豆粕品质的检测方法.doc

1、豆粕品质的检测方法一、 评定指标1、 1：抗胰蛋白酶的活性：Trypsin Inhibitor Activity TIA 大豆粕在 0。01mol/LnaOH浸泡 1h 过滤,滤液用 PBPA 水解.测胰蛋白酶活性 TIU.1、 2：尿酶活性（Urease Activity UA） 国际标准法（ISO） 、PH 增值法（PH 法） 、扩散法、酚红法。CHINA 规定 PH0。4 在 0.02-0.2 之间是优质豆粕.UA 与TAI 几乎同步失活.在加热过度以前,TIA 以全部失活.1、 3:蛋白质溶解度:(Protein Solubility)美国乔治大学:Dale & Araba (1987

2、)以检测豆粕是否加热过度.一定量的豆粕与 0.2%NaOH 溶液混合离心过滤,滤液凯氏测氮.PS70%,则加热过度,70-80%为适宜,测时其灵敏度不够,粒度影响,当粒度在 60-80目时方稳定.1、 4：有效赖氨酸:赖与精氨酸属热敏性 AA,高温时 Lys 与还原糖发生 Maillard 反应.测定法有:A 染料结合法(DBL):二硝基氟苯(FDNB),三硝基磺酸(TNBS),酸性橙-12,茚三酮发生特异性呈色反应.B 高效液相色谱法(HPLC)1、 5：蛋白质的水溶解度和氮的水溶解度：蛋的质的水溶解度（PDI）与氮的水溶解度（NSI） ，二者只是与水混合后的搅拌强度不一样。PDI 是 85

3、00r/min 的速度搅拌10min，NDI 是 120r/min 搅拌 30min。PDI 测定豆粕的加热程度比 UA 和PS（NaOH）灵敏，NSI 在 7-27.8%是可以接受。NSI 低于 10%则为加热过度。Balloun & Hgymard(1959):加热时间延长， NSI 降低，加热过度，则大大降低，鸡的增重与饲料报酬降低。1、 6 考马氏亮蓝法：Kratzer(1989): 考马氏亮蓝对蛋白质考马氏亮蓝考马氏亮蓝显色对 AA 不显色并与 PS 相关度好但考法测的实际值大大低于凯氏法测的蛋白质溶解度。这可能与凯氏法将全部 AA 包括在蛋白质内的缘故。但考法较 PS 法测的时间短

4、的多，故考法更适合评价经受不同热处理时间后饲料中可溶性蛋白质的含量。1、 7：其它方法：橙黄 G 染色法（只能有限鉴定过分加热处理的大豆粕） 、甲醛滴定法、甲酚红染色法(每克豆粕吸收甲酚红的毫克数 2-3mg 为生豆粕,3.3-3.7mg 为加工不足,3.8-4mg 为适当,4.3mg 为加热过度)、颜色亨特色值。 （Smith1981：颜色与蛋白质有较高的相关性）二、 豆粕质量与生产性能熱 處 理 對 大 豆 粕 中 可 代 謝 能 量 之 影 響生 大 豆 粕 中 的 可 代 謝 能 量 要 比 經 熱 處 理 的 大 豆 粕 來 得 低 （ Hill 及 REnner , 1960 .,

5、 1963） 。 一 般 認 定 ， 含 48 %粗 蛋 白 的 大 豆 粕 ，每 公 斤 約 含 有 2,440 仟 卡 的 可 代 謝 能 量 （ NRC） 。 含 有 10 個 單 位胰 蛋 白 酶 抑 制 因 子 的 大 豆 粕 樣 品 ， 其 每 公 斤 應 有 2,575 仟 卡 的 可 代謝 能 量 ， 但 要 是 檢 測 出 來 的 胰 蛋 白 酶 抑 制 因 子 大 約 在 個 單 位 時 ， 其 可 代謝 能 量 可 增 至 2,740 仟 卡 （ Mian 及 Garlich， 1987） 。 Parson 等 人 曾 做 觀 察 ， 發 現 去 穀 大 豆 添 餵 燒

6、烤 用 肉 雞 及 火 雞 時 ， 其 真 正 斤 提 供 之可 代 謝 能 量 ， 分 別 為 3,003 及 3,292 仟 卡 。 在 107 溫 度 下 經 10 13 分 鐘 熱 處 理 之 大 豆 薄 片 ， 其 每 公 斤 可 代 謝 總 能 量 為 3,130仟 卡 ， 但 是 熱 處 理 過 度 （ 即 在 121 的 溫 度 下 ， 經 121 分 鐘 的 熱 處理 ） 的 大 豆 薄 片 ， 其 每 公 斤 的 可 代 謝 總 能 則 會 降 至 2,700 仟 卡（ Sibbald,， 1980） 。 熱 處 理 對 大 豆 粕 中 蛋 白 質 之 影 響過 去 幾 年

7、 來 ， 曾 有 多 種 方 法 被 用 來 檢 測 大 豆 粕 是 否 加 熱 過 度 而 影 響 其 飼 養 價 值 。 這 些 方 法 當中 ， 包 括 有 藉 由 甲 醛 滴 定 、 甲 酚 紅 染 色 法 ， 以 及 橘 色 染 劑 染 色 法 （ orange - G dye binding） ， 來 測 出 其 游 離 功 能 基 （ free functional group） 的 方 法 ； 及 藉 由 凱 氏 法 或 Coomassie 藍 色 染 劑 染 色 法 ， 來 檢 測 其 加 熱 後 所 產 生 具 有 螢 光 的 衍 生 物 ， 以 及 蛋 白 質 的 溶 解

8、 度 。 甲 醛 滴 定 法Almquist 及 Maurer （ 1953） 曾 建 議 採 用 甲 醛 滴 定 法 來 評 鑑 大 頭 粕 是 否 熱 處 理 過 度 ， 其 檢測 結 果 之 資 料 詳 列 如 表 。 經 蒸 煮 過 之 大 豆 蛋 白 ， 其 功 能 基 會 降 低 。 甲 酚 紅 染 色 法本 染 色 法 曾 由 Olomucki 及 Bornstein（ 1960） 作 過 詳 細 的 描 述 。 其 檢 測 步 驟 為 ， 採 取 400 毫 克 的 樣 品 ， 先 經 1 mm 網 目 之 篩 網 篩 濾 後 ， 再 置 於 10 公 撮 之 甲 醛 紅 溶

9、液 中 ， 然 後 一齊 加 以 振 動 一 個 時 。 本 檢 測 法 所 用 之 甲 醛 染 色 液 ， 係 以 1 公 撮 含 有 0.2 公 克 溶 於 100 公 撮 （ 0.2%） 酒 精 及 9 公 撮 （ 0.1 N） 鹽 酸 混 合 液 之 甲 醛 紅 溶 液 稀 釋 調 製 而 成 。 上 述 稀 釋 液 經離 心 處 理 後 ， 其 上 層 部 份 再 到 入 一 裝 有 9 公 撮 （ 0.2 N） 的 氫 氧 化 鈉 溶 液 中 ， 並 測 量 其 顏 色 的濃 度 。 如 果 大 豆 粕 被 染 劑 所 吸 收 的 量 （ mg） ， 而 在 最 適 當 濃 度 所

10、 吸 收 的 染 劑 量（ mmg） 讀 取 。 那 麼 2.00 ( 10 XA ) 。 甲 醛 紅 染 色 法 與 大 豆 粕 熱 處 理 間 的 相 關 性 詳 列如 表 。 表 .以 甲 醛 滴 定 作 為 大 豆 粕 熱 處 理 法 的 檢 測 指 標高壓蒸煮時間（分鐘） 以申醛滴定時，欲使 pH 值調至 9.0 時所需 0.05N 氫氧化鈉作用量（ML）0 7.955 6.9015 6.5030 6.1045 5.7060 5.50120 4.70資料來源：Almquist 及 Maurer , 1953表 .大 豆 粕 熱 處 理 程 度 與 紅 染 色 法 間 的 關 係加熱程

11、度 每公克大豆粕被甲醛紅吸收之重量（mg ）生大豆粕 2.0 3.0熱處理不夠 3.3 3.7適度熱處理 3.8 4.3熱處理過度 4.3 以上資料來源：Olomucki 及 Bornstein , 1960橘 色 染 劑 染 色 法Moran 等 人 （ 1963） 曾 就 橘 色 染 劑 染 色 法 的 檢 測 程 序 加 以 述 說 。 大 豆 粕 經 高 壓 蒸 煮後 ， 其 橘 色 染 色 值 會 隨 之 降 低 ， 但 由 他 們 研 究 所 獲 得 之 數 字 （ 詳 如 表 ） 顯 示 ， 此 一 檢 測 方法 靈 敏 度 並 不 很 高 。 螢 光 測 定 法徐 等 人 （

12、1949） 曾 經 提 述 過 一 種 利 用 螢 組 檢 測 熱 處 理 大 豆 粕 抽 出 物 的 方 法 ， 人 旦 他 們 對 於 此項 檢 測 方 法 的 細 節 並 未 加 說 明 。 惟 按 Ewing （ 1963） 所 引 述 的 檢 測 步 驟 ， 是 將 採 得 之 雙 份 經細 磨 之 大 豆 粕 樣 品 （ 每 份 樣 品 為 0.01 公 克 ） ， 倒 入 裝 有 25 公 撮 0.01 M 濃 度 氫 氧 化 鉀 磷酸 鹽 溶 液 的 50 公 撮 加 蓋 Er-lenmeyer 三 角 餅 中 ， 在 pH 值 4.8 的 狀 況 下 ， 以 機 械 方 式

13、振盪 15 分 鐘 與 予 萃 取 。 再 用 42 號 Whatman 濾 紙 上 述 萃 取 液 加 以 過 濾 ， 然 後 將 過 濾 後 之 溶 液 ，置 於 Coleman-12 型 的 螢 光 測 定 儀 下 ， 檢 測 並 讀 出 其 螢 光 值 。 在 檢 測 螢 光 值 前 ， 螢 光 測 定 儀 必 需先 予 標 準 化 校 正 ， 即 在 以 每 公 撮 0.10 mg 奎 寧 之 標 準 受 測 液 作 校 正 測 試 時 ， 其 螢 光 值 讀 取 數標 準 應 為 100。 最 後 在 作 檢 測 時 ， 需 將 萃 取 液 適 當 地 稀 釋 成 幾 種 不 同

14、的 濃 度 ， 並 置 於 磷 酸 鹽 的 緩衝 液 中 ， 再 進 行 檢 讀 結 果 ， 而 其 檢 測 結 果 ， 係 以 相 當 於 每 公 古 大 豆 粕 中 所 含 奎 寧 硫 化 物 微 克 量 的 螢光 值 來 表 示 。 Balloum 等 人 （ 1953） 曾 採 用 此 種 方 法 來 檢 測 經 高 壓 （ 磅 平 方 英 吋 ） 蒸 煮 過 的大 豆 粕 ， 並 與 使 用 尿 素 酶 活 性 的 檢 測 方 法 作 過 比 較 。 尿 素 酶 活 性 是 用 每 以 克 加 有 尿 素 大 豆 粕 所 釋 放出 來 氨 的 百 萬 分 當 量 來 測 定 ； 而

15、螢 光 值 則 是 以 每 公 克 大 豆 粕 中 所 含 奎 寧 硫 化 物 的 微 克 量 來 表 示 。 由他 們 所 測 得 而 列 於 表 10 的 數 字 顯 示 ， 當 大 豆 粕 經 過 壓 蒸 煮 至 60 至 90 分 鐘 時 ， 其 螢 光 值會 有 顯 著 的 增 加 ， 也 就 是 說 大 豆 粕 加 熱 處 理 時 延 長 ， 會 有 引 起 雞 隻 生 長 減 緩 的 情 形 。 表 .大 豆 粕 加 熱 處 理 對 其 橘 色 染 色 法 反 應 能 力 之 影 響在 120下高壓蒸煮時間（分鐘）每公克大豆粕吸附之染劑量（mg）由染色浾所測得之蛋白質量（%）0

16、70.8 43.85 6835 41.630 68.4 41.545 68.5 41.660 63.8 37.290 63.2 36.6120 61.2 34.7資料來源：Mpran 等人，1963。 表 大 豆 粕 高 壓 蒸 煮 時 間 對 其 尿 素 酶 含 量 、 螢 光 值 及 蛋 白 質 溶 解 度 之 影響高壓蒸煮時間（分鐘） 雞隻之反應增重（以克） 尿素酶值螢光量值水溶性氮佔總氮量之百分率0 223 5.02 25.3 76.03 228 4.70 25.5 53.25 229 3.61 25.5 43.510 240 2.22 26.0 24.120 299 0.26 28.

17、2 7.760 277 0.14 37.5 7.4120 242 0.12 51.8 7.5資料來源：徐等人，1949蛋 白 質 溶 解 度 凱 氏 法利 用 凱 氏 法 來 檢 測 蛋 白 質 溶 解 度 的 這 種 方 法 ， 過 去 在 考 慮 大 豆 粕 的 熱 處 理 是 否 足 夠 時 ， 曾 被用 來 檢 測 可 溶 性 蛋 白 質 的 部 份 （ Araba 及 Dale， 1990a） 。 由 表 11 的 資 料 可 以 看 出 ， 大 豆粕 中 蛋 白 質 的 溶 解 度 隨 高 壓 蒸 煮 時 間 的 延 長 而 降 低 ， 與 雞 隻 生 長 的 減 緩 有 著 極

18、密 切 的 關 係 ， 因 為 那些 未 經 熱 處 理 的 樣 品 ， 事 實 上 在 商 業 化 的 加 工 過 程 中 都 已 將 其 中 的 生 長 抑 制 因 與 予 破 壞 。 表 12. 大 豆 薄 片 經 高 壓 蒸 煮 處 理 後 對 其 一 些 用 化 學 方 法 所 測 得 指 數 的 影 響在 0.2%氫氧化鉀溶液中蛋白質的溶解度高壓蒸煮 凱氏蛋白質（%） 每 100mg 粗蛋白吸附Comassie 之量（mg）每 g 大豆粕之胰蛋白酶抑制因子活性單位數尿素酶活性 pH 變化值每 g 大豆粕吸附橘色-染劑量（mg）0 94.6 67.6 36,7400 1.30 40.

19、87 68.9 50.2 700 0 34.115 64.6 45.6 180 0 34.121 47.7 33.7 0 0 30.030 47.9 25.7 0 0 28.046 35.8 19.2 0 0 26.660 34.1 17.2 0 0 23.2資料來源：Kratzer 等人，1990a表 13.不 同 高 壓 蒸 煮 處 理 時 間 之 大 豆 粕 及 離 胺 酸 之 添 加 對 出 生 後 21 天齡 雞 隻 增 重 及 飼 料 效 率 之 影 響隻日增重（公克） 飼料換肉率高壓蒸煮時間（分）1.2% 離胺酸 1.4 % 離胺酸 1.2% 離胺酸 1.4% 離胺酸種禽飼糧 2

20、9.9bc 1.65 0 21.0d 25.9d 1.67 1.657 31.2ab 33.5a 1.37 1.355 28.7c 33.9a 1.36 1.3621 29.6bc 31.7ab 1.38 1.3830 29.6bc 32.6a 1.44 1.3845 26.2d 32.9a 1.48 1.4160 21.3c 30.0bc 1.59 1.381.表欄中數字右上角註有不同標示者，係表示其差異顯著（P0.05）2. 資料來源：Kratzer 等人，1990b。 表 14. 大 豆 薄 片 經 不 同 時 間 高 壓 蒸 煮 處 理 後 對 其 一 些 用 化 學 方 法 所 測

21、指 數的 影 響在 0.2%氫氧化鉀溶液中蛋白質的溶解度高壓蒸煮時間凱氏蛋白質(%)每 100mg 粗蛋白吸 Coomassie 之量(mg)尿素酶活性 pH 變化值每 g 大豆粕之胰蛋白酶抑制因子活性單位數福爾馬林(ml0.05N NaOH / 2g)每 g 大豆粕吸附橘色- 染劑量(mg)0 90.9 67.3 1,95 39,000 8.8 47.815 54.1 44.7 0.10 480 7.1 40.230 44.6 32.9 0.10 o 6.6 38.945 30.0 27.4 0.07 0 6.0 35.360 28.9 22.9 0.05 0 5.5 34.4120 15.

22、7 11.9 0 0 5.3 33.5180 12.6 7.7 0 0 5.2 29.1Coomassie - 藍染色法Coomassie - 藍”這種染劑會使蛋白質呈現顏色，人旦對胺基酸則無是項作業。用”Coomassie - 藍染色法”來檢測蛋白質的這種方法，是由 Bradford （1976）所倡議的。為測定溶於 0.2 % 氫氧化鉀溶液中的蛋白質，並與已知溶菌酵素（lysozyme）含量的方法（Kratzer 等人， 1990）作色值強度的比較，此一檢測法已經過修改。在檢測過程中最重要的是，其所用經細磨的 40 mg 大豆粕樣品（大約含有 20 mg 的蛋白質） ，需先倒入 10 公撮

23、 0.2 % 的氫氧化鉀（KOH）溶液中，再一齊旋轉 3 4 次。在經過 10 分鐘後，再將其上層液用號濾紙加以過濾，並取出公撮的過濾液，用含有氯化鈉磷酸鹽的緩衝液將其稀釋成公撮。經稀釋過的濾液，再與 9.5 公撮的 Coomassie - 藍染劑溶液（即以 50 公撮的染劑溶於 50 公撮 16 M 的 H3PO4，以及以 46.7 公撮量用非離子化水稀釋成 1 公升乙醇的方式調配而成）混合。以每平方英吋 15 磅高壓蒸煮過之大豆粕，其在 0.2 % 氫化鉀溶液內停留不同時間下的溶解度詳列表如表 11。由 Coomassie - 藍染色法及凱氏法斤測得之蛋白質溶解度會隨高壓蒸煮時間的增長而降

24、低。由染色法及凱氏法所測得之蛋白質溶解度實際數值，可能由於用凱氏法檢測時亦將胺基酸部份計算在蛋白質內，所以雖然遠比凱氏法所測者來得低，但由兩種方法所測出之溶解度數值仍極為一致。 表 11. 大 豆 粕 高 壓 蒸 煮 時 間 對 0 18 日 齡 雞 隻 飼 養 業 績 及 蛋 白 質 溶 解度 、 尿 素 酶 活 性 及 橘 色 - 染 色 之 吸 附 能 力 反 應高壓蒸煮處理時間（分鐘）增重（公克雞隻）飼料換肉率蛋白質溶解度（%）尿素酶活性（pH變化單位）橘色- 染劑（ mg / g 大豆粕）0 450a 1.79c 86.0 0.03 79.65 445a 1.87 76.3 0.02

25、 78.810 424a 1.83bc 74.0 0.00 78.220 393b 1.89b 65.4 0.00 76.640 3166c 2.04b 48.1 0.00 76.680 219d 2.55a 40.8 0.00 75.21.上表欄中數字右上角註有不同標示者，係表示其統計學上差異顯著（P 0.05） 。 2. 資料來源：Araba 及 Dale，1990b。 這 些 大 豆 薄 片 樣 品 ， 係 以 32%的 用 量 ， 並 分 別 按 含 有 1.2 %及 1.4 %離 胺 酸 量 作 為裡 仔 雞 飼 糧 時 ， 加 以 測 定 的 （ 詳 附 表 13） 。 由 表 中

26、 可 以 看 出 ， 餵 飼 含 有 經 分 鐘 高 壓 蒸 煮 處 理大 豆 粕 飼 糧 之 雞 隻 ， 其 生 長 有 初 步 的 改 善 ， 但 隨 高 壓 蒸 煮 時 間 的 加 長 ， 如 飼 糧 中 的 離 胺 酸 含 量 仍 設定 在 1.2 及 1.4%時 ， 則 其 生 長 減 緩 的 情 形 就 變 得 很 明 顯 。 基 本 上 離 胺 酸 是 對 熱 最 不 穩 定 的 胺 基酸 之 一 ， 所 以 在 采 用 熱 處 理 過 度 大 豆 粕 調 配 飼 糧 時 ， 其 中 離 胺 酸 含 量 的 底 限 就 變 得 相 當 重 要 。 在 一 項 採 用 各 種 不

27、同 高 壓 蒸 煮 時 間 處 理 大 豆 粕 的 單 純 研 究 中 ， 曾 用 了 好 幾 種 方 法 加 以 比 較 。這 些 由 上 述 研 究 所 測 得 的 資 料 詳 列 如 附 表 14。 由 Coomassie 藍 染 色 法 所 崱 得 的 蛋 白 質 溶 解 度 ，和 由 凱 氏 法 所 測 得 的 結 果 有 相 同 的 趨 勢 。 由 甲 醛 滴 定 法 及 橘 色 - 染 色 法 所 測 得 的 溶 解 度 ， 亦隨 高 壓 蒸 煮 時 間 的 增 加 而 降 低 。 大 豆 粕 的 高 壓 蒸 煮 時 間 超 過 15 分 鐘 時 ， 其 尿 素 酶 及 胰 蛋

28、白酶 抑 制 因 子 的 活 性 ， 實 際 上 已 完 全 消 失 。 另 由 其 他 的 資 料 指 出 ， 每 公 克 大 豆 粕 中 胰 蛋 白 酶 抑 制 因 子的 活 性 ， 如 在 5000 單 位 左 右 ， 被 認 為 是 已 經 充 分 熱 處 理 的 滿 意 標 準 。 附 表 12 中 所 提 述 經 熱 處 理 過 的 大 豆 薄 片 ， 係 以 30.07 % 的 用 量 ， 並 以 含 有 1.2% 離胺 酸 的 量 ， 用 來 餵 飼 裡 仔 雛 雞 。 大 豆 薄 片 在 經 15 分 鐘 的 高 壓 蒸 煮 後 ， 因 其 中 的 生 長 抑 制 因 子都

29、已 被 破 壞 ， 故 其 生 長 有 改 善 的 情 形 。 由 凱 氏 法 就 大 豆 薄 紗 所 測 得 的 54%蛋 白 質 溶 解 度 ， 和由 Comassie 藍 染 色 法 所 測 得 的 每 100mg 蛋 白 質 中 出 現 44.7 mg 的 參 考 蛋 白 質 當 量（ reference protein equiplent, 簡 稱 為 RPE） ， 以 及 低 的 尿 素 酶 和 胰 蛋 白 酶 抑 制 因 子 活 性 ，顯 示 在 這 些 情 況 下 經 15 分 鐘 的 高 壓 蒸 煮 處 理 ， 可 能 已 經 熱 處 理 過 度 。 至 於 雞 隻 胰 臟

30、的 重 量 方 面 ，則 以 餵 飼 未 經 熱 處 理 大 豆 粕 薄 片 佁 糧 的 雞 隻 為 最 高 ， 而 餵 飼 經 高 壓 蒸 菾 過 大 豆 粕 薄 片 者 ， 則 有 減 低的 情 形 。 此 外 ， 其 當 中 還 呈 現 有 一 種 趨 勢 ， 即 胰 臟 重 量 的 增 加 表 示 與 蛋 白 質 因 遭 受 到 損 失 而 引 起 體重 成 長 嚴 重 的 滯 礙 有 關 。 從 經 熱 處 理 大 豆 粕 所 測 得 各 種 指 數 所 作 的 統 計 學 比 較 ， 顯 示 Comassie 染 色 法 和 由 橘 色- 染 色 法 之 間 ； 由 凱 氏 測 得

31、 的 蛋 白 質 溶 解 度 與 福 爾 馬 林 滴 定 法 所 測 得 的 結 果 之 間 ； 橘 色 - 染 色 法 與 由 凱 氏 法 所 測 得 蛋 白 質 溶 解 度 之 間 ； 福 爾 馬 森 滴 定 法 和 由 凱 氏 法 所 測 得 蛋 白 質 溶 解 度之 間 ， 都 有 很 密 切 的 相 關 性 。 由 Comassie 藍 染 色 法 所 測 得 每 100 mg 蛋 白 質 的 ”參 考 蛋 白質 當 量 （ RPE） ”如 果 超 過 65mg 時 ， 則 因 熱 處 理 已 不 足 以 破 壞 生 長 抑 制 因 子 ， 則 其 生 長 率 就 會呈 現 較 低

32、的 情 形 。 品 質 好 的 大 豆 粕 ， 共 作 裡 仔 雞 用 飼 糧 的 原 料 時 ， 如 其 離 胺 酸 含 量 採 用 1.2% 的 標 準 ， 則 其 Comassie 藍 染 色 法 所 測 得 的 數 值 應 應 不 能 低 於 35； 如 採 用 1.4 %的 標準 時 ， 則 其 數 值 應 不 能 低 於 25。 由 於 過 去 曾 針 對 在 試 驗 室 內 加 工 處 理 大 豆 薄 片 的 標 準 作 過 研 究 ， 所 以 在 要 將 這 些 標 準 應 用 到其 他 一 些 大 豆 粕 樣 品 時 ， 總 會 覺 得 很 有 趣 。 中 國 大 陸 為 騰

33、 做 試 驗 研 究 ， 曾 在 其 實 驗 室 內 加 工 產 製 出四 種 大 豆 粕 樣 品 ， 這 四 種 樣 器 並 予 分 析 其 Coomassie 藍 染 色 值 、 尿 素 酶 及 胰 蛋 白 酶 抑 制 因 子活 性 。 由 其 分 析 結 果 （ 詳 附 表 16） 顯 示 ， 生 大 豆 粕 樣 品 中 的 尿 素 酶 及 胰 蛋 白 酶 抑 制 因 子 活 性 很高 ， 其 中 只 有 兩 個 樣 品 的 活 性 稍 低 ， 但 就 整 體 來 說 還 是 很 高 ， 而 這 些 大 豆 粕 樣 品 的 加 熱 處 理 都 未 曾過 度 。 而 由 美 國 所 採 得

34、 16 個 商 業 化 生 產 之 大 豆 粕 樣 品 ， 經 以 視 覺 依 其 顏 色 加 以 排 名 ， 並 採 用Coomassie 藍 的 檢 測 法 分 析 其 胰 蛋 白 酶 抑 制 因 子 活 性 ， 以 及 蛋 白 質 溶 解 度 （ 詳 附 表 17） 。 由 上 述 檢 測 結 果 （ 表 17） 顯 示 ， 16 種 大 豆 粕 樣 品 胰 蛋 白 酶 抑 制 因 子 活 性 的 變 化 ， 約 在 580 至 4,460 單 位 之 間 ， 且 其 活 性 會 有 隨 顏 色 的 變 深 而 降 低 的 趨 勢 。 根 據 我 們 建 議 的 標 準 來 衡 量時 ，

35、 上 述 這 16 種 大 豆 粕 樣 品 都 可 接 受 作 為 飼 料 原 料 之 用 。 因 為 Coomassie 染 色 值 檢 測 的 時間 要 比 凱 氏 含 氮 檢 測 法 縮 短 很 多 ， 因 此 這 種 檢 測 方 法 經 證 實 在 評 鑑 經 熱 處 理 飼 料 成 份 的 可 溶 性 蛋 白質 方 面 ， 是 相 當 管 用 的 。 表 15.不 同 高 壓 蒸 煮 處 理 時 間 對 大 豆 粕 營 養 價 值 的 影 響高壓蒸煮時間（分鐘） 隻日增重（公克日） 飼料換肉率 胰臟重量（g每 100g 體重 2）種禽飼糧 31.3g 1.61 0.31a0 19.6

36、c 1.68 0.62c15 27.4cf 1.39 0.35a30 25.6g 1.51 0.33a45 24.3de 1.44 0.35a120 8.6b 1.94 0.37ab180 3.5a 2.83 0.45b360 21.5cd 1.44 0.35a平均 20.1 1.74 0.39bc1. 上述計列含有要 1.2 %離胺酸之飼糧，係供飼養 21 天齡雞隻之用。 2.表中欄內右上角註有標記者，係代表統計學上差異顯著，重複組每組所飼之雞隻為 6 隻。3. 資料來源：Kratzer 等人，1990a。 表 16. 產 自 中 國 大 陸 某 些 大 豆 餅 樣 品 之 檢 測 結 果樣

37、品別粗蛋白含量（%）脂肪含量（%）Coomassie（mgRPE100 mg 蛋白質）尿素酶活性（pH 變化值）每公克 T1 活性單位數生大豆 40.35 9.95 65.8 2.45 44,620正常 43.58 5.70 64.1 2.20 14,500類烘爐 42.20 8.23 57.4 0.20 2,100類烘爐 43.58 5.07 53.7 1.30 10,380RPEReference protein equivalent（參考蛋白質當量） 。 表 17. 一 些 商 業 用 大 豆 粕 樣 品 之 檢 測 評 鑑 結 果樣品編號 顏色 粗蛋白含量（%） T1 單位gCooma

38、ssie（mgRPE100 mg 蛋白質）1 光亮 47.0 2,680 58.12 47.7 2,100 58.13 48,3 3,700 65.14 47.0 1,800 62.45 47.5 4,460 69.76 47.9 3,640 61.47 47.9 3,720 65.38 47.8 1,700 57.99 47.2 1,830 59.810 46.8 1,080 60.511 48.2 1,000 58.012 47.1 2,080 59.313 48.0 920 58.614 47.5 260 59.015 48.0 900 57.116 暗色 47.0 580 56.3摘

39、要在 評 鑑 大 豆 粕 的 營 養 價 值 時 ， 應 針 對 其 加 熱 處 理 的 程 度 是 否 足 夠 ， 並 應 確 定 是 否 已 將 原 存 在於 生 原 料 中 的 生 長 抑 制 因 子 完 全 破 壞 ， 並 或 證 明 如 有 過 度 熱 處 理 時 其 情 形 是 否 太 嚴 重 ， 以 致 其 中的 蛋 白 遭 到 破 壞 等 方 面 來 加 檢 測 。 而 欲 檢 測 熱 處 理 是 否 適 度 的 方 法 中 ， 則 以 每 公 克 大 豆 粕 樣 品 中 的胰 蛋 白 胰 蛋 白 酶 抑 制 因 子 活 性 值 降 至 5,000 T1 單 位 以 下 ， 或

40、 以 尿 素 酶 活 性 之 pH 變 化 值不 高 於 0.2 單 位 之 標 準 ， 可 能 是 最 快 且 最 容 易 執 行 的 方 法 。 在 檢 測 大 豆 粕 中 蛋 白 質 是 否 在 加 工 過 程 因 熱 處 理 過 度 而 遭 破 壞 的 諸 多 方 法 之 中 ， 藉 由 檢 測 樣品 中 蛋 白 質 於 0.2%氫 氧 化 鉀 溶 中 溶 解 度 的 凱 氏 法 ， 或 檢 測 速 度 更 快 的 Coomassie 藍 染 色 法 ，兩 者 都 是 相 當 可 靠 的 方 法 。 有 些 樣 品 ， 如 在 蛋 白 質 溶 解 度 檢 測 結 果 還 沒 出 來 而 未 能 立 即 判 定 是 否 可供 餵 飼 禽 畜 之 前 ， 既 已 呈 暗 褐 色 ， 或 是 深 褐 色 ， 這 種 情 形 應 可 作 為 研 判 該 大 豆 粕 樣 品 在 加 工 過 程 其蛋 白 質 是 否 已 遭 到 破 壞 很 好 的 初 步 指 標 。 在 僅 採 用 離 胺 酸 下 限 量 的 雞 隻 飼 糧 ， 如 果 其 所 用 大 豆 粕 中的 蛋 白 質 有 受 到 損 壞 ， 而 其 中 的 離 胺 酸 也 隨 之 遭 到 破 壞 ， 那 麼 情 形 就 會 變 得 更 為 嚴 重