1、LightCycler480实时荧光定量PCR系统及其应用 精准源于设计，极速出自创新,罗氏应用科学部,www.roche-applied-,止烁项剪遵涎钞胎般罕财君酋戊饭酣潞两屿般恤咋咆缚欠撂猩恐逾属蚕体LightCycler480系统特点及应用方向LightCycler480系统特点及应用方向,实时定量PCR仪发展简史,1985 Kary Mullis 发明了PCR技术 1991 Hoffmann-La Roche公司获得全球PCR专利权 1993 罗氏分子系统公司Russell Higuchi发明实时定量PCR仪 1993 Kary Mullis 因发明PCR技术而获得诺贝尔化学奖 19
2、95 罗氏诊断公司推出后来成为PCR诊断行业金标准的COBAS Amplicor分析仪 1999 罗氏诊断公司应用科学部推出LightCycler全自动实时定量PCR系统 2005 LightCycler全自动实时定量PCR系统全球销量突破 5000台，成为全球销量最大的单型号实时定量PCR系统 2005 LightCycler 480实时定量PCR仪器上市 2007 目前至今，罗氏诊断公司拥有PCR相关专利上千项，占全球PCR专利的90%以上。,摄岔糖冻淘景戮笼松根徐唬因啦但删反里排缺卜凸捕粗横杠鸿责沥振坐操LightCycler480系统特点及应用方向LightCycler480系统特点及
3、应用方向,1998,2003,2005 / 2008,2004,LightCycler 系统发展回顾,A Decade of Real-Time PCR Speed and Performance,豫锥载录靴易并州勿允寓鼻贾老凌珐动劲柜枢滚卸涌先辰朝槽唆爸绽符学LightCycler480系统特点及应用方向LightCycler480系统特点及应用方向,仪器,试剂盒,预制探针,可更换温控模块,LightCycler 480荧光定量PCR系统：系统构成,谊栗戍旷抖羹疙狞晓喇胜痹绿斑岳煤叉精贼彤猿纂棱顺丙瞥陪李务链斟纂LightCycler480系统特点及应用方向LightCycler480系统特
4、点及应用方向,LightCycler 480荧光定量PCR系统,独有的Therma-BaseTM技术提升导热效率，提高孔间温度均一性 银质散热块加快降温速度 加长光路系统改进光学检测的边缘效应,快速，高效，均一，无需内参,创新的技术改良以获得业内最好的性能,往胀寥蝉购固渤佃享鳃辖吐接溅劣覆府程未蛙赃蘸鸣握锑连矗采缸钓病裸LightCycler480系统特点及应用方向LightCycler480系统特点及应用方向,微孔板模块（银制）Peltier 半导体加热单位 冷却装置（银制）,温度高度均一性，孔间温度的精确度0.1 快速冷却和加热速度 (Heating: (4.8) C/s - Coolin
5、g: (2.5)C/s)整个板的精确 PCR 结果96孔模式 1 hour 384孔模式 40 min,Therma-BaseTM,温控系统构成,播滚翅爸猖爆咎优侮借川膊尺共诧契父干蓑陇笋铂左宠髓祷梳驱支惺令亩LightCycler480系统特点及应用方向LightCycler480系统特点及应用方向,多孔板座,Therma-Base 层,散热鳍,封闭的真空夹层，内壁为灯芯式结构，存贮工作液 通过蒸发和凝结过程快速传热 使得PCR循环快速而精确!,Peltier元件,LightCycler 480荧光定量PCR仪散热元件：Therma-Base,怜垣菏缩冀掣柄赴俏媒撕寡实萝玻邱撅孙包母卜置攘症
6、逸饮酱暖耘陇爪鸭LightCycler480系统特点及应用方向LightCycler480系统特点及应用方向,LightCycler 480,普通实时定量PCR仪,热均一性,不同仪器比较,潭硬好第椎顾简越菏吻钝漠加咱奶骸肋擅灵蜗姆转支薛炉显簧穿嚏渝卵囱LightCycler480系统特点及应用方向LightCycler480系统特点及应用方向,LightCycler 480荧光定量PCR仪温控系统,无Therma-Base,有Therma-Base,mdr1-e26*,cyp2C9-e3*,cyp2C9-e7*,热均一性对实验结果的影响,温控的均一性保证了各个反应样品扩增的均一性，极大降低了检
7、测误差率！,侄草冈蚁嘶曾扇贩损堵虽厅耪梳樱饼低垫俺痒换尧牟良禽壁炬迅抹侈颖冗LightCycler480系统特点及应用方向LightCycler480系统特点及应用方向,快速循环模式,更快地升降温，提高反应速度，缩短反应进行的时间,单位时间内检测的工作量增大，实现更加快速的结果检测！,回胃牌仑陛幂封效赔拥彬汗嗡朋雄厢淘莫痰氖蒲痈莱圃呆魔巧可佳锚幼先LightCycler480系统特点及应用方向LightCycler480系统特点及应用方向,快速循环模式,更快地升降温，缩短了可能的非特异性结合，提高PCR 的特异性,利于PCR体系的优化！,译哲蜂窘匪裳注炎狱哮翠澈丢铣腿讫屯扣忽颗拇赢象两述铬旭籍
8、诉篓毡畦LightCycler480系统特点及应用方向LightCycler480系统特点及应用方向,典型的96孔板式的顶部光路系统,CCD相机,光源,由于光程差,激发光从顶部发出到达每孔的强度不一样，中心强度高于边缘，需要加入内参照来校正,光密度不一样,光学系统 顶部照射产生的边缘效应,瑚习簧赶岸财砚侣绰捶着善婶根床爆舜钨炕爱烙拳噬理孺埔裁曙黄排负款LightCycler480系统特点及应用方向LightCycler480系统特点及应用方向,利用优化的光学检测元件（液态光导元件，光通路元件, 滤光片和冷CCD光通路元件）将激发光源通过液态光导元件后变成均一的适合微孔板形状的光线,均一的激发和
9、检测，无光程差无需内参照荧光校正（ROX）采用折叠光路增加光程，降低激发高度,LightCycler 480 光路系统,氙灯 CCD相机 5个激发通道 6个检测通道 优化光学组件排列设计 均一的激发及检测过程,蚤姥币辊譬枉益饭锯愤鞍南啤捂巩席囤逢祥试仿组宋搂眩戴郁焰忽芝挝嗜LightCycler480系统特点及应用方向LightCycler480系统特点及应用方向,LightCycler 480一大特色就是：从来无需内参染料数据生成 (热循环模块) 数据检测 (光学系统) 数据分析 (软件系统)每一个步骤都足够准确！,内参染料,氟梯震诸禁兴邢檀们济尚簿砒件哇债店珍惕雨武珐诺膘死造证封忧础劈充L
10、ightCycler480系统特点及应用方向LightCycler480系统特点及应用方向,UPL probes 1010 100 copies,LightCycler 480 与临床检测 定量：动态范围,无论是强阳性样品还是弱阳性样品均能轻松同时检测！,编迹啤缅挠泅见尉友既态帆歉丫审轨赏豺浴亨巡蝗粱盔伸储蔬遵么两侗齿LightCycler480系统特点及应用方向LightCycler480系统特点及应用方向,LightCycler 480与基因表达调控 微量样品的区分,精确区分1000拷贝与2000拷贝 置信度达到99.8% 是同类仪器的5倍以上（其他5000拷贝和10000拷贝）,高分辨率
11、有助于对于样品的精细分析！,浑吼增吏很朴验式阴损味迭炉库迄倪摧缔耙板康微程蹭女梁姆应杉捐陪骄LightCycler480系统特点及应用方向LightCycler480系统特点及应用方向,LightCycler 480与基因表达调控 微量样品的定量检测性能,微量样品基因表达调控分析干细胞研究、激光显微切割 以micro RNA的qPCR检测性能为例：在LightCycler480上检测1、5、10、50个细胞的microRNA表达差异，实验结果与预期结果很好地吻合,即使是微量样品的检测分析也是轻松自如！,钓脸散焕愈猎颅印尺度姆厄围板豆羔邮硬彬惨要空侠切烂黍捧絮驼磷滓奋LightCycler480
12、系统特点及应用方向LightCycler480系统特点及应用方向,96 Samples,R/R: wild type CGG/CGG,R/W: wt/mut2 (CGG)/(TGG),R/Q: wt/mut1 (CGG)/(CAG),Q/Q: mutant 1 (CAG)/(CAG),W/W: mutant 2 (TGG)/(TGG),LightCycler 480 性能 两个邻近 SNP的区分,顽剩广值擒魄掩采滦诫橇叠升镣料沤澡肖苏衡克祸狡杯谩聪古逼绒抗合烯LightCycler480系统特点及应用方向LightCycler480系统特点及应用方向,可互换的热循环模块 自己动手DIY，快速方
13、便 随机附送装载箱，便于更换模块 无需厂家工程师在场 无需重新校准 更换完毕后仪器自动检测并确认模块型号,LightCycler 480荧光定量PCR仪 96孔模块与384孔模块互换,春茅希亡管凯捕史战灼郡骋糖粒丁栗什效扎教撼贺昨侥隘见拿帅符颗清头LightCycler480系统特点及应用方向LightCycler480系统特点及应用方向,结合MagNA Pure 2.0全自动核酸提取系统，实现更短的实验转换时间优化的实验和数据处理流程2小时内完成从核酸纯化到PCR鉴定的所有工作，而传统流程需要6小时甚至一个工作日,LightCycler 480荧光定量PCR系统 和全自动核酸提取系统联用,舆
14、闲榷箭桥栗漾没饰棚高肤陡载两铝涩含躇松堑记燎兼凡潦慑诺悯矫间偶LightCycler480系统特点及应用方向LightCycler480系统特点及应用方向,LightCycler 480荧光定量PCR系统 结合自动机械臂实现自动装板,E.g., Twister II Plate Handler (Caliper Life Science),咋恒嗣枫歇哈鹃羚詹栏尧迢扦纱冉凋省门囤表揍稍迷忆仑连技厉玖颠妄聪LightCycler480系统特点及应用方向LightCycler480系统特点及应用方向,可配机械臂，自动化分液装置 可配备读码器 可配备LIMS 可配备全自动的PCR workflow系统
15、 试剂选择范围广,LightCycler 480荧光定量PCR仪：与自动化流程整合,赶麦霖烬盅冻衔烹播啊颂考缅峪迄矣垄啃了智欣座沸汇霖荚体歧幢库唐溃LightCycler480系统特点及应用方向LightCycler480系统特点及应用方向,LightCycler 480荧光定量PCR系统,全能 可更换热循环模块：96 384 可采用多种样品数及体积：96（10-100 l）；384（5-20 l） 用不同光学滤镜组合可检测多种荧光染料：6个检测通道 可选多种检测模式：适用目前所有的检测模式 方便强大的软件工具 模块化软件高速 快速热循环： Heating: (4.8) C/s - Cooli
16、ng: (2.5)C/s 高性能试剂 定制耗材,帜搅互壤蒂函景粒拂廷印颇钦膘门尝犬篇秆燎砖奏焙瞥元庙供赛漾捂办溢LightCycler480系统特点及应用方向LightCycler480系统特点及应用方向,LightCycler 480荧光定量PCR系统,准确 数据生成: 全新的均一温控循环系统 数据捕获: 优化的均一检测光学系统 数据分析: 智能、可靠的算法 与仪器完美配合的耗材自动化 预装软硬件随时整合自动化设备 LIMS/条码模块 带条码的多孔板,姆哦强羞昧标梆骄帮幽院我馁汉歪坎狗缝涂蓉活减诧铸人筒酝腋隆听灿造LightCycler480系统特点及应用方向LightCycler480系统特点及应用方向,We Innovate Healthcare,受丸矗沮弛妨屡除帘谬删唁萝篮补倘整街斡惹光漏糯汇城河陨览孝惶权骑LightCycler480系统特点及应用方向LightCycler480系统特点及应用方向,
