1、北京燕化医院 人类免疫缺陷病毒抗原及抗体联合测定 CG-B521人类免疫缺陷病毒抗原及抗体联合测定B52.1 第一页页首内容人类免疫缺陷病毒抗原及抗体 HIV Ag/Ab 联合测定（CMIA 法）燕化医院检验科操作规程文件号：CG-B52第 1 版共 4 页2012 年 1 月 1 日起实施本规程每 2 年复审一次复审日期：2014 年 1 月 1 日复审人：规程编写者：赵玉玲 审批者：批准日期：2012 年 1 月 1 日文件分发部门和/或个人：医务科：院长办公室：院档案室：检验科：主任：李华免疫检验室：赵玉玲北京燕化医院 人类免疫缺陷病毒抗原及抗体联合测定 CG-B522B52.2 用途A
2、RCHITECT人类免疫缺陷病毒抗原及抗体联合检测运用化学发光微粒子免疫检测法(CMIA)，同时定性检测人血清或血浆中的HIV p24 抗原及人类免疫缺陷病毒1型和/或2型（HIV-1和或HIV-2）抗体。提高HIV病毒感染的早期检出率。人类免疫缺陷病毒抗原及抗体联合检测有助于诊断HIV-1/HIV-2病毒感染。ARCHITECT人类免疫缺陷病毒抗原及抗体联合检测结果不区分HIV p24抗原、HIV-1抗体或HIV-2抗体。B52.3 原理ARCHITECT人类免疫缺陷病毒抗原及抗体联合检测是一种两步免疫检测法。运用化学发光微粒子免疫检测（CMIA）技术，结合灵活的检测模式，即Chemifle
3、x技术，对人血清和血浆中的HIV p24抗原及HIV1（M组和O组）/HIV-2抗体进行测定。B52.4 标本要求B52.4.1 血清类标本。空腹，按标准常规方法采集。B52.4.2 标本在 2-8可稳定 14 天；如果检测用时超过 14 天，则将样本贮存于20或更低温度下。标本避免反复冻融。B52.4.3 样本出现如下状况时，请勿使用。B52.4.3.1 热灭活的样本；混合样本；严重溶血的样本 (500 mg/dL)； 明显受微生物污染的样本。B52.4.3.2 尸体样本或任何其他体液。B52.4.4 注意：B52.4.4.1 接受了肝素治疗的患者，其样本可能会出现部分凝固并包含纤维蛋白。肝
4、素治疗前收集样本。B52.4.4.2 试验对照和含高水平胆红素(20 mg/dL)、甘油三酯(3000 mg/dL)、蛋白(4-12g/dL)红细胞(0.4% v/v) 或血红蛋白(500 mg/dL)的20多份非反应性或20多份强反应性样本在定性北京燕化医院 人类免疫缺陷病毒抗原及抗体联合测定 CG-B523检测性能方面并无差异。B52.5 试剂B52.5.1 试剂来源：美国雅培诊断产品中国部。HIV-1/HIV-2抗原（重组）和HIV p24抗体（小鼠，单克隆）包被微粒子；吖啶酯标记的HIV-1抗原（重组）、吖啶酯标记的HIV-1/HIV-2合成多肽，及吖啶酯标记的HIV p24抗体（小鼠
5、，单克隆）结合物；稀释液B52.5.2 试剂准备B52.5.2.1 试剂必须储存于 2-8，离开此环境后立即使用。每盒试剂需经定标通过后方可使用。定标后的试剂稳定期 30 天。B52.5.2.2 每次更换批次时都应进行定标。如果质控结果不在可接受范围值内，则需要进行重新定标。B52.5.2.3 试剂有效期为 8 个月，超过失效期的试剂不可使用。B52.6 仪器和校准B52.6.1 使用美国雅培公司生产的雅培 i2000 全自动化学发光分析仪。B52.6.2 每天开机后仪器进行自检，另外由厂家对该仪器进行定期校准。B52.7 操作步骤1. 开机1）打开仪器系统控制中心开关和运行中心开关，仪器进行
6、自检，此时不能打开仪器盖。自检结束后出现 offline 屏幕；10 分钟后进入仪器 stopped 状态。2） 点黄样本中心模块和运行中心模块的 stopped，按 start up 键，约 10 分钟进入 ready状态。查看库存，不足时补充或更换。3） 把试剂放入试剂仓内（注意试剂条码朝向中心方向） ，点黄两个模块的 ready，按 run键，约 15 分钟进入 running 状态。定标1）按 order 菜单，选择 calibration order，输入架子号、位置号；选择 HIV Ag/Ab，按add order 键即可。2）把定标液滴入样本杯，然后放在输好的样本架上，把样本架推
7、进槽内，即开始定标。北京燕化医院 人类免疫缺陷病毒抗原及抗体联合测定 CG-B5243）按 result 菜单，选择 calibration result 查看定标结果。常规标本1）按 order 菜单，选择 patient order，输入架子号、位置号；选择 HIV Ag/Ab，按 add order 键即可。2）把样本加入样本杯内，然后放在输好的样本架上，把样本架推进槽内，即开始运行。3）按 status 键，监视检测的进行情况，注意操作过程中，不能打开试剂仓盖。4）按 result 菜单，选择 patient result 查看病人结果。如需重测按 1）-4）步骤进行。5）测试结束，把
8、样本架拉出槽外。6）病人结果自动传输到中文电脑 LIS 系统，输入病人信息打出检验报告。B52.8 质量控制室内质控：雅培i2000包含三个质控品。其中两个阳性质控品每个工作日测定一次。质控间隔期应适合于各实验室的具体要求。质控值必须在质控品说明书中规定的范围之内。如果质控超出了规定范围，那么相应的检测结果无效，必须进行重新测试。必要时需重新校准。室间质控：参加卫生部临检中心和北京市 CDC 艾滋病确证实验室组织的室间质评。B52.9 计算对每一个标本，仪器会自动计算出结果。B52.10 检验结果的解释S/CO1.00的样本被认定为阴性（非反应性）。S/CO1.00的样本被认定为阳性（反应性）
9、。注意：本实验室为 HIV 初筛实验室，只能出具“HIV 抗体”阴性报告。若初试阳性必须经离心后复检两次。并同时用另外一种不同原理和不同厂家的试剂复试。如两种试剂复试均呈阴性反应，则报告 HIV 抗体阴性。如复试均呈阳性反应，或一阴一阳，需按全国艾滋病检测技术规范送 HIV 确认实验室进行确认实验，并按要求填写“HIV 阳性复检申请单” 。检测结果输入 LIS 系统，并打印报告单。B52.11 临床意义 ：抗 HIV 抗体阳性提示如下B52.11.1 可推定存在HIV p24抗原和/或HIV-1/HIV-2抗体；可作为传染源将HIV传播他人。B52.11.2 抗 HIV 阳性者（除外 18 个
10、月的婴儿） ，5 年之内将有 10-30%的人发展为艾滋病。B52.11.3 对抗 HIV 阳性的母亲所生婴儿，如 18 个月内检测血清抗 HIV 阳性，不能诊断为HIV 感染，尚需用 HIV 核酸检测或 18 个月后的血清抗体检测来判断。北京燕化医院 人类免疫缺陷病毒抗原及抗体联合测定 CG-B525B52.12 检验方法的局限性B52.12.1 检测结果与临床迹象不符时，需要通过其它检测验证检测结果。接受过小鼠单克隆抗体制剂诊断或治疗的患者，其样本中可能含有人抗小鼠抗体(HAMA)。使用通过鼠单克隆抗体制备的试剂盒(如ARCHITECT风疹病毒IgG抗体)检测这些样本时，可能产生异常值（假
11、性升高或假性降低）。试剂中包含能降低HAMA阳性样本影响的成分。需要其他信息才能明确诊断。B52.12.2 人血清中的异嗜性抗体与试剂免疫球蛋白反应，干扰体外免疫测定。经常接触动物或动物血清制品的患者容易受到干扰，检测会出现异常值。需要其他信息才能明确诊断。B52.13 试剂性能B52.13.1 精密度B52.13.2 特异性特异性测定为99.5%。B52.13.3 灵敏度HIV-1 p24 抗原的分析灵敏度为50 pg/mL。B52.14 安全规则B52.14.1 检测必须符合 HIV 实验室管理规范和实验室生物安全守则的规定，严格防止交叉污染。严格健全和执行消毒隔离制度。B52.14.2 所有样品、洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。B52.15 保密规则实验室人员必须严格遵守 HIV 实验室保密制度
