1、培养基大全三联菌体 2009-12-03 13:33:15 阅读 30 评论 0 字号：大中小 1营养肉汤成分：蛋白胨 10g，牛肉膏 3g，氯化钠 5g，蒸馏水 1000mL，pH7.4。制法：按上述成分混合，溶解后校正 pH，121高压灭菌 15min。2营养琼脂培养基成分：蛋白胨 10g，牛肉膏 3g，氯化钠 5g，琼脂 17g，蒸馏水 1000mL，pH7.2。制法：将除琼脂外的各成分溶解于蒸馏水中，校正 pH，加入琼脂，分装于烧瓶内，121，15min 高压灭菌备用。3MRS 培养基成分：蛋白胨 10g，牛肉膏 10g，酵母粉 5g，K2HPO4 2g，柠檬酸二铵 2g，乙酸钠 5g
2、，葡萄糖 20g，吐温 80 1mL，MgSO4 .7H2O 0.58g，MnSO4 4H2O 0.25g，（琼脂 1520g），蒸馏水 1000mL。制法：将以上成分加入到蒸馏水中，加热使完全溶解，调 pH 至 6.26.4，分装于三角瓶中，121,灭菌 15min。4脱脂乳培养基成分：牛奶，蒸馏水。制法：将适量的牛奶加热煮沸 2030min，过夜冷却，脂肪即可上浮。除去上层乳脂即得脱脂乳。将脱脂乳盛在试管及三角瓶中，封口后置于灭菌锅中在 108条件下蒸汽灭菌 1015min，即得脱脂乳培养基。5培养基 A成分：蛋白胨 10.0g，酵母提取物 1.0g，葡萄糖 10.0g，NaCL5.0g
3、，琼脂 15.0g，水 1000mL。制法：将以上成分加入到蒸馏水中，加热使完全溶解，调 pH 至 7.07.2，分装于三角瓶中，121，灭菌 15min。6PTYG 培养基成分：胰胨 Tryptone（Oxoid）5g，大豆蛋白胨 5g，酵母粉（Oxoid ）10g，葡萄糖 10g，吐温 80 0 1mL，琼脂1520g，L-半胱氨酸盐酸盐 0.05g，盐溶液 4mL。制法：将以上成分加入到蒸馏水中，加热使完全溶解，调 pH 至 6.87.0，分装于三角瓶中，115灭菌 30min。盐溶液制备：无水氯化钙 0.2g， K2HPO4 1.0g，KH2PO4 1.0g，MgSO4 。7H2O 0
4、.48g，NaCO3 10g，NaCL 2g，蒸馏水 1000mL，溶解后备用。7豆芽汁液体培养基成分：豆芽汁 10mL，磷酸氢二铵 1g，KCL 0.2g，MgSO4.7H2O 0.2g，琼脂 20g。制法：将以上成分加入到蒸馏水中，加热使完全溶解，调 pH 至 6.26.4，分装于三角瓶中，0.04%的溴甲酚紫酒精溶液（黄色 5.26.8 紫色）作为指示剂，115 灭菌 20min。豆芽汁制备：将黄豆芽或绿豆芽 200g 洗净，在 1000mL 中煮沸 30 min，纱布过滤得豆芽汁、补足水分至1000mL。8麦芽汁琼脂培养基成分：优质大麦或小麦，蒸馏水，碘液。制法：取优质大麦或小麦若干，
5、浸泡 612h，置于深约 2cm 的木盘上摊平，上盖纱布，每日早、中、晚各淋水一次，麦根伸长至麦粒两倍时，停止发芽晾干或烘干。称取 300g 麦芽磨碎，加 1000mL 水，38保温 2h，再升温至 45，30min，再提高到 50，30min，再升至60，糖化 11.5h。取糖化液少许，加碘液 12 滴，如不为蓝色，说明糖化完毕，用文火煮半小时，四层纱布过滤。如滤液不清，可用一个鸡蛋清加水约 20mL 调匀，打至起沫，倒入糖化液中搅拌煮沸再过滤，即可得澄清麦芽汁。用波美计检测糖化液浓度，加水稀释至 10 倍，调 pH56，用于酵母菌培养；稀释至 56 倍，调 pH7.2，可用于培养细菌，12
6、1灭菌 20min。9查（察）氏培养基成分：NaNO3 2g，K2HPO4 1g，MgSO4. 7H2O 0.5g，KCL 0.5g，FeSO4.7H2O 0.01g，蔗糖 30g，琼脂1520g，蒸馏水 1000mL，pH 值自然。制法：加热溶解，分装后 121灭菌 20min。10马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）成分：马铃薯（去皮）200g，葡萄糖（或蔗糖）20g，琼脂 20g，水 1000mL。制法：pH 值自然。将马铃薯去皮、洗净、切成小块，称取 200g 加入 1000mL 蒸馏水，煮沸 20min，用纱布过滤，滤液补足水至 1000mL，再加入糖和琼脂，溶化后分装，121灭菌 20
7、min。另外，用少量乙醇溶解 0.1g 氯霉素，加入1000mL 培养基中，分装灭菌后可用于食品中霉菌和酵母菌计数、分离。11PY 基础培养基成分：蛋白胨 0.5g，酵母提取物 1.0g，胰酶解酪胨 (Trypticase) 0.5g，盐溶液 4.0mL，蒸馏水 1000mL。盐溶液 成分：CaCL2 0.2g，MgSO4.7H2O 0.48g，K2HPO4 1.0g，KH2PO4 1.0g，NaHCO3 10.0g，NaCL 2.0g，蒸馏水 1000mL。制法：加热溶解，分装后 121灭菌 20min。12甘露醇琼脂培养基（MSA）成分：牛肉浸膏 1g，月示胨 NO.3（Difco）10g
8、 ，D- 甘露醇 10g，NaCL 75g，琼脂约 13g，酚红 0.025g，水1000mL，pH7.27.6制法：按量将各成分（酚红除外）混合，加热使完全溶解，调 pH 至 7.40.2。加 1%的酚红溶液 2.5mL，混匀。121高压灭菌 15min13高氏一号（淀粉琼脂）培养基（主用于放线菌、霉菌培养）可溶性淀粉 20g，KNO3 1g，NaCL 0.5g，K2HPO4 0.5g，MgSO4.7H2O 0.5g，FeSO4.7H2O 0.01g，琼脂 20g，蒸馏水 1000mL，pH7.27.4，121 灭菌 20min。14淀粉铵盐培养基 （主要用于霉菌、放线菌培养）可溶性淀粉 1
9、0g，（NH4 ） 2SO4 2g，K2HPO4 lg，MgSO4.H2O lg，NaCL 1g，CaCO3 3g，蒸馏水1000mL，pH7.27.4，121灭菌 20min。若加入 1520g 琼脂即成固体培养基。15麦氏培养基（醋酸钠琼脂培养基）葡萄糖 1.0g，KCL 1.8g，酵母汁 2.5g，醋酸钠 8.2g，琼脂 15g，蒸馏水 1000mL，pH 自然，0.7kg/cm2 灭菌30min。16高盐察氏培养基( 用于霉菌和酵母菌计数、分离用)硝酸钠 2g，磷酸二氢钾 1g，硫酸镁（ MgSO4 7H2O）0.5g ，氯化钾 0.5g，硫酸亚铁 0.01g，氯化钠 60g，蔗糖30
10、g，琼脂 20g，蒸馏水 1000mL，115灭菌 30min。注：分离食品和饮料中的霉菌和酵母可选用马铃薯-葡萄糖-琼脂培养基和/或孟加拉红培养基。分离粮食中的霉菌可用高盐察氏培养基。17糖、醇类发酵基础培养基（1）一般细菌常以休和利夫森二氏培养基蛋白胨 5g，NaCL 5g，K2HPO4 0.2g，糖醇(葡萄糖或其它糖、醇)10g，琼脂 56g，1溴甲酚紫（溴百里香草酚蓝） 3mL，蒸馏水 1000mL，pH7.07.2，分装试管，培养基高度约 4.5cm，115灭菌 20min。（2）芽孢菌培养基(NH4)2HPO4 1.0g，KCL 0.2g，MgSO4.7H2O 0.2g，酵母膏 0
11、.2g，琼脂 56g，糖或醇类 10.0g，蒸馏水1000mL，溴甲酚紫（0.04）15mL，pH7.07.2，分装试管，培养基高度约 45cm，112灭菌 30min。（3）乳酸菌培养基蛋白胨 5g，牛肉膏 5g，酵母膏 5g，吐温 80（Tween 80）0.5mL，糖或醇 10g，琼脂 56 g，蒸馏水（自来水）1000mL，加入 1.6溴甲酚紫溶液约 1.4mL。以上调 pH6.87.0，分装试管，112灭菌 30min。18硝酸盐培养基（硝酸盐还原试验用）蛋白胨 5.0g，KNO3 0.2g, 蒸馏水 1000 mL，pH7.4 ，每管分装 45mL，121灭菌 1520min。吲哚
12、实验培养基：1胰蛋白胨，调 pH7.27.6，分装 1/31/4 试管，115灭菌 30min。19硫化氢试验（纸条法）培养基蛋白胨 10g，NaCL 5g，牛肉膏 10g，半胱氨酸 0.5g，蒸馏水 1000mL，pH7.0 7.4，分装试管，每管液层高度45cm，112灭菌 2030min。另外将普通滤纸剪成 0.51cm 宽的纸条，长度根据试管与培养基高度而定。用510的醋酸铅将纸条浸透，然后用烘箱烘干，放于培养皿中灭菌备用。20尿素培养基( 尿酶试验)成分：蛋白胨 1.0g，葡萄糖 1.0g，NaCL 5.0g，KH2PO4 2.0 g，0.4酚红 3.0mL，琼脂 20.0g，20尿
13、素100.0mL，pH7.17.4 。制法：将除尿素和琼脂以外的成分配好，并校正 pH 值，加入琼脂，加热熔化并分装于三角瓶， 121灭菌15min，冷却至 5055，加入过滤除菌的尿素溶液，分装于灭菌试管内，摆成琼脂斜面备用。21氮源利用基础培养基KH2PO4 1.36g，NaH2PO4 2.13g，MgSO4 7H2O 0.2g，FeSO4.7H2O 0.2g，CaCL2 0.5g，葡萄糖 10.0g，蒸馏水 1000mL。将需要测定的氨基酸、氨态氮（如磷酸氢二氨）、硝态氮（如硝酸钾）加入到上述基础培养基中，使其终浓度为0.050.1，如测定菌不能利用葡萄糖为碳源，可用其它碳源代替（终浓度
14、为 0.20.5），另做一份不加氮源的空白对照，调 pH7.07.2，分装于试管，每管 45mL，112 灭菌 2030min，制备出的培养基要求无沉淀。22甲基红培养基（M.R 及 V-P 试验用）蛋白胨 7.0g，葡萄糖 5.0g，K2HPO4（或 NaCL）5g，水 1000mL，pH7.07.2，每管分装 45mL，115灭菌30min。23动力、靛基质、尿素（MIU）综合培养基 （用于检验细菌运动性、吲哚、尿素酶用）蛋白胨（含色氨酸）30 g，KH2PO4 2g、NaCL 5g、琼脂 3 g、0.2%酚红酒精溶液 2mL、尿素 20g、蒸馏水1000mL。分装于小试管，112灭菌 1
15、5min，灭菌后液体应呈淡黄色。24半固体培养基（用于细菌的动力试验）牛肉膏 5.0g，蛋白胨 10.0g，琼脂 35g，蒸馏水 1000mL，pH7.27.4，熔化后分装试管（8mL）121 灭菌15min，取出直立试管待凝固。25M17 琼脂培养基（分离、培养乳球菌等的选择培养基）植物蛋白胨 5g，酵母粉 5g，聚蛋白胨 5g，抗坏血酸 0.5g，牛肉膏 2.5g，MgSO4 7H2O 0.01g，-甘油磷酸二钠19g，蒸馏水 1000mL，121 灭菌 15min。26蛋白胨水溶液（靛基质试验用）蛋白胨 20.0g，NaCL 5.0g，蒸馏水 1000mL，pH7.4，121灭菌 15m
16、in。27精氨酸双水解酶实验培养基成分：蛋白胨 1g，氯化钠 5g，K2HPO4 0.3g，L-精氨酸 10g，琼脂 10g，酚红 0.01g，蒸馏水 1000mL。制法：除酚红外，将以上各成分溶解，调节 pH7.07.2，加入指示剂，分装试管，培养基高约 45cm，121灭菌20min 备用。28葡萄糖氧化发酵培养基成分：蛋白胨 2g，氯化钠 5g，1溴百里酚蓝水溶液 3mL，琼脂 56g，K2HPO4 0.2g，葡萄糖 1，蒸馏水1000mL。制法：除溴百里酚蓝外，溶解以上各成分，调节 pH 值为 6.87.0，分装试管，用 115灭菌 20min 备用。29假单胞菌选择培养基（PSA）基
17、础成分：多价胨 16g，水解酪蛋白 10g，硫酸钾 10g，氯化镁 1.4g，琼脂 11g，甘油 10mL，蒸馏水1000mL，pH7.10.2。CFC 选择添加物：溴化十六烷基三甲胺 10mg/L，梭链孢酸钠 10mg/L，头孢菌素 50mg/L。制法：先将基础成分加热煮沸使之完全溶解，121，15min 条件下灭菌。冷却到 50备用。当基础培养基冷却到50后加入溶解后过滤除菌的 CFC 补充物，完全混合后倒平板备用。30乳糖胆盐发酵培养基成分：蛋白胨 20g，猪胆盐（或牛、羊胆盐）5g，乳糖 10g，0.04% 溴甲酚紫水溶液 25mL，蒸馏水1000mL，pH7.4 。制法：将蛋白胨、胆
18、盐及乳糖溶于水中，校正 pH，加入指示剂，分装每管 10mL，并放入一个小倒管，115，15min 高压灭菌 .注：双料乳糖胆盐培养基除蒸馏水外，其他成分加倍。31伊红美兰琼脂培养基成分：蛋白胨 20g，乳糖 10g，磷酸氢二钾 2g，琼脂 17g，2%伊红 Y 溶液 20mL，0.65% 美兰溶液 10mL，蒸馏水1000mL，pH7.1 。制法：将蛋白胨、磷酸氢二钾和琼脂溶解于蒸馏水中，校正 pH，分装于烧瓶内，高压灭菌 121，15min 备用。临用时，加入乳糖，并加热溶化琼脂，冷至 5055，加入伊红和美兰溶液，摇匀，倾注平板。32乳糖发酵培养基成分：蛋白胨 20g，乳糖 10g，0.
19、04%溴甲酚紫水溶液 25mL，蒸馏水 1000mL，pH7.4。制法：将蛋白胨、乳糖溶于水中，校正 pH，加入指示剂，按检验要求分装 30mL、10mL 或 3mL，并放入一个小倒管，115，15min 高压灭菌。33胰酪胨大豆肉汤成分：胰酪胨（或胰蛋白胨）17g，植物蛋白胨（或大豆蛋白胨）3g，氯化钠 100g，磷酸氢二钾 2.5g，葡萄糖2.5g，蒸馏水 1000mL。制法：将上述成分混合，加热并轻轻搅拌溶液，分装后 12115min 高压灭菌。最终 pH7.30.2。347.5%氯化钠肉汤成分：蛋白胨 10g，牛肉膏 3g，氯化钠 75g，蒸馏水 1000mL，pH7.4。制法：将上述
20、成分加热溶解，校正 pH，分装试管，12115min 高压灭菌。35豆粉琼脂成分：牛心消化汤 1000mL，琼脂 20g，黄豆粉浸液 50mL，pH 7.47.6。制法：将琼脂加在牛心消化汤中，加热溶解，过滤。加入黄豆粉浸液，分装每瓶 100mL，12115min 高压灭菌。36血琼脂平板成分：豆粉琼脂 100mL，脱纤维羊血（或兔血）510mL。制法：加热融化琼脂，冷至 50，以无菌操作加入脱纤维羊血或兔血，摇匀，倾注平板。或分装灭菌试管，摆成斜面。37aird-Parker 氏琼脂平板成分：胰蛋白胨 10g，牛肉膏 5g，酵母膏 1g，丙酮酸钠 10g，甘氨酸 12g，氯化锂（LiCL6H
21、2O）5g ，琼脂20g，蒸馏水 950mL，pH7.5。增菌剂的配法：3050%卵黄盐水 50mL 与除菌过滤的 1%亚碲酸钾溶液 10mL 混合，保存在冰箱内。制法：将各成分加到蒸馏水中，加热煮沸至完全溶解。冷至 25，矫正 pH。分装每瓶 95mL，121高压灭菌15min。临用时，加热融化琼脂，冷至 50，每 95mL 加入预热至 50的卵黄-亚碲酸钾增菌剂 5mL，摇匀后倾注平板。培养基应是致密不透明的。使用前在冰箱储存不得超过 48h。38肉浸液成分：绞碎牛肉 500g，氯化钠 5g，蛋白胨 10g，磷酸氢二钾 2g，蒸馏水 1000mL，pH 7.47.6。制法：将绞碎之去筋膜无
22、油脂牛肉 500g，混合后放冰箱 24h，除去液面之浮油，隔水煮沸半小时，使肉渣完全凝结成块，用绒布过滤，并挤压收集全部滤液，加水补足原量。加入蛋白胨、氯化钠和磷酸盐，溶解后矫正 pH7.47.6 煮沸并过滤，分装烧瓶，121，30min 高压灭菌。39兔血浆成分：柠檬酸钠 0.106 mol/L（31.3g Na3C6H5O72H2O 溶于 1L 蒸馏水中）制法：一份加兔血 9 份混合后离心 2000rpm，10min 吸取上清液即为兔血浆。40肠毒素产毒培养基成分：蛋白胨 20g，胰消化酪蛋白 200mg，氯化钠 5g，磷酸二氢钾 1g，氯化钙 0.1g，硫酸镁 0.2g，菸酸 0.01g
23、，蒸馏水 1000mL，琼脂 1012g（固体透析培养用），pH7.27.4 。41葡萄糖肉浸液肉汤成分：绞碎牛肉 500g，氯化钠 5g，蛋白胨 10g，磷酸氢二钾 2g，葡萄糖 10g，蒸馏水 1000mL，pH7.47.6。制法：将绞碎之去筋膜无油脂牛肉 500g，混合后放冰箱 24h，除去液面之浮油，隔水煮沸半小时，使肉渣完全凝结成块，用绒布过滤，并挤压收集全部滤液，加水补足原量。加入蛋白胨、葡萄，氯化钠和磷酸盐，溶解后校正 pH，煮沸并过滤、分装，12130min 高压灭菌。42牛心浸液成分：绞碎牛心 500g，氯化钠 5g，蛋白胨 10g，磷酸氢二钾 2g，蒸馏水 1000mL，p
24、H7.47.6。制法：将绞碎牛心 500g，混合后放冰箱 24h，除去液面之浮油，隔水煮沸半小时，使肉渣完全凝结成块，用绒布过滤，并挤压收集全部滤液，加水补足原量。加入蛋白胨、氯化钠和磷酸盐，溶解后校正 pH，煮沸并过滤、分装，121，30min 高压灭菌。43匹克氏肉汤 成分：含 1%胰蛋白胨的牛心浸液 200mL，1：25000 结晶紫盐水溶液 10mL，1 ：800 三氮化钠溶液 10mL，脱纤维兔血（羊血）10mL 。制法：将上述已灭菌的各种成分，无菌依次混合，分装于无菌试管内，每管 2mL，保存冰箱内备用。44胰蛋白胨大豆胨琼脂（TSA）成分：胰蛋白胨 15g，大豆胨 5g，氯化钠
25、5g，琼脂约 13g，蒸馏水 1000mL，pH7.17.5 。制法：按量将各成分溶解，加热使完全溶解，调 pH 值，121，15min 灭菌。45缓冲蛋白胨水(BP)培养基成分：蛋白胨 l0g，NaCL5g，Na2HPO4.12H20 9g，H2PO4 1.5g，蒸馏水 1000mL，pH7.2。制法：121灭菌 15min，沙门氏菌前增菌使用。46氯化镁孔雀绿(MM)增菌液 成分：甲液：胰蛋白胨 5g，NaCL 8g，KH2P04 1.6g，蒸馏水 1000m1乙液：MgCL2 40g，蒸馏水 100mL丙液：0.4孔雀绿水溶液制法：分别按上述成分配好后，121 灭菌 15min 备用。临
26、用时取甲液 90mL、乙液 9mL、丙液 0.9mL 以无菌操作混合即成。47四硫磺酸钠煌绿(TTB)增菌液成分：多胨或胨 1g，CaCO3 10g，Na2S203 30g，蒸馏水 1000m1。制法：将各成分加入蒸馏水中，加热溶解，分装每瓶 100m1。分装时应随时振荡，使其中的 CaCO3 混匀。121灭菌 15min 备用。临用时每 100m1 培养基中加入碘溶液 2m1、0.1煌绿 1m1。 48亚硒酸盐胱氨酸(SC)增菌液成分：蛋白胨 5g，乳糖 4g，亚硒酸氢钠 4g，Na2HPO4 5.5g，KH2PO4 4.5g，L胱氨酸 0.01g，蒸馏水1000m1，pH7.0 。制法：将
27、除亚硒酸氢钠和胱氨酸以外的各种成分溶解于 900mL 蒸馏水中，加热煮沸，冷却备用。另将亚硒酸氢钠溶解于 100mL 蒸馏水中，加热煮沸，冷却，以无菌操作与上液混合。再加入 1L-胱氨酸氢氧化钠溶液 1m1。分装于灭菌瓶中，每瓶 l00mL。49亚硫酸铋琼脂(BS)培养基成分：蛋白胨 10g，牛肉膏 5g，葡萄糖 5g，FeSO4 0.3g，Na2HPO4 4g，煌绿 0.025g，柠檬酸铋铵2g，Na2SO4 6g，琼脂 20g， 蒸馏水 1000mL，pH7.5。制法：将前 5 种成分溶解于 300mL 蒸馏水中，再将柠檬酸铋铵和亚硫酸钠另用 50m1 蒸馏水溶解。将琼脂于600mL 蒸馏
28、水中煮沸溶解，冷至 80左右。将以上三液合并，补充蒸馏水至 1000m1，校正 pH，加 0.5煌绿水溶液5mL ；摇匀。冷却至 5055，倾注平板。注：此培养基不需高压灭菌。制备过程中不宜过分加热，以免降低其选择性。应在临用前一天制备，贮存于室温暗处。超过 48h 不宜使用。50DHL 琼脂培养基成份：蛋白胨 20g，牛肉膏 3g，乳糖 10g，蔗糖 10g，去氧胆酸钠 1g，Na2S203 2.3g，柠檬酸钠 1g，柠檬酸铁铵1g，中性红 0.03g，琼脂 20g，蒸馏水 1000mL，pH7.3。制法：除中性红和琼脂外，将其他成分溶解于 400m1 蒸馏水中，校正 pH 值。再将琼脂溶于
29、 600mL 蒸馏水中，两液合并，加 0.5中性红水溶液 6mL，待冷至 5055，倾注平板。51HE 琼脂培养基成份：月示 胨 12g，牛肉膏 3g，乳糖 12g，蔗糖g，水杨素 2g，胆盐 20g，NaCL 5g，琼脂 20g，蒸馏水1000m1，0.4 溴麝香草酚蓝溶液 16mL，Andrade 指示剂 20mL，甲液 20mL，乙液 20m1。制法：将前七种成分溶解于 400mL 蒸馏水中。作为基础液，加入甲液和乙液，校正 pH 值为 7.5，再加入指示剂；将琼脂溶于 600m1 蒸馏水中。二者合并，待冷至 5055，倾注平板。注：此培养基不可高压灭菌； Andrade 指示剂：酸性复红 0.5g，1M NaOH 溶液 16m1，蒸馏水 100mL。制法为：将复红溶解于蒸馏水中，加入氢氧化钠溶液。数小时后如果复红退色不全，再加氢氧化钠溶液 12mL。甲液：Na2S203 34g，柠檬酸铁铵 4g，蒸馏水 100m1。 乙液：去氧胆酸钠 10g，蒸馏水 100mL。
