1、 1 / 31药 物 分 析 绪论药品：是指用于预防、治疗、诊断人的疾病，有目的地调节人的生理机能并规定有适应症或者功能主治、用法和用量的物质，是一种关系人民生命健康的特殊商品。国家药品标准： 药典是国家监督管理的法定技术标准。药品质量标准是药品现代生产和质量管理的重要组成部分，是药品生产、经营、使用和行政、技术监督管理各部门应共同遵循的法定技术依据，也是药品生产和临床用药水平的重要标志。 中华人民共和国药典简称中国药典 （Chinese Pharmacopoeia，缩写 Ch.P） 中国药典版次：2010 年版、2005、2000、1995、1990、1985、1977、1963、1953
2、年版 1963 年版 至 2000 年版 分为一部、二部，2005 年至今分三部。一部收载药材及饮片、植物油脂和提取物、成方制剂和单味制剂等。 二部收载化学药品、抗生素、生化药品、放射性药品以及药用辅料。 三部收载生物制品，将中国生物制品规程并入药典。美国药典（USP） 、美国国家处方集（National Formulary， NF）美国标准最新版 USP(33)-NF(28)英国药典（British Pharmacopeia，BP）2011 欧洲药典（European Pharmacopeia，Ph.Eur）日本药局方（Japanese Pharmacopeia ，JP）国际药典（InP）
3、药品质量管理规范GLP ： 药品非临床研究管理规范 GSP ： 临床经营质量管理规范GMP ： 药品生产质量管理规范 AQC ： 分析质量管理GCP ： 药品临床研究管理规范 GAP ： 中药材生产质量管理规范第一章 药典概论中国药典的组成：凡例、正文、附录、索引。凡例：是制定和执行药典必须了解和遵循的法则。 “凡例”中的有关规定具有法定的约束力。名称及编排：名称中国药品通用名称 ；英文名：国际非专利药名（INN） ；结构式：化学结构式书写指南；化学名：有机化学命名原则限度：原料药的含量（%） ，除另有注明者外，均按重量计。原料药的含量（%）若未规定上限，指不超过101.0%标准品、对照品：系
4、指用于鉴别、检查、含量测定的标准物品。标准品：指用于生物检定、抗生素或生化药品中含量或效价测定的标准物质，按效价单位（或 ug计） ，以国际标准品进行标定。对照品：不包括色谱用的内标物质计量：液体的滴，系在 20oC 时，以 1.0mL 水为 20 滴进行计算。溶液后标示的“（110） ”等符号，系指固体溶质 1.0g 或液体溶质 1.0ml 加溶剂使成 10ml 的溶液；未指明何种溶剂时，均系指水溶液；两种或两种以上的混合物，名称间用半字线“-”隔开，其后括号内所示的“：”符号，系指各液体混合时的体积（重量）比例。精确度： 称取0.1g“ ： 系指称取重量可为 0.060.14g2 / 31
5、称取2g“ ： 系指称取重量可为 1.52.5g称取2.0g“ ： 系指称取重量可为 1.952.05g称取“ 2.00g“ ： 系指称取重量可为 1.9952.005g约若干 ： 指取用量不得超过规定量的10%精密称定 ： 指称取重量应准确至所取重量的千分之一称定 ： 指称取重量应准确至所取重量的百分之一精密量取 ： 指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精密度要求量取 ： 系指可用量筒或按照量取体积的有效数位选用量具正文：品名； 有机药物的结构式； 分子式与分子量； 来源或有机药物的化学名称；含量或效价规定；处方；制法； 性状；鉴别；检查； 含量或效价测定； 类别；规格；贮藏；
6、制剂药品检验工作的机构和基本程序药品检验的法定机构：国家药品监督管理局（SFDA） 、药品检验的法定机构（中国药品生物制品检定所） ；各省、市、自治区药品检验所药品检验工作的基本程序：取样（Sampling）（观察性状）鉴别（Identification）检查（Detection）含量测定（Assay）检验记录和报告（Test result report） 。取样：要求：科学性、真实性和代表性。 基本原则：均匀、合理。 取三分量（检验、复检、存档）检查：包括有效性、均一性、纯度要求与安全性四个方面。第二章 药物的鉴别实验鉴别试验(identification test)：根据药物的分子结构、理
7、化性质，采用化学、物理化学或生物学方法来判断药物的真伪。鉴别试验的项目和分类性状：外观、溶解度、物理常数（熔点、比旋度、吸收系数.）一般鉴别试验(general identification test)：依据某一类药物的化学结构或理化性质的特征，通过化学反应来鉴别药物的真伪。专属鉴别试验(specific general identification test)：依据每一种药物化学结构的差异及其所引起的物理化学特性不同，选用某些特有的灵敏的定性反应，来鉴别药物的真伪。鉴别方法：（要求专属、重现、灵敏、操作简便、快速）化学鉴别法：呈色反应：三氯化铁呈色反应、茚三酮呈色反应沉淀反应：与重金属离子的
8、沉淀反应（如利多卡因） 、还原性基团的银镜反应（如异烟肼） 、生成氧化亚铜红色沉淀（如肾上腺皮质激素类、葡萄糖） 、氯化物的银沉淀、丙二酰尿类的硝酸银反应、苯甲酸盐类的三氯化铁反应、含氮杂环类的生物沉淀剂反应、磺胺类药物的铜盐反应.荧光反应：药物本身或衍生物产；与各种试剂（硫酸、溴、间苯二酚等）反应气体生成反应：含硫药物经强酸处理后，加热，发生硫化氢气体（硫喷妥） ；碘蒸气；氨气；乙酸乙酯香味.光谱鉴别法：紫外光谱、红外光谱、近红外光谱、原子吸收、核核磁共振（NMR）色谱鉴别法：薄层色谱（TLC） 、高效液相色谱（HPLC）和气相色谱（ FC） 、质谱（MS） 生物学法 X 射线粉末衍射法3
9、/ 31第三章 杂质检查（ Test for purity）药物的杂质（purity）是指药物中存在的无治疗作用或影响药物稳定性和疗效，甚至对人体健康有害的物质。药物纯度（purities of drugs)：指药物的纯净程度。主要从用药的安全、有效和稳定性方面考虑。化学试剂中的杂质是指能够引起对化学使用目的有影响的物质。药政管理部门规定，不能以一般化学药品及化学试剂代替药用规格，更不能把化学试剂当作药品直接应用于临床治疗。检查项下包括有效性、均一性、纯度要求与安全性四个方面。杂质的来源：生产过程中引入；贮藏过程中产生杂质的种类:按来源分为一般杂质和特殊杂质：一般杂质：指在自然界中分布广泛，在
10、多种药物的生成和储藏过程中容易引入的杂质。特殊杂质：指在特定药物的生成和储藏过程中引入的杂质，这类杂质随药物的不同而不同。按毒性分为信号杂质和有害杂质：毒性杂质：如重金属、砷盐。信号杂质：一般无毒，但其含量的多少反映出药物的纯度情况，如果药物中信号杂质含量过多，提示该药的生产工艺或生产控制有问题，如氯化物、硫酸盐。按理化性质分为无机杂质、有机杂质及残留溶剂 杂质限量杂质限量：指药物中所含杂质的最大允许量，通常用百分之几或百万分之几（ppm）来表示。限量检查（Limit test）：药物中的杂质在不影响疗效和不发生毒性的原则下允许有一定限量。 通常不测定其准确含量，只检查杂质的量是否超过限量，所
11、以称为杂质的限量检查。 药物的杂质检查法：按操作方法分为对照法（限量检查法） 、.灵敏度法、比较法。对照法：指取一定量的被检杂质标准溶液和一定量供试品溶液，在相同条件下处理，比较反应结果，以确定杂质含量是否超过限量。 （比色、比浊、比色斑）灵敏度法：指在供试品溶液中加入一定量的试剂，在一定反应条件下，不得有正反应出现，从而判断供试品中杂质是否符合限量规定。比较法：取供试品一定量依法检查，测得待检杂质的参数（如吸收度）与规定的限量比较，不得更大。一般杂质检查：酸、碱、水分、氯化物、硫酸盐、硫化物、硒、氟、氰化物、铁盐、重金属、砷盐、铵盐、易炭化物、干燥失重、炽灼残渣、水分测定、溶液颜色与澄清度以
12、及有机溶剂残留量等。 遵循平行操作原则氯化物检查法：原理：对照法。 利用氯化物在硝酸酸性溶液中与硝酸银试液作用，生成氯化银胶体微粒而显白色混浊液，与一定量标准氯化钠溶液在相同条件下生成的氯化银混浊程度比较，浊度不得更大。 Cl-+Ag+AgCl(白)注意事项： 氯化物浓度以 50ml 溶液中含 5080g 的 Cl 为宜，因为此时浊度梯度好。 加硝酸可避免弱酸银盐如碳酸银、磷酸银以及氧化银沉淀的干扰，加速 AgCl 的生成并产生较好的乳光浑浊 酸度要求：50ml 供试溶液中含稀硝酸 10ml 为宜 供试品溶液有颜色时的处理方法：内消色法：4 / 31 供试品溶液显碱性的处理方法：先中和成中性后
13、再检查（加硝酸） 供试品溶液不澄清的处理方法：过滤，之前要用硝酸冲洗滤纸。硫酸盐检查法原理：药物中存在的微量硫酸盐与氯化钡在盐酸酸性介质中生成硫酸钡白色混浊，与一定量标准硫酸钾溶液在相同条件下生成的混浊比较，浊度不得更大。 注意事项：盐酸可防止碳酸钡或磷酸钡等沉淀的生成，酸度过大可使硫酸钡溶解，以 50ml 供试溶液中含稀盐酸2ml 为宜。铁盐检查法方法：硫氰酸盐法 Ch.P、USP；巯基醋酸法 BP原理：铁盐在盐酸酸性溶液中与硫氰酸铵溶液作用生成红色可溶性的硫氰酸铁配离子，与一定量标准铁溶液用同法处理后进行比色。 Fe3+ +nSCN-Fe(SCN)n 3-n (n=16)注意事项： 准铁贮
14、备液的配制：用硫酸铁铵FeNH 4(SO4)212H2O配制成标准铁储备液，并加入硫酸防止铁盐水解，使易于保存。 铁盐的最适检测浓度范围：目视比色时以 50ml 溶液中含有 10-50gFe3+为宜，所显色泽梯度明显。 应在盐酸酸性条件下进行：加入盐酸可防止 Fe3+水解，并避免弱酸盐如醋酸盐、磷酸盐、砷酸盐等的干扰 入过硫酸胺的目的：为了氧化 Fe2+为 Fe3 ，同时可防止由于光照使硫氰酸铁还原或分解褪色。 2 Fe2 （NH 4） 2S2O8 2 Fe3 （NH 4）2SO 4SO 42 为了提高灵敏度或供试管与对照管色调不一致时，可用正丁醇或异戊醇提取后，分取醇层比色。例：枸橼酸钠中铁
15、盐的检查 硫氰酸铵过量：增加配位离子的稳定性，提高反应灵敏度，还能消除 Cl-、PO 43-、SO 42-、枸橼酸跟离子等与铁盐形成配位化合物而引起的干扰。重金属检查法：重金属：系指在实验条件下能与硫代乙酰胺或硫化钠作用显色的金属杂质。如银、铅、汞、铜、铬、镉、铋、锑、砷、锌、钴、镍等。以铅的限量表示重金属限度。第一法：硫代乙酰胺法；第二法：炽灼后的硫代乙酰胺法；第三法：硫化钠法；第四法：微孔滤膜法 第一法 硫代乙酰胺法适用范围：溶于水、稀酸和乙醇的药物。此法最常用。原理：硫代乙酰胺在弱酸性条件（醋酸盐缓冲液 pH3.5）下水解产生硫化氢，与微量重金属离子生成黄色到棕黑色的硫化物混悬液，与一定
16、量标准铅溶液(PbNO 3)经同法处理后所呈颜色比较，颜色不得更深（比色） 。CH3CSNH2+H2OCH3CONH2+H2S; Pb2+H2SPbS+2H + (Ph3.5)注意事项： 本反应的 pH 对显色有很大影响。用醋酸盐缓冲溶液控制 pH 值在 33.5 ，硫化铅的沉淀比较完全。酸度增大，呈色变浅甚至不呈色，强酸处理过的溶液必须先用 NH3H2O 调 pH 值至中性。 试品溶液有颜色的处理：内消色法、外消色法外消色法：在对照管溶液中滴加少量稀焦糖溶液（取蔗糖用小火加热后，再混悬于水中做成。随加热温度与时间的不同，其水溶液呈黄至红棕色。根据供试液颜色，适当掌握蔗糖的加热程度） ，使之与
17、供试品溶液管的颜色一致。 供试品中若有微量高铁盐存在，会氧化硫化氢生成单质硫，干扰比色。可在两管中加入抗坏血酸0.51.0g，使 Fe3+还原为 Fe2 ，再依法检查。第二法 炽灼后的硫代乙酰胺法适用范围：适用于含芳环、杂环以及不溶于水、稀酸、乙醇及碱的有机药物。5 / 31注意事项： 温度对重金属检查影响较大，温度越高重金属损失越多，应控制炽灼温度 500-600（高温易挥发）. 残渣加硝酸加热处理后，必须蒸干，除尽氧化氮，否则亚硝酸可氧化硫化氢析出硫，影响比色。 含钠及氟的有机药物应用铂坩埚、石英坩埚或硬质玻璃蒸发皿，因可腐蚀瓷坩埚带入重金属。第三法 硫化钠法适用范围：适用溶于碱而不溶于稀
18、酸或在稀酸中生成沉淀的药物。如磺胺类、巴比妥类。原理：在碱性介质中，以硫化钠为显色剂，使 Pb2+生成 PbS 微粒的混悬液，与一定量的标准铅溶液经同法处理后所呈颜色比较，不得更深（比色） 。第四法 微孔滤膜法 适用范围：适用于重金属限度低（含重金属杂质 2-5g）的药物。原理：同第一法砷盐检查法 As 注意点：药物中的砷盐多由生产过程中使用的无机试剂引入 砷盐检查法的常用方法：古蔡氏法 Ch.P、BP、 JP；二乙基二硫代氨基甲酸银法（Ag（DDC）法）Ch.P、USP； 白田道夫法 Ch.P古蔡氏法（Gutzeit）原理：利用金属锌与酸作用产生新生态的氢，与药物中的微量砷盐反应生成具有挥发
19、性的砷化氢，遇溴化汞试纸产生黄色至棕色的砷斑，与一定量标准砷溶液（临用新配，2ml）在同样条件下生成的砷斑比较，判定药物中砷盐的限量。Zn+HClH2+AsO32+(As3+)AsH3 As3+ +3Zn +3H+ 3Zn 2+ + AsH3 AsO33 +3Zn +9H+3Zn 2+ +3H2O + AsH3 AsO43 +4Zn+11H+4Zn 2+ +4H2O+ AsH3 AsH3 + 3HgBr23HBr + As(HgBr)3 (黄色) 2As(HgBr)3+ AsH33AsH(HgBr) 2 (棕色) As(HgBr)3+ AsH33HBr + As2Hg3 (棕黑色)碘化钾和氯化
20、亚锡的作用碘化钾还原 As5+为 As3+及 Fe3+还原为 Fe2+，加快反应速度。 碘化钾被氧化生成的 I2 又可被氯化亚锡还原为 I-，I -与反应中生成的 Zn2+能形成稳定的配位离子有利于生成砷化氢的反应不断进行。 （交替还原作用）AsO43+2I-+H+AsO33-+I2+H2OAsO43+Sn2+H+ AsO33-+Sn4+H2OI2+ Sn2+2I-+ Sn4+4I-+Zn2+ZnI4氯化亚锡及碘化钾可抑制锑化氢生成，防止锑斑形成干扰。在实验条件下，100gSb 存在不干扰测定。 氯化亚锡与锌作用生成锌锡齐，在锌表面形成形成局部电池，使氢气均匀而连续地发生。 SnCl2 + Z
21、n Zn-Sn醋酸铅棉花作用：吸收硫化氢气体，也可控制砷化氢以是以速度通过。锌粒及供试品可能含有少量硫化物中国药典（2005 年版）附录规定用醋酸铅棉花 60mg，装管高度约 60mm80mm。HgBr2试纸：与砷化氢作用较氯化汞试纸灵敏，但其砷斑不稳定，在反应中应保持干燥及避光，且立即与标准品比较。其他：供试品若为硫化物、亚硫酸盐、硫代硫酸盐等，加硝酸处理，过量的硝酸及产生的氮的氧化物应蒸干除尽。枸橼酸铁铵中砷盐的检查供试品若为铁盐，需加酸性氯化亚锡，将高铁离子还原为低铁离子后再检查。共价键结合的砷化物：先要有机破坏，破坏方法有碱破坏法或酸破坏法，ChP 常采用前者。6 / 31药物为锑盐时
22、，产生灰色锑斑，干扰比色，应改用白田道夫法。原理：氯化亚锡在盐酸中能将砷盐还原成棕褐色的胶态砷，与一定量标准砷溶液用同法处理后的颜色进行比较，即可判断供试品的含砷量。 2As3+ + 2SnCl + 6HCl2As + 2SnCl4 + 6H+用于有锑（灰色锑斑）干扰时的补充法。优点：不受锑干扰. 缺点：灵敏度低，若加入少量 HgC12,灵敏度提高 炽灼残留检查法（700oC800oC）恒重：供试品连续两次干燥或炽灼后的重量差异在 0.3mg 以下 。炽灼残渣：系指有机药物经炭化或挥发性无机药物加热分解后，高温炽灼，所残生的非挥发性无机杂质的硫酸盐。 此法用于控制有机药物经炭化或挥发性无机药物
23、中非挥发性无机杂质。炽灼至恒重的第二次称重应在继续炽灼 30 分钟后进行。干燥失重测定法干燥失重：系指药物在规定的条件下，经干燥后所减失的量，以百分率表示。干燥失重主要检查药物中的水分及其他挥发性物质。干燥至恒重的第二次及以后各次称重应在规定的条件下继续干燥 1 小时后进行1. 常压干燥法：适用于受热较稳定的药物。与干燥至恒重的称量瓶中，105 oC 下干燥平铺于称量瓶，符合厚度要求，放冷再称重；含较多结晶水的药物，105 oC 不易除去结晶水，可提高温度（硫酸吗啡） ；某些药物中含有较大量的水分，熔点又低，可先低温加热，在慢慢加热至 105oC 干燥至恒重（硫代硫酸钠） ；某些易吸潮或受热发
24、生相变而达不到恒重的药物，可采用一定温度下、干燥一定时间所减失的重量代表干燥失重。2. 减压干燥法与恒温减压干燥法：适用于熔点低或受热分解的供试品。木糖醇3. 干燥剂干燥法： 适用于受热易分解或易生华的供试品。常用干燥剂：硅胶、硫酸、五氧化二磷.4. 热分析法：残留溶剂测定法:ICH 按有机溶剂毒性的程度分为三类：一类:应尽量避免使用；二类:应限制使用；三类:推荐使用氯仿（二类） 、甲醇（二类） 、吡啶（二类） 、苯（一类） 、乙酸乙酯（三类）气相色谱法检查有机溶剂：第一法：溶液直接进样法（填充柱） ； 第二法：顶空进样法（毛细管柱）水分测定法 药品中的水分包括结晶水和吸附水。 中国药典(20
25、05 年版) 采用 费休氏法 和 甲苯法 测定药物中的水分，尤以费休法为主。 利用 I2 氧化 SO2 为 SO3 时，需要一定量的水分参加反应。第四章 药物定量分析与分析方法验证一、定量分析样品的前处理方法前处理对象：1.含卤素（F，Cl，Br，I） ；2.含金属（Ca，Fe，Hg，Zn） ；3.Se，P，S不惊又急破坏的分析方法：直接测定法；经水解后测定法；经氧化还原后测定法直接测定法：配位滴定法、氧化还原滴定法适用于金属原子不直接与碳原子相连的含金属有机药物或某些 C-M 键结合不牢固的有机金属药物。配位滴定法：EDTA-2Na(乙二胺四乙酸二钠)滴定二价金属离子（如葡萄糖酸钙）氧化还原
26、滴定法：如富马酸亚铁（用硫酸铈滴定） 、葡萄糖酸锑纳（碘化钾还原，再用硫代硫酸钠滴定）7 / 31经水解后测定法碱水解后测定法：如三氯叔丁醇；酸水解后测定法：如硬脂酸镁、十一烯酸西醇经还原分解后测定：如泛影酸（加氢氧化钠溶液 30ml 与锌粉 1.0g，加热回流 30 分钟. 用硝酸银滴定液滴定）经有机破坏的分析方法：湿法破坏；干法破坏湿法破坏：硝酸-高氯酸法、硫酸-硝酸法、硫酸- 硫酸盐法（凯氏定氮法） 、硝酸- 高锰酸钾法凯氏定氮法：是最常用来测定氮含量的一种方法。 步骤：消解；蒸馏；吸收及滴定。 用凯氏烧瓶；需空白试验。 适用于测定有氨基或酰胺结构的药物。干法破坏：高温炽灼法；氧瓶燃烧法
27、适用于湿法不易破坏完全的有机物以及某些不能用硫酸进行破坏的有机药物。不适用于含易挥发性金属（如汞、砷等）有机药物的破坏。二、定量分析方法特点容量分析法（滴定法）特点：所用仪器廉价易得，操作简便、快捷，方法耐用性高，测定结果准确，通常 RSD盐酸 硝酸、硫酸；2)酸度： 盐酸过量：加速反应，芳胺:盐酸1 ：2.56（mol) ；重氮盐在酸介质中稳定；防止生成偶氮氨基化合物而影响测定结果。酸度过大：阻碍芳伯胺基的游离，可使亚硝酸分解3)温度：室温（1030） 。升高 10oC,重氮化反应速度加快 2,5 倍，分解速度也加速 2 倍。15 oC 以下为宜 4)速度：滴定管尖端插入液面下，搅拌下进行，
28、不宜太快（重氮化反应较慢） 5)电极的活化指示终点方法：永停滴定法（ChP，铂铂电极） 、电位滴定法、外指示剂法（KI-淀粉糊剂或试纸） 、内指示剂法（中性红）.含量测定芳胺类非水滴定法：范围：盐酸丁卡因、盐酸利多卡因、盐酸妥卡尼、盐酸布比卡因。方法：溶剂：冰醋酸（盐酸丁卡因还加醋酐） ；指示剂：结晶紫（盐酸布比卡因为萘酚苯甲醇） ；以16 / 31N NNH2O NOCH3 NO2CH3NHH3COC3高氯酸液滴定至蓝色为终点。加入氯化高汞以消除氢卤酸的干扰。UV法、HPLC 法、高效毛细管电泳法（测体内药物）铈量法：对乙酰氨基酚加酸水解得对氨基酚，对氨基酚可被四价铈盐定量地氧化为对醌亚胺，
29、可采用硫酸铈铵或硝酸铈铵标准液滴定，以邻二氮菲-亚铁(II)为指示剂。 非水滴定法：条件：溶剂：冰醋酸+醋酸汞（消除氢卤酸的干扰）+【醋酐（药物碱性太弱时，如硫酸沙丁胺醇） 】滴定液：高氯酸指示剂：结晶紫（仅盐酸甲氧明为在萘酚苯甲醇） （硫酸特布他林及盐酸苯乙双胍采用电位法）注意：在低温时可防止氨基被乙酰化，所以加入冰醋酸溶解后，应在放冷的条件下再加醋酐溴量法：盐酸去氧肾上腺素和重酒石酸去甲肾上腺素。原理：在酸性溶液中酚羟基的邻对位活泼氢能与过量得溴定量的反应生成溴代反应，再用碘量法测定剩余溴，根据消耗的刘赛硫酸钠滴定液量，算得含量。 （终点加淀粉指示剂，蓝色消失）提取酸碱滴定：方法：提取蒸干
30、残渣加中性乙醇标准酸滴定液直接滴定 提取液加过量标准酸滴定液蒸去有机溶剂标准碱滴定液回滴苯乙胺类UV和比色法、HPLC 法、GC-MS 法（测体内药物）第八章 杂环类药物的分析杂环化合物：碳环中夹杂有非碳原子的环状有机化合物。其中的非碳原子称为杂原子，多为氮、氧、硫等。如：吡啶类、喹啉类、托烷类、吩噻嗪类、苯并二氮杂卓类 吡啶类吡啶 异烟肼 尼可刹米 硝苯地平喹啉类喹啉类基本结构 硫酸奎宁 硫酸奎尼丁 盐酸环丙沙星托烷类硫酸阿托品 氢溴酸东莨菪碱 硫酸莨菪碱莨菪碱为阿托品的左旋体吩噻嗪类吩噻嗪母核 盐酸异丙嗪 盐酸氯丙嗪NSRR12354678910R：CH2(CH3)NCH33lR：-HR：
31、(CH2)3NCH3CH3lR： -Cl苯并二氮杂卓类NNOOHFH ,Cl2O17 / 311234567环庚三烯+卓N1234567,-二 氮 杂 卓 N1234567,-苯 并 二 氮 杂 卓89地西泮 阿普唑仑 奥沙西泮 氯氮卓吡啶环的特性：可发生开环反应。弱碱性：吡啶环上的氮原子为碱性氮原子。强弱从 N 上的取代基是供电子还是吸电子基团，空间位阻两方面考虑。季铵 脂肪胺脂环铵 芳香脂胺氨（NH3）芳胺 N-芳杂环环酰铵（近中性） ；脂肪胺中：仲铵伯铵 叔铵； 芳胺中：苯胺二苯胺三苯胺。吡啶类 取代基的个性1）还原性：异烟肼吡啶环 位上被酰肼取代，酰肼基具有较强的还原性，并可与某些含羰
32、基的试剂发生缩合反应。 2）吡啶环 位上若被酰氨基取代，虽然酰氨基的化学性质不甚活泼，但可遇碱水解。碱 性：喹啉碱脂环氮碱性较强，与强酸形成稳定盐，而喹啉环芳环氮碱性较弱不与硫酸成盐旋 光 性：硫酸奎宁为左旋体，硫酸奎尼丁为右旋体喹啉类 荧光特性：硫酸奎宁和硫酸奎尼丁的稀硫酸溶液均显蓝色荧光，喹诺酮药物无荧光。托烷类：水解性、碱性、旋光性（氢溴酸东莨菪碱为左旋体；阿托品为外消旋体）紫外和红外吸收：紫外吸收主要由母核共轭三环的 系统所产生。三个吸收峰值（205nm、254nm、300nm）R不同，会引起吸收峰发生位移。R 对 max 也有一定影响，位移大小与侧链长短有关。母核二价硫易被氧化生成砜
33、（=SO 2）和亚砜（=SO）杂质，具四个吸收峰氧化呈色：二价硫易被氧化，遇不同氧化剂（硫酸、硝酸、溴水、三氯化铁） ，被氧化成砜、亚砜因取代基不同而呈现不同颜色。 与金属离子络合呈色：母核中未被氧化的 S 原子，可与金属离子形成有色配位化合物，其氧化产物砜和亚砜则无此反应。 吩噻嗪类弱碱性：吩噻嗪类药物母核中的氮原子碱性极弱，10 位取代基的烃胺（-NR 2） 、哌嗪基及哌啶基具有一定的碱性。性质苯并二氮杂卓类弱 碱 性：二氮杂卓七元环上氮原子具有强碱性，但与苯基并合使其碱性降低，可用非水溶液滴定法。水 解：此类药物的环通常较稳定，但在强酸性溶液中可水解，形成相应的二苯甲酮衍生物。光谱特性：
34、本类药物 pKa 值与其在不同 pH 介质中形成的不同分子形式有关，而分子形式影响其光谱特性。1）吡啶环的开环反应：吡啶环 、位未取代， 或 位被羧酸衍生物所取代的异烟肼和尼可刹米。开环产物可与某些试剂缩合生成有色物质。戊烯二醛反应：溴化氰加到吡啶环，使环上氮原子由 3 价转变成 5 价时，吡啶环水解，形成戊烯二醛后再与芳香第一胺缩合。二硝基氯苯反应：无水条件下将吡啶及其某些衍生物与 2,4-二硝基氯苯混合共热或使其热至熔融，冷却后加醇制氢氧化钾溶液将残渣溶解，溶液呈紫红色。 鉴别吡啶类 2）酰肼基团的反应：酰肼基团具有还原性，并可与芳醛缩合。 异烟肼还原反应：与氨制硝酸银反应，有黑色浑浊出现
35、，在管壁上产生银镜并产生气体。 缩合反应：异烟肼中未被取代的 酰肼基 与 芳醛 缩合形成黄色异烟腙，其有固定的熔点，可用以鉴别。 18 / 313）二氢吡啶的解离反应：二氢吡啶类药物的丙酮或甲醇溶液与碱作用，二氢吡啶环 1、4 位氢均可发生解离，形成 - 共轭而发生颜色变化。4）形成沉淀的反应：吡啶环含第三氮原子，呈碱性，可与重金属盐类（如氯化汞、硫酸铜、碘化铋钾）及苦味酸等沉淀剂发生沉淀反应。 与氯化汞的反应：白色，异烟肼、尼可刹米；与硫酸铜的反应：淡绿色，加热变成红棕色。尼可刹米与碘化铋钾反应：异烟肼、碘解磷定可发生此反应；尼可刹米不与碘化铋钾生成沉淀5）分解产物的反应：与无水碳酸钠或氢氧
36、化钙共热，可发生脱羧降解，并有吡啶臭味逸出。尼可刹米6）紫外吸收光谱特征绿奎宁反应：6-位含氧喹啉衍生物（奎宁、奎尼丁）氯水（或溴水）氧化氯化氨水，缩合绿色的二醌基亚胺的铵盐光谱：UV 鉴别盐酸环丙沙星； 荧光光谱：硫酸奎尼丁和硫酸奎宁在稀硫酸中显蓝色荧光（盐酸环丙沙星则没有） ，硫酸奎尼丁加稀硫酸，再加几滴盐酸，荧光消失； IR. 喹啉类无机酸盐：鉴别药物中的硫酸根、盐酸根。托烷生物碱一般鉴别试验：（Vitaili 反应）酯键水解生成莨菪酸+发烟硝酸三硝基衍生物+KOH 醇溶液+固体 KOH有色醌型产物（深紫色）氧化反应：水解生成莨菪酸+硫酸 +重铬酸钾，加热产生苯甲醛（苦杏仁臭味）沉淀反应
37、：阿托品+氯化汞醇试液 黄色；东莨菪碱+氯化汞醇试液 白色复盐托烷类硫酸盐与溴化物反应：硫酸根与溴酸根的鉴别紫外和红外吸收光谱法显色反应：氧化呈色；与钯离子络合显色（二价硫）吩噻嗪类 分解产物的反应：癸氟奋氖静 600oC 炽灼，分解出氟化物+ 酸性茜素锆试液由红色转变为黄色化学鉴别沉淀反应：氯氮卓+碘化铋试液 橙红色；盐酸氟西泮或氯硝西泮 +碘化铋钾实验 橙红色（后者放置沉淀颜色加深） 水解后重氮化-偶合：氯氮卓、奥沙西泮硫酸-荧光反应：硫酸溶解，365nm 紫外灯下显色地西泮（黄绿色荧光） 、氯氮卓（黄色） 、艾司唑仑（亮绿色） 、硝西泮（淡蓝色）分解产物反应：氧瓶燃烧破坏，分解出氯化氢，
38、碱吸收鉴别。苯并二氮杂卓类 紫外光谱和红外光谱法，色谱法（TLC）吡啶类异烟肼：游离肼的检查：肼是诱变剂和致癌物质（原料或降解） 。 TLC、比浊法、差示分光光度法 尼可刹米：有关杂质检查：N-乙基烟酰胺及结构不明有关物质，TLC 高低浓度对比法。硝苯地平：有关杂质检查：HPLC 法喹啉类硫酸奎宁：酸度（控制酸性杂质） 、氯仿-乙醇中不溶物、其他金鸡纳碱（HPLC 或 TLC 的主成分自身对照品法或杂质对照品对照法） 吩噻嗪类有关物质检查：在生产和贮藏过程中易引入有关物质（砜类化合物） ，TLC 或 HPLC 主成分自身对照品法检查苯并二氮杂卓类：有关物质（生产、储藏中引入的中间体、副产物、分
39、解产物，如（2-氨基-5 氯苯基）苯甲酮）含量测定非水溶液滴定法：原理：实际上是置换滴定，即强酸滴定液置换出与游离碱结合的较弱的酸。溶剂：冰醋酸、冰醋酸醋酐滴定剂：高氯酸的冰醋酸溶液或二氧六环溶液注意事项：1.适用范围：pK b8 的有机弱碱药物及其盐类；pK b 为 810 时，冰醋酸作溶剂；pK b 为 1012 时，冰19 / 31醋酸+醋酐作溶剂； pKb12，醋酐作溶剂。冰醋酸加适量甲酸，突跃显著增大。2.酸根的影响：醋酸介质中的酸性：高氯酸氢溴酸硫酸盐酸硝酸磷酸有机酸方法：加入定量醋酸汞冰醋酸溶液，形成难电离卤化汞，消除卤酸根干扰硫酸可直接滴定至硫酸氢盐为止，目视终点或电位滴定指示
40、终点灵敏度差，醋酐代替冰醋酸作指示剂，灵敏度可提高。硝酸盐时，电位滴定指示终点为宜。3.计量加入醋酐：由于冰醋酸及高氯酸均含有水分，水分的存在可能影响滴定突跃，所以应计量加入醋酐。 4.滴定剂的稳定性：溶剂醋酸具有挥发性，且膨胀系数较大，因此温度和贮存条件都影响滴定剂的浓度。 （温差大于 10oC，重新标定）5.终点指示方法：终点确定，常用电位法和指示剂法。高磷醋酸滴定常用结晶紫、橙黄 IV、萘酚苯甲醇、喹哪啶红、孔雀绿等，少数采用电位法指示终点。 6其他干扰：碱化处理分离出游离碱，再用高氯酸滴定应用 ：有机碱及其盐类及有机酸碱金属盐类氢卤酸盐-加入醋酸汞的冰醋酸溶液 硫酸盐-判断反应摩尔比
41、硝酸盐-电位法指示终点 有机酸盐,磷酸盐- 直接滴定氧化还原滴定法1)铈量法：酸性介质，二氢吡啶类（1:2，邻二氮菲指示液，橙红转变为淡蓝或无色）吩噻嗪类药物在酸性介质中可以用硫酸铈滴定液直接滴定，利用药物自身颜色变化指示终点。没没有副反应，专属性较强2)剩余碘量法：碘的氧化力较弱，反应不易完全，用于制剂分析时，易受辅料干扰，使测定结果偏高，所以方法较少使用。3)剩余溴量法：受诸多因素（酸度、温度、速度、放置时间等）影响，操作繁琐、准确度差。 4)溴酸钾法：异烟肼.酸性介质中，甲基橙甲指示剂，硝酸钾滴定至粉红色消失（3:2）酸性染料比色法：紫外吸收弱、标示量低的有机碱性药物制剂。如硫酸阿托品原
42、理：水相（一定 PH）B + H+=BH+ ； HIn=H+ + In-； BH+ + In-=(BH+In-)水相 =(BH+In-)有机相测定条件：水相最佳 pH值：pH 过低，抑制酸性染料解离，使 In-浓度太低，影响离子对形成；pH 过高，有机碱药物呈游离状态，离子对浓度低。 酸性染料及其浓度：应能与有机碱药物定量地结合，生成的离子对在有机相中溶解度大且在 max处有较高吸收，染料在有机溶剂中不溶或很少溶解。增加酸性染料的浓度，可以提高测定的灵敏度。但如果浓度太高，则易产生严重的乳化层，且不易去除，往往影响测定结果。有机溶剂的选择：应选择对有机碱药物与酸性染料形成的离子对提取率高，不与
43、或极少与水混溶，或能与离子对形成氢键的有机溶剂作为溶剂。 水分影响：水相中有过量的有色酸性染料，而影响测定结果；水分的混入使氯仿混浊，而影响比色测定。 有色杂质的排除：在加入供试品之前，将缓冲液与酸性染料的混合液先用所选用的有机溶剂提取，以便除去酸性染料中的有色杂质。 紫外分光光度法：如盐酸氯丙嗪、奥沙西泮1)直接分光光度法：盐酸氯丙嗪注射液处方中加有 VitC 作抗氧剂，它在盐酸氯丙嗪 max 254nm 处有吸收，因而改用次最大波长 306nm 作为测定波长。2)萃取后分光光度法：碱性介质中，盐酸氯丙嗪转化为游离碱，被乙醚定量提取，再将乙醚提取液，用盐酸溶液提取，使氯丙嗪再转化为盐酸氯丙嗪
44、，在 254nm 处测定。3)萃取-双波长分光光度法：氯丙嗪在 254nm 有最大吸收，而在 277nm 无吸收；其氧化物在 254nm 、277nm 波长处均有吸收，且两处吸收度相等。20 / 314)二阶导数分光光度法：吩噻嗪类药物钯离子比色法：吩噻嗪类药物在适当 pH 值溶液中可与金属钯离子形成有色络合物，可借以进行比色测定。HPLC法、GC 法、液-质联用法第九章 维生素类药物的分析脂溶性维生素：A、D 、E、K 等； 水溶性维生素：B、C、泛酸等。维生素 A 维生素 A（A 1） 去氢维生素 A（A 2） 去水维生素 A（A 3）CH2O CH2OR：-H: VitA醇； -COCH
45、3: VitA醋酸酯； -COC 15H31:VitA 棕榈酸酯VitA为具有一个共轭多烯醇侧链的环己烯。天然 VitA主要是全反式 VitA维生素 D2 维生素 D3维生素 D2，又名骨化醇或麦角骨化醇为 9,10-开环麦角甾-5,7,10(19） ，22-四烯-3-醇；维生素 D3，又名胆骨化醇为 9,10-开环胆甾-5,7,10(19 三烯-3-醇；维生素 D2比维生素 D3在侧链上多一个双键，C24上多一个甲基CH2 CH3HOCH3 3 H CH2 CH3HOCH3 3 维生素 E为苯并二氢呋喃醇衍生物，苯环上有一个乙酰化的酚羟基，又名生育酚醋酸酯右旋体（天然品） ； 消旋体（合成品
46、）-生育酚活性最强 OCH3COH3CO CH3 CH3CH3 CH3 CH3CH3CH312345678 1 3 5 7 9 1 13维生素 B1复合维生素 B是一组水溶性维生素，包括硫胺、核黄素、菸酸、菸酰胺、生物素、泛酸、叶酸等。维生素 B1：又名盐酸硫胺，由氨基嘧啶环和噻唑环通过亚甲基连接而成的季铵化合物。NNH3C NH2CH2NSCH3CH22OHCl-HCl.+123456 12345C12H17ClN4OS HCl=37.2.维生素 C：又名 L-抗坏血酸L型右旋体活性最强；具烯二醇、内酯环结构；有两个手性碳OHOOH5 OCH2OCH H12346 C6H8O6=176.13
47、溶解性：乙醇中微溶，水中不溶性质维生 不稳定性：多个不饱和键，易被氧化（生成 VitA 酸、VitA 醛或环氧化合物） ，易被紫外光裂解（无活CH2ORC H3 C H3 C H3C H3C H398765432121 / 31性聚合物，鲸醇） ，加热或与金属离子共存时氧化加快，A 1 对酸不稳定（易脱水变成 A3） ，A1 和维生素 A 棕榈酸酯溶于植物油中供临床使用，A 1 需密封、避光保存，还需充氮气或加合适抗氧剂。紫外吸收特性：有共轭多烯醇的侧链，在 325328nm 处有最大吸收。 （鉴别和含量测定）素A与三氯化锑呈色：在氯仿中能与三氯化锑试剂作用，产生不稳定的蓝色。 （鉴别和比色法
48、测定含量） 性状：无色针状结晶或白色结晶性粉末；遇光空气易变质溶解性：植物油中略溶，水中不溶不稳定性：多个烯键，遇光、空气、氧化剂变质，效价降低，毒性增强；对酸不稳定。旋光性：D 2 有 6 个手性碳，D 3 有 5 个。呈色反应: 本品的氯仿溶液加醋酐与硫酸，初显黄色，渐变红色，迅即变为紫色，最后变为绿色。维生素D紫外吸收特性：265nm溶解性：为黄色或黄色透明的粘稠液体，水中不容；水解性：苯环上有乙酰化的酚羟基，在酸性或碱性溶液中加热可水解生成游离生育酚。氧化性：无氧条件下对热稳定，但对氧敏感，遇光、空气可被氧化。其水解产物游离生育酚在有氧或其他氧化剂存在时，极易氧化（生成 - 生育醌和 -生育酚二聚体） 。维生素E 紫外吸收特性：其无水乙醇溶液在 284nm 处有最大吸收，254nm 有最小吸收。 溶解性：水中易溶，乙醇中微溶，水溶液显酸性。硫色素反应：噻唑环在碱性介质中开环，再与嘧啶环上的氨基环合，经铁氰化钾等氧化剂氧化形成具有荧光的硫色素（溶于正丁醇呈蓝色荧光）紫外吸收特性：246nm 处有最大吸收。维生素B1与生物碱沉淀试剂反应 ：有两个杂环(嘧啶环和噻唑环)，鉴别与含量测定。溶解性：水中易溶，显酸性，3 位羟基酸性比 2 位强酸性：结构中的二烯醇基，C3-OH 由于受共轭效应的影响，酸性较强，C2-OH 酸性较弱，故一般表现为一元酸旋光性：两个手性碳原子（C4，
