1、microRNA 在各种疾病中发挥的作用微生物与生化药学 金靖 S0930580摘要 MicroRNA（miRNA）是一类可负性调控基因表达的长度约为 22 个碱基左右非蛋白编码的 RNA 家族，主要功能是调节生物体内与机体生长、发育、疾病发生发展过程有关的基因的表达调控。miRNA 在肿瘤、心血管疾病、糖尿病、阿尔茨海默病、帕金森病和艾滋病等多种疾病中都起着重要作用。本文将对 miRNA 与人类疾病的关系作一综述。关键词 microRNA 疾病The role of the microRNA in a variety of diseasesAbstract MicroRNAs (miRNAs
2、) are short non-coding RNAs involved in negativeregulation of gene expression. Their major function is the regulation to the gene expression of growth、development and diseases. miRNA plays an important role in cancer、 cardiovascular diseases、diabetes 、Alzheimers disease、Parkinsons disease、 AIDS and
3、so on. This review summarizes the relation between microRNA and diseases.Key words microRNA diseasesMicroRNA (miRNA)是一类可负性调控基因表达的长约 22nt 的非编码的单链 RNA 分子，广泛存在于从植物、线虫到人类的细胞中，其通过碱基配对的方式结合到靶 mRNA，从而抑制其翻译，但不影响其转录。最早发现 miRNA是在 1993 年， Lee 等研究人员在秀丽新小杆线虫 (C.elegans)中发现了控制着线虫时序性发育的 lin-4。2000 年，Reinhart 等发现了另
4、一个具有转录后调节功能的小分子 RNA：let-7。随后的几年时间里，许多研究人员相继发现了这类 RNA。目前，在各物种中共发现 4,449 个 miRNA，其中在人类中发现并已经得到实验证实的有 474 个。这些 miRNA 的功能主要是调节生物体内与机体生长、发育、疾病发生过程有关的基因的表达，对 miRNA 的深入研究，势必有利于我们对生物体生理、病理机制的理解，并为疾病的诊断和治疗提供理论基础和新思路。 11 miRNA 的发现1993 年 Lee 等在对秀丽新小杆线虫(C. elegans)进行突变体的遗传分析中意外发现一种控制细胞发育时序的长度约为 22 nt 的小分子非编码单链
5、RNA-lin-4；2000 年 Reinhart 等在线虫中发现了另一种重要的具有转录后调节作用的miRNA-let-7。 lin-4 和 let-7 即是首先被确认的 miRNA，它们通过部分序列结合到目的 miRNA 靶的 3UTR，以一种未知方式诱发蛋白质翻译抑制，通过调控一组关键 mRNA 的翻译调控线虫发育过程。随后对 miRNA 的研究不断增加，多个研究小组在包括人类、果蝇、植物等多种生物物种中鉴别出数百个 miRNA，预计大约有 1 000 种人类 miRNA 参与近三分之一人类蛋白编码基因的调控。 21.1 定位克隆目前，已知的 miRNA 基因多是通过定位克隆的方法发现的。
6、定位克隆 miRNA 分子的简要步骤：细胞裂解，获得总 RNA；变性胶分离并纯化 1925 nt 的小 RNA；小 RNA 分子通过分离、纯化与 3 和 5寡聚核苷酸接头连接；进行 RT - PCR 获得 cDNA；cDNA 连接载体，构建 cDNA 文库；筛选克隆进行测序，获得 miRNA 序列。该方法常受其他小分子(如 siRNA)的影响，易产生假阳性。 31.2 生物信息学方法生物信息学方法是依据成熟的 miRNA 基因(具有较大的序列同源性以及前体的茎环结构) 在种属间具有高度的保守性特点，以某些 miRNA 基因保守结构的特点为基础设计计算机程序，扫描基因组序列以鉴定潜在的 miRN
7、A 基因的方法。该方法根据比较基因组学原理并结合生物信息软件，以序列为基本框架在不同种属间进行序列比对，找寻可能的 miRNA 基因。根据同源性的高低再进行 RNA 二级结构预测，将符合条件的候选 miRNA 基因与已经通过试验鉴定的 miRNA 分子进行比较分析，最终确定该物种 miRNA 的分布及数量。Xie X 等人在人、小鼠、大鼠和狗的基因组比对分析中指出， 3- UTR 存在大量的调节结构域，且近一半的调节结构域与 miRNA 有关。其中 miRNA 5端的 28 个核苷酸为“种子区” ，其对于 miRNA 与 3- UTR 的配对非常重要。miRNA 的“ 种子区”能很好地与靶序列
8、配对，靶序列在不同物种中通常十分保守， “种子区”在同源的 miRNA 中很保守。因此，可用“种子区”序列预测未知的 miRNA 基因。目前，国际上计算机分析工具已被广泛地应用于许多物种候选基因的筛选。它们鉴别出的基因中有相当一部分都在试验中得到验证，这一方法由于灵敏度高，也已被应用于人类 miRNA 基因的寻找。生物信息学与生物芯片及定位克隆技术相结合也可预测 miRNA 基因，Bent wich I 等通过计算机在整个人类基因组中筛选出一些可折叠为发夹结构的序列，从 40 多万个潜在的 miRNA 中挑选了首批 5300 个“代表 ”，借助高通量生物芯片在胎盘、睾丸、胸腺、前列腺和脑组织中
9、进行筛选，发现其中有 886 个表达，通过选择其中 359 个进行克隆与测序，研究者们鉴别出 89 种新的 miRNA，从这些结果中推断人类基因组中至少有 800 个 miRNA。 32 miRNA 的特征和作用机制2.1 miRNA 的特征研究表明，miRNA 有以下几个明显特征：miRNA 是一种长度为 1925 nt 的单链小分子，广泛存在于真核生物中，是一组非编码短序列 RNA，其本身不具有开放阅读框架 (ORF)，但在 3端可以有 12 个碱基的长度变化，对 miRNA 的具体长度范围尚无统一标准，在拟南芥和烟草中发现的 26 nt RNA，在四膜虫( Tetrahym enas)中
10、发现的能使大部分 DNA 失活的 28 nt RNA 也被归于其中；其前体具有发夹或折叠的二级结构，不含有大的内部环状结构和突起，且成熟的 miRNA 应位于发夹结构的颈部； 1miRNA 能够互补配对结合于基因序列的侧翼区域，成熟的 lin - 4 和 let - 7 与靶 mRNA 的 3非翻译区互补结合可抑制靶 mRNA 的翻译；由核酸酶 Dicer 作用于前体的双链而生成的产物含有 3羟基和 5磷酸的核苷酸片段，这一特点使它与大多数寡核苷酸和功能 RNA 的降解片段区别开来；大多数 miRNA 基因以基因簇形式存在于基因组中，它们多以顺反子的形式转录出前体转录本，且大部分位于独立的转录
11、单位中，人类 miRNA 基因分布于除 Y 之外的所有染色体中； miRNA 在物种间具有高度的保守性、时序性和组织特异性。约 12%的 miRNA 在线虫、果蝇、哺乳动物和植物中呈现保守性。序列比较发现这些保守序列只有 12 个碱基的差异，mir - 1、mir - 34 和 mir - 87 在无脊椎动物和脊椎动物中高度保守。32.2 miRNA 的作用机制已知动物 miRNA 靶基因中 miRNA 的结合位点通常有多个，例如 lin-14 基因有 7 个靶点，并且总在 3-UTR。然而，这对发现动物 miRNA 结合位点可能有偏颇， 因为这主要建立在使用仅有 3-UTR 序列构成数据库的
12、计算机预测基础上，这些结合位点的数量和互补性可能与翻译减弱的程度有关。如果仅有一个位点结合，表达减弱；但是如果所有位点都结合，翻译就完全抑制。实际上协同翻译抑制已经通过在 3-UTR 添加多个结合位点而得到证实。再者翻译抑制具有可变的调节性和可逆性，即 miRNA 从结合位点移去 miRNA 又可翻译。相反，在编码区裂解就永久破坏了 mRNA，产生了只有 mRNA 重新转录才能逆转的彻底抑制。miRNA 转录后抑制的确切分子机制在很大程度上仍然未知。 研究的最好例子之一是 lin-4，它通过翻译抑制负调控靶基因 lin-14。lin-4 和 lin-14 碱基配对对其在体内的相互作用非常关键，
13、因为影响它们互补的突变体会减弱或丧失该负调控作用。令人感兴趣的是 lin-4 仅抑制 lin-14 蛋白的合成，而不影响 lin-14mRNA 的合成丰度。而且，在存在 lin-4 的情况下， lin-14 翻译起始似乎正常发生，因为即使 lin-4 表达，lin-14mRNA 仍能有效地形成多聚核糖体。因此，推测 lin-4 翻译抑制发生在翻译起始后，可能在翻译延伸和（或）lin-14 蛋白释放过程。靶基因的翻译抑制并不是 lin-4 所特有，目前研究表明，在整个动物界，靶基因的翻译抑制是通过 miRNA 负调控其靶标的主要调控机制。尽管大多数动物 miRNA 抑制靶基因的翻译，然而，一个新
14、发现的哺乳动物 miRNA-miR-196，与其靶标 Hoxb8 几乎完全配对，直接介导鼠胚胎和培养细胞中Hoxb8mRNA 的裂解。所以，miRNA 与目的基因的作用方式有 2 种，miRNA 以何种方式与目的基因作用，同 miRNA 与目的基因的配对程度有关。miRNA 与目的基因不完全配对时， 就以抑制目的基因翻译的方式作用；miRNA 与目的基因某段序列配对完全时，就可能引起目的基因在互补区断裂而导致基因沉默。 43 miRNA 与疾病的关系3.1 miRNA 与肿瘤的关系3.1.1 miRNA 与肿瘤的发生发展目前已经识别和鉴定的人类 miRNA 序列有 321 个，其中 234 个
15、被实验证实。多数 miRNA 定位在与肿瘤相关的染色体部位，miRNA 的异常表达与特定肿瘤有关，可以调控重要的肿瘤相关基因，参与肿瘤细胞增殖、凋亡、侵袭或血管形成等过程。这些迹象表明，miRNA 在人类肿瘤发生、发展中发挥了重要作用。 5认为， miRNA 在肿瘤发生中的作用主要在于 3 个方面：(1) 有些编码 miRNA 的基因可能起着癌基因的作用；(2)有些 miRNA 基因则可能起到抑癌基因的作用；(3) 一些致瘤病毒编码的 miRNA 也可能参与相关肿瘤的发生。 6以往的研究发现蛋白编码基因的异常会导致肿瘤的发生发展，自 2002 年11 月 Croce 研究组首次报道 miRNA
16、 异常与肿瘤相关，越来越多的证据显示miRNA 在肿瘤的发生发展中起着重要的作用。有关 miRNA 的研究，为更全面深入地了解肿瘤的发病机理提供了新的思路。 7多个研究小组利用 microarray和磁珠杂交技术发现良性和恶性肿瘤中 miRNA 的表达水平发生改变，但是miRNA 表达水平的改变是肿瘤发生的“因”还是“果”尚不清楚。相对于正常组织，有些 miRNA 的表达水平在肿瘤组织中发生明显下调，如肺癌中的 let-7；慢性淋巴细胞性白血病(CLL)中的 miR-15a/miR-16-1 表达簇；结肠癌中的miR-143/miR-145。有些 miRNA 的表达水平则在肿瘤组织中发生明显的
17、上调，乳头状甲状腺瘤、恶性胶质瘤中的 miR-221/miR-222 ；睾丸生殖细胞瘤中的miR-372/miR-373 ；乳腺癌、肺癌中的 miR-21；霍金森淋巴瘤、 B 细胞型淋巴瘤中的 miR-155。 8目前认为引起 miRNA 在肿瘤中表达水平发生改变的可能原因：(1)50的miRNAs 位于或靠近基因组中肿瘤相关的脆性区域，即经常发生缺失、扩增、易位的染色体片段，如在慢性淋巴细胞性白血病中表达降低的 miR-15a/miR-16-1，位于肿瘤中经常缺失的 13q14，在淋巴瘤中上调的 miR-17-92 表达簇，位于肿瘤中经常发生扩增的 13q31；(2)由于异常甲基化造成的 m
18、iRNA 转录水平的明显改变，如在前列腺癌、膀胱癌中的 miR-127；(3)miRNA 加工过程的关键蛋白的表达异常，如肺癌中 Dicer 表达水平的下调； (4)miRNA 前体上的突变或多态影响 miRNA 的加工成熟：如 miR-15a/16-1 前体上游 7bp 的 C/T 多态位点，位于 miR-125a 成熟体的 G/T 多态位点。肿瘤中常呈现蛋白编码基因的突变，至今为止只有两篇文献报道在肿瘤组织中检测 miRNA 前体序列的改变，其中Croce 小组在 75 例 CLL 中分析了 42 个 miRNA，共计在 11 例样本中发现 5 种 miRNA 胚系突变。我们实验室在 96
19、 例肝癌组织中分析了 59 个 miRNA 前体序列，没有发现碱基突变。miRNA 的突变是否与肿瘤的发生发展相关还需在更多的肿瘤标本上进行验证。 83.1.2 miRNA 与肿瘤的基因治疗miRNA 通过与特定靶 mRNA 结合，负性调控靶 mRNA 的转录和翻译。通过补充 miRNA 或使用抑制物调节靶 mRNA 及其蛋白的表达，达到控制肿瘤恶性增殖和促进细胞凋亡的目的。miRNA 作为重要的“肿瘤干涉基因”的出现对肿瘤的基因治疗具有很大影响。抑制 miRNA 通常采用给予化学合成的、与成熟 miRNA 序列互补的反义寡核苷酸 ( anti-miRNA oli-gonucleotides，
20、AMOs)的方法。近来人们开发出了一组拮抗 miRNA 的药物，被称为 “antagomirs”，如反义 2-O- 甲基核苷酸 ( 2- O- methyl ) 和锁定核苷酸( locked- nucleic- acid) ，它们具有与天然 miRNA 互补的序列。对小鼠静脉注射拮抗 miR-16、miR-122、miR-192 和 miR-194 的“antagomirs ”，会使小鼠肝、肺、肾、心、小肠、脂肪、 皮肤、骨髓、肌肉、卵巢和肾上腺等组织中相应的 miRNA 明显减少。这些小分子主要降低 miRNA 的转化，比其他抗肿瘤药物更为稳定，并且毒性较小，可以有效的控制 miRNA 在各
21、个器官中的活动，从而发挥治疗作用。相反，通过补充与天然 miRNA 序列相同的小分子可增强 miRNA 的作用。Takamizawa 等将合成的 let-7 补充到 let-7 低表达的肺腺癌细胞株 A549 中，抑制 RAS 蛋白的翻译，肿瘤细胞的生长明显受到抑制。这一方法的作用机制类似于 RNA 干扰。目前 RNA 干扰技术是利用人为设计的一段小干扰 RNA (即siRNA)来进行基因干涉，但人们发现，应用 siRNA 来进行肿瘤基因治疗会使机体产生较大的免疫反应。而 miRNA 序列来源于细胞基因组中，其序列相对固定，并且体内存在 miRNA 表达的调控机制，激活内源性 miRNA 机制
22、可以导致正确的 miRNA 的加工和靶基因的抑制。因此 miRNA 的发现为肿瘤的基因治疗提供了更好的选择，miRNA 药物有望成为更先进的 RNA 干扰药物。 53.2 miRNA 与心血管疾病的关系越多研究发现 miRNA 在生物发育过程中存在组织特异性表达，参与形成并维持组织特异性。有数十种 miRNA 在心肌细胞中被鉴定，例如：miR-133a、miR-133b 、miR-1d、miR-296 等，它们在心血管疾病中发挥重要作用。 93.2.1 miRNA 与先天性心脏病 (简称先心病 ) 在心脏发育过程中，Hand2 是胚胎发育初级阶段扩增肌肉前体细胞的必需基因，该基因突变或缺失可导
23、致心脏发育不良甚至使心脏停留在早期发育状态，尤其是第二心脏区域细胞 ( the second heart field) ，后者将分化为右室及流出道。Zhao 等研究发现，miR-1 可以适时阻止 Hand2 蛋白合成，调控心脏正常发育，此发现有助于了解干细胞增殖分化为心肌细胞的机制并为先心病诊疗提供新线索。 93.2.2 miRNA 与心力衰竭 miRNA 是心肌细胞异常增生的潜在抑制物或加速剂。特定 miRNA 表达上调，抑制心肌细胞异常增生从而阻止或延缓心脏重构的进程。表达下调，促进心肌细胞异常增生，加速心脏重构。 10Van Rooij 等应用并列 miRNA 微点阵方法分析 186 种
24、不同 miRNA 在两种心肌肥厚鼠模型中的表达。其中，主动脉缩窄小鼠模型组( 通过结扎胸主动脉造成心脏后负荷增加，建立肥厚心肌模型 thoracic aortic banding，TAB)与假手术组 (仅行开胸手术，不进行胸主动脉结扎)相比，有 27 种 miRNA 表达明显增加，15 种表达降低。显著表达激活钙磷酸酶 A ( activated calcineurin A，CnA)小鼠模型组 (通过转基因技术使鼠心肌 CnA 过度表达，建立心肌肥厚模型)有 33 种 miRNA 高于对照组 (CnA 表达正常的同胞小鼠) ，有 14 种表达降低。TAB 组和 CnA 组上调的 miRNA 中
25、有 21 种相同，下调的 miRNA 中有 7 种相同。该研究还发现 miR-195 上调可诱发心肌细胞肥大，从而确定了 miRNA 在心肌肥大、心力衰竭发病过程中的调节作用。利用病毒或脂质体将具有逆转心脏重构功能的 miRNAs 引入机体内，或利用抗 miRNA 寡聚核苷酸 ( 2- O-methyl- modified antisense oligoribonucleotides，AMOs) 灭活促进心脏重构的 miRNAs，均可延缓或逆转心力衰竭的进程。Kru 等使用 antagomirs (与胆固醇耦联的 AMO)注入小鼠体内后，可有效抑制多个器官 miRNA 活性，可能成为一种有希望
26、的治疗药物。miR-208是一种心脏组织特异性表达的 miRNA，在心肌细胞增生、纤维化及调节 -心肌肌球蛋白链 (-myosin heavy chain，-MHC) 表达中发挥作用。miR-208 由-心肌肌球蛋白链 (- myosin heavy chain,-MHC)基因编码，后者可以促进心脏收缩蛋白的生成，调节心肌增生。miR-208 正常表达的小鼠心脏发生损害，而缺乏 miR-208 表达的小鼠则表现健康，-MHC 纤维含量减少。因此，miR-208 可能成为治疗心力衰竭的新靶点。 93.2.3 miRNA 与心律失常 Yang 等发现 miR-1 可以通过作用于 KCNJ2 和 G
27、JA1 减慢传导，促使细胞膜去极化。小鼠心脏内过量表达 miR-1 可以导致心律失常，通过反义寡核苷酸移除 miR-1 后，梗死小鼠心律失常明显缓解。因此， miR-1 有望成为心律失常的治疗靶点。超极化激活环化核苷酸调控阳离子通道基因 (Hyper polarizati on- activated，CyclicNucleotide- gated channels，HCN)，是“ 内源性 ” 起搏通道基因 ，在舒张期选择性激活，存在较大的潜在起搏能力。其中 HCN2 主要分布于心脏和脑组织， HCN1 和 HCN4 除分布于脑组织和心脏外，还分布于窦房结。在 Sp1 促进 HCN2 /HCN4
28、 转录翻译的同时，miR-133 和 miR-1 明显限制 HCN2 /HCN4 蛋白的表达。两种不同方式的调节决定了在不同生理及病理条件下 HCN2 /HCN4 的功能水平。移除任何一种 miRNA 都不能转复由现存miRNA 所引起的基因抑制，表明 HCN2 受 miR-133 和 miR-1 两者共同作用。Xiao 等研究发现：通过反义寡核苷酸技术减少内源性 miR-1 和 miR-133 可使 HCN2 /HCN4 表达有效增加，有望研制出生物起搏器。HERG 基因异常将导致心肌内向整流性钾通道功能异常，使 3 相复极延长而导致长 QT 综合征 (LQTS)。miR-133 可以作用于
29、 HERG 基因导致该基因表达异常，因此应用反义寡核苷酸技术抑制 miR-133，可以增加正常 HERG 基因表达。进而达到治疗 LQTS 的目的。 93.3 miRNA 与糖尿病的关系miRNA 研究将为治疗糖尿病提出新途径，Rockefeller 大学研究人员最近报道了一项对新发现 miRNA 基因的研究，揭示出它具有调节胰腺中胰岛素分泌的功能。此发现第一次确定了一个哺乳动物 miRNA 基因的生物功能。新研究中研究人员发现 miR-375 能够调节胰岛素分泌。 11Nikolaus Rajewsky 研制出一种能够预测基因组中 miRNA 的靶标的计算机程序。在此项研究中，他们利用这个程
30、序预测 miR-375 的基因靶标通过实验被证实，并因此了解到 miR-375 在调节胰岛素分泌中的功能。此项研究为了解机体如何调节胰岛素分泌过程开辟了新路，并可能为糖尿病的治疗奠定基础。而且，这些发现首次定义了一种哺乳动物 miRNA 基因的生物功能。研究还表明计算机方法和实验的紧密结合是“后基因组时代”的生物学研究不可或缺的策略。 23.4 miRNA 与阿尔茨海默病的关系如今，许多研究已经专注于 miRNA 在不同疾病中表达的改变，最近发现表明 miRNA 是神经退行性变的促成因素。 12研究发现在阿尔茨海默病（AD） ，甚至在疾病恶化最初阶段的病人上 miR-107 表达水平明显下降。
31、miR-107 也许通过靶向作用 淀粉样蛋白前体蛋白裂解酶 1（BACE1）涉及加速疾病过程，BACE1 是一种裂解骨髓前体蛋白到产生神经毒性淀粉样蛋白肽的内肽酶。miR-107 与 BACEmRNA 的 3UTR 连接，下调 BACE 的表达。miR-107 的缺失导致疾病中 BACE 水平的增加，这些通过 miRNA 分析，昂飞微数列、生物信息学预测和原位杂交被证明。因此，这种蛋白质的调节异常也许在 AD 的发病机制中起到重要作用。在以前的工作中，Lukiw 通过检查胎儿、成人和阿尔茨海默病人脑的海马区域的 miRNA 的丰度，发现一些 miRNA 的表达在不同病理阶段被不同地调节。特别地
32、，与年龄相一致的成人比较，miR-9，miR-125b 和miR-128 在 AD 病人的脑中上调。 133.5 miRNA 与帕金森病的关系miRNA 可能也和帕金森疾病相关， 14最近一项研究调查它们在哺乳动物中脑多巴胺能神经元（DNs）的作用和鉴定 miR-133b 在 DNs 作为特定的表达，但是在帕金森病人的中脑组织中非常少或缺乏。miR-133b 通过下调对等相似的同源结构域转录因子 Pitx3 的表达的机制调节成熟作用和中脑 DNs 的功能。此外，在哺乳动物和无脊椎动物的研究已经显示 miRNAs 涉及神经保护，脆性 X染色体综合症和精神分裂症。 133.6 miRNA 与艾滋病
33、的关系近年研究发现，miRNA 与产生艾滋病的人类免疫缺陷病毒（HIV）有着紧密联系。 15最新研究中发现 miRNA 产生过程可与 HIV 生活周期以及肿瘤的抑制相关联。负责对 miRNA 进行加工的 3 个蛋白中有 2 个就是早期负责制造miRNA 的蛋白，而发现的第 3 个蛋白也不是未知的蛋白，而是早已引起科学家注意的蛋白TRBP（TAR RNA-binding protein） ，它是在研究 HIV 转录时第1 次被发现，同时它也被确定是一个肿瘤抑制蛋白。TRBP 的发现表明 RNA 干涉可能在 HIV 复制时起到关键作用。 由于 TRBP 与肿瘤之间密切相关， RNA干涉与肿瘤的关系
34、有待进一步探索。 24 小结与展望自从 15 年前 miRNA 被发现，它们已经被公认作为转录调节的介导。这篇综述讨论了它们在许多疾病中的作用。提出超过三分之一的人类基因在 miRNA的控制下，这解释了它们在疾病中的广泛作用。miRNA 在肿瘤、心血管疾病和糖尿病等多种疾病中的重要作用正引起各国研究者广泛关注，miRNA 与各种疾病关系的研究正在如火如荼的进行。寻找调控的 miRNA 基因以及 miRNA 的靶基因，揭示 miRNA 在各种疾病中的作用机制仍是摆在科学家们面前的主要问题。相信随着对这种特殊分子的深入了解，一些以 miRNAs 为靶点的新药物会不断出现，不但有助于认识生命过程，
35、而且将为肿瘤和其它疾病的治疗带来新的希望。参考文献1 盛熙晖 ,杜立新. MicroRNA 及其在人和动物上的研究进展J. 遗传, 2007, 29(6): 651658.2 夏洪平 ,马跃东 . microRNA前景光明的药物开发新靶点J. 食品与药品, 2006, 8(09A ) :19-21.3 索效军,张年. microRNA 的研究进展J. 黑龙江畜牧兽医, 2007, 12:24-25.4 郑玉姝,赵朴,赵宏坤. microRNA 及其应用前景J. 生物技术通讯,2007,18(1) :119-121.5 宋宝,宋现让,魏玲. microRNA 与人类肿瘤J. 基础医学与临床,20
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