1、题 目 激素对血糖浓度的影响及血糖浓度的测定 系 部 医学院 专 业 临床 班 级 临床 1004 学 号 200909155140 姓 名 刘兴志 指导教师 赵雪花 完成日期 2011 年 9 月 16 日【摘要】目的:（1） 掌握血糖测定的原理和方法。（2） 掌握血糖正常的范围和意义。（3） 熟记胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响，并解释其作用机制。方法：取正常家兔两只，饥饿 14-16 小时，各空腹取血 10ml，在相同的实验条件下，其中一只注射胰岛素（5 单位/公斤） ，另一只注射肾上腺素（0.5mg/只） ，半个小时后再次取血。测量血糖浓度。结果：注射胰岛素的家兔，血糖浓度降低，注射肾
2、上腺素的家兔，血糖浓度升高。结论：胰岛素可以降低血糖，肾上腺素可以升高血糖。【关键词】胰岛素，肾上腺素，血糖浓度。材料与方法1. 实验材料与试剂正常家兔两只。肾上腺素（1mg/ml）,胰岛素（5 单位/ml）,碘酒，消毒酒精，棉球，饱和硼酸溶液（6g 溶于 100ml 蒸馏水中摇匀后放置过夜后过滤即可） ，邻甲苯胺-硼酸，5%三氯醋酸溶液，饱和苯甲酸溶液，标准葡萄糖贮存液，标准葡萄糖应用液。2.实验对象正常家兔3.实验方法步骤3.1 取正常家兔两只。实验前预先饥饿 14-16h，称其体重并记录（2-3 公斤为宜） 。3.2 药前取血。先用剪刀剪去家兔耳缘的兔毛，然后用酒精擦拭，使其耳缘静脉充血
3、，再用干棉球擦干。碘酒，酒精消毒后用 7 号针头穿刺耳缘静脉，然后用盛有抗凝剂（草酸钠，2mg/ml 血）的小烧杯收集 10ml 左右的血液。收集时注意摇匀以防血液凝固。取血完毕，用干棉球压迫止血。3.3 注射胰岛素和肾上腺素。取血完毕后，给其中一只家兔注射胰岛素（5 单位/公斤为宜） ，另一只注射肾上腺素（0.5mg/只为宜） 。注射完毕后，稳定家兔情绪，放回兔笼。3.4 药后取血。药后半小时，再次从耳缘静脉取血。方法同 3.2。3.5 制备无蛋白学滤液。用微量加样器取抗凝血 0.4ml，滤纸擦净粘附于吸管尖端外表的血液，缓慢注入洁净小试管。然后加入 5%三氯醋酸 3.6ml，边加边摇匀。最
4、后置于离心机中，3000rpm 离心五分钟，取得上清液即为无蛋白学滤液。按此法，可制得药前药后血滤液。3.6 制备待测液。取 4 支试管，编号，按下表操作。ml 空白 标准管 待测液甲（药前）待测液乙（药后）蒸馏水 1.0 / / /标准葡萄糖应用液 / 1.0 / /无蛋白血滤液（药前） / / 1.0 /无蛋白血滤液（药后） / / / 1.0邻甲苯胺试剂 2.5 2.5 2.5 2.5各管混匀后，同时置于沸水中加热 8 分钟，取出用直来水冲洗试管壁冷却。3.7 测量待测液光密度。将 4 支试管中的待测液置于 722 型分光计，630nm 波长下进行比色，空白管校零，读取剩余三管的光密度。
5、如此再将另外三组的待测液进行比色，填入下表。（光密度 OD） 组一(注射胰岛素) 组二(注射肾上腺素)标准管 0.4143 0.3978待测液甲（药前） 0.3549 0.3828待测液乙（药后） 0.1537 0.66413.8 计算血糖。 计算公式如下：血糖（mg%）=OD 测定/OD 标准 X 100；按此公式可分别计算出四组待测液的血糖浓度。血糖 组一(注射胰岛素) 组二(注射肾上腺素)待测液甲药前(mg%) 85.66 96.23待测液乙药后(mg%) 37.09 166.944.实验结果据此实验,可初步得到以下结论:在其它外界条件相同的下,给家兔注射胰岛素,可使其血糖浓度降低,注射
6、肾上腺素,可使其血糖浓度升高.据此可推测,胰岛素具有降低血糖的功效,而肾上腺素具有升高血糖的功效.讨论在此实验中,我们给一只家兔注射胰岛素,另一只注射肾上腺素,结果前者血糖浓度降低,而注射肾上腺素的一组血糖浓度升高.据此我们推测:胰岛素具有降低血糖的功效,而肾上腺素具有升高血糖的功效. 但是机体血糖浓度调节是一个复杂的机制,是多种激素共同作用的结果.我们虽然控制了外界环境温度等实验变量,但是实验的可靠性还是很值得考究.例如,机体在危急的情况下会产生更多的肾上腺素来应急.家兔在实验中由于受到惊吓就可能分泌一定量的肾上腺素. 但是我们谁可以保证两只家兔的受惊吓程度是一样的,分泌肾上腺素的量是一样的
7、?而肾上腺素本身是我们的一个实验变量!药前药后明显的血糖浓度差,虽然可以说明问题得出结论,但是我想我们应该意识到误差存在的问题!通过这个实验我们应该明白,我们无法保证实验的绝对精准,但是要尽量去做,分析误差的来源,排除相关因素的干扰,为我们的科学实验增添一份说服力.关于胰岛素降低血糖,肾上腺素升高血糖的机制无法通过此实验探明,查阅相关资料得知胰岛素降低血糖的机制1.促进肌、脂肪组织等的细胞膜葡萄糖载体将葡萄糖转运入细胞。2.通过增强磷酸二酯酶活性，降低 cAMP 水平，从而使糖原合酶活性增强、磷酸化酶活性降低，加速糖原合成、抑制糖原分解。3.通过激活丙酮酸脱氢酶磷酸酶而使丙酮酸脱氢酶激活，加速
8、丙酮酸氧化为乙酰CoA，从而加快糖的有氧氧化。4.抑制肝内糖异生。这是通过抑制磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶的合成以及促进氨基酸进入肌组织并合成蛋白质，减少肝糖异生的原料。5.通过抑制脂肪组织内的激素敏感性脂肪酶，可减缓脂肪动员的速率。肾上腺素升高血糖的机制主要通过肝和肌肉的细胞膜受体、cAMP、蛋白激酶级联激活磷酸化酶，加速糖原分解。主要在应激状态下发挥调节作用。 若深入到细胞分子水平研究激素对血糖浓度调节的影响,我想可以通过研究激素对细胞膜上的受体,载体,以及细胞内的 cAMP 浓度的影响来研究. 参考文献1查锡良.生物化学,人民卫生出版社.2008.2 张敏.胰岛素的聚乙二醇化和聚乙二醇化胰岛素降血糖作用的研究D. 复旦大学,2006.3 魏成翠,刘阿玲,贾琳. 血液标本放置时间对血糖检测结果的影响J. 中国误诊学杂志, 2009, (15) .4 张恺芳,郭小芳,田英. 应激性肾上腺素与动脉粥样硬化相关机制研究J. 实用全科医学, 2006, (04) .
