1、组织DNA 抽提操作规程1、目的提取组织总 DNA。2、方法平衡酚抽提法。3、检测鉴定所需试剂和设备3.1 试剂及溶液3.1.1 匀浆缓冲液 由8份A液, 1份B液及1份C液组成(用时新鲜配制).A 液: Tris 0.05 mo l/L；NaCl 0. 1 mo l/L；EDTA 0.1 mo l/L ; pH 7.0 8.0。B 液: 5%的SDS。C 液: 2mg/mL的蛋白酶K。3.1.2 平衡酚 pH 6.7 7.8. 另外，氯仿异戊醇(24 ：1)；无水乙醇及70% 乙醇。3.2 设备组织研磨器（或超声粉碎仪）、1.5ml 离心管、水浴锅、高速离心机、冰箱。4、操作步骤4.1 研磨
2、 取少量动物组织迅速剪碎于装有0.6 mL匀浆液的1.5 mL 离心管中, 用特制的与离心管相匹配的小杵研磨。4.2 水浴 37水浴1 3h，直至混合液消化得很清亮为止。4.3 酚抽提 在混合液中加入等体积的平衡酚，上下缓慢颠倒十次，切勿剧烈振荡，在台式高速离心机上6 000 r/min离心10 min，取上清液。4.4 重复步骤4.3 直至水相与酚相的界面处看不到白色的蛋白质层为止, 取上清液。4.5 氯仿异戊醇(241) 抽提 在上清液中加入等体积的氯仿异戊醇, 上下缓慢颠倒十次，在台式高速离心机上8 000 r/m in 离心10 m in, 取上清液。4.6 沉淀DNA 在上清液中加入2 体积的冷无水乙醇( 预先置- 20冰箱内) 沉淀DNA 。冰箱内放置10 min, 12 000 r/min 离心10 min, 弃上清液。4.7 洗涤DNA 在留有沉淀的离心管中加入1 mL70%的冷乙醇洗涤DNA , 在台式高速离心机上10 000 r/min 离心5 min ，倾去上清液。4.8 保存 自然干燥，冰箱内4长期保存，使用时加入超纯水或TE 溶解。5、DNA样品的检测1% 的琼脂糖凝胶电泳检测。 紫外分光光度计（DU730）检测。6、注意事项
