝素溶液、生理盐水、注射器、针头、毛细玻管、载玻片、秒表、棉球、小白鼠。【操作】1毛细玻管法 取小白鼠 3 只,称重标记,分别给甲鼠腹腔注射 25酚磺乙胺溶液 02ml10g;乙鼠腹腔注射 50U/1ml 肝素溶液 0.2ml/10g,丙鼠腹腔注射生理盐水02ml10g.30min 后,将 3 只小鼠分别用毛细玻管作眼眶内毗穿刺,取血达 5cm 的血柱,然后每隔 30s 折断毛细玻管一小段,检查有无血凝丝出现,记录从毛细玻管采血至出现血凝丝的时闻,即为凝血时间,观察
43、 3 支毛细玻管的凝血时间有何不同。2玻片法 取小白鼠 3 只,称重标记,给药方法同上。将 3 只小鼠分别用毛细玻管作眼眶内眦穿刺或眼球摘除,迅速取血,分别滴两滴血于干净玻片两端,血滴直径为 5mm 左右。然后每隔 30s 用于燥针头挑动血液 1 次,检查有无血纤维蛋白丝出现记录从采血至出现血纤维蛋白丝的时间,即为凝血时间,观察 3 块玻片的凝血时间有何不同。【注意事项】1测试凝血时闸的毛细玻管的内径应为 1mm 左右,并均匀一致。2实验室温度应控制在 15左右,温度愈低,凝血时间愈长.【结果】实验二十六 枸橼酸钠的抗凝血作用【目的】观察枸橼酸钠的抗凝血作用。【材料】3%枸橼酸钠溶液、3氯化钙
44、溶液、生理盐水、试管、试管架、注射器、酒精棉球、秒表、家兔。【操作】取试管 3 支,编号,1 号和 2 号试管分别加 3枸橼酸钠溶液 05ml,3 号试管加等量的生理盐水作为对照,然后从兔耳静脉或心脏抽取血液约 6ml,分别给 3 支试管各加 12ml,充分振摇后,记录时间,以后每隔 30s 倾斜试管 l 次,观察 3 支试管的血液疑固情况并记录结果。20min 后,在 2 号试管中加 3氯化钙溶液 3 滴,摇匀,观察并记录结果。【结果】鼠号 体重 药物 剂量 凝血时间(S)甲 25酚磺乙胺溶液乙 50U1ml 肝素溶液丙 生理盐水实验二十七 药物对离体子宫的作月【目的】练习离体子宫标本的制备
45、,观察药物对离体子宫的作用。【材料】100益母草煎液、lOUml 催产素注射液、05mgml 麦角新碱注射液、2mgml 苯甲酸雌二醇溶液、乐氏液、麦氏浴槽、换能器、记录装置(记纹鼓或单笔记录仪)、剪刀、通气钩、镊子、铁支架及双凹夹、烧杯、注射器、盘子、细线、雌性未孕 25g 以上小白鼠 1 只。【方法】装好恒温麦氏浴槽装置,调节浴温到 3839。取 25g 以上雌性未孕小白鼠1 只,于实验前 2448h 腹腔注射苯甲酸雌二醇 001ml(2mgml)。实验时,将小鼠颈椎脱臼处死,剪开腹腔,找出两侧子宫,轻轻剥离。然后将两侧子官合并以线结扎两端。一端悬挂于通气钩上,置于麦氏浴槽中(槽内先装有 30m乐氏浚),通空气或氧(每秒 l2 个气泡),另一端与描记杠杆或换能器小钩相近,先描记正常曲线,待曲线稳定后,将下列药液分别滴入麦氏浴皿,以观察子宫对药物的反应。每次用药后,待药效明显时,即更换乐氏汶,并冲洗几次。给药顺序如下:110Uml 催产素 0.2ml。205mg/ml 麦角新碱 02ml。3100益母草煎液 1ml。观察子宫收缩幅度、张力及频率变化。【结果】粘贴或复制子宫的收缩曲线,图下注明所加药物的名称和剂量,分析并讨论实验结果实验二十八 糖皮质激素对细胞膜的保护作用【目的】 观察氧化