1、Aglent1100 型液相色谱仪操作规程.txt48 微笑，是春天里的一丝新绿，是骄阳下的饿一抹浓荫，是初秋的一缕清风，是严冬的一堆篝火。微笑着去面对吧，你会感到人生是那样温馨。Aglent1100 型液相色谱仪操作规程1. 目的：建立安捷伦 1100 型高效液相色谱仪的标准操作规程，确保操作的准确与可靠。2. 依据：安捷伦 1100 型高效液相色谱仪使用说明书。3. 范围：适用于安捷伦 1100 型高效液相色谱仪的操作管理。4. 责任：仪器使用者对本规程的实施负责，QC 主任负责监督该操作规程的正确执行。5. 正文：5.1.操作步骤5.1.1.打开计算机，进入 windows 英文操作系统
2、，并运行 Bootp Sever 程序。5.1.2.开启液相色谱仪主机5.1.3.依次打开 1100 LC 自动进样器、泵及所需要使用的检测器等各模块的电源开关。待各模块自检完毕后，双击 Instrument Online 图标，色谱工作站自动与 1100LC 接通，并出现Configuration 对话框，选中左测栏内需用的模块图标，单击 add，便可进入右测的使用状态；选中右测栏内不需用模块的图标，单击 remove，便可使之进入左测栏内的不使用状态。5.1.4.把所需要的流动相经过过滤后放入溶剂瓶中。5.1.5.单击 pump 图标，出现参数设定菜单，选中 Setup pump，设置流速
3、 Flow 为5.0ml/min、Stop Time、以及流动相的比例，逆时针打开 Purge 阀。单击 Pump Control 选项，选中 on，单击 OK，开始脱气至通道无气泡为止。5.1.6.开启泵的在线洗脱，用 10%异丙醇溶液清洗，必要时从清洗液的流出管口用注射器抽一下，使得其流速为 35 滴/分钟。5.1.7.单击 Pump Control 选中 off，关泵，顺时针旋转关闭 Purge 阀。5.1.8.单击 Pump 图标，单击 Setup Pump 选项，进入 pump 编辑画面，设流速、Stop Time（要超过组分的保留时间） 、以及流动相在各个通道的比例、最高柱压和最低
4、柱压等，单击“OK” 。5.1.9.单击泵下面的图标，输入各个溶剂瓶内的实际体积（Solvent Bottles Filling） ，以及 Prevent Analysis if Level Falls Below Liter，单击“OK” 。5.2.数据采集方法编辑：5.2.1.编辑完整的方法：从“Method”菜单中选择“Edit entire method”项，自动弹出各个需要编辑的项目。5.2.2.自动进样器项目：选择 Injection With Needle Wash、Injection Volume 以及清洗液所在瓶子的编号 Wash Vial 等，单击“OK” 。5.2.3.泵
5、项目：见 5.1.8.和 5.1.9.内容。5.2.4.柱项目：设置柱温箱的温度或程序升温参数等。5.2.5.检测器的项目：若使用紫外检测器，则需要编辑检测波长等参数；若使用荧光检测器，则需要编辑激发波长和发射波长等参数等，单击“OK” 。5.2.6.编辑全部完成后，单击 File，并从菜单中选择 Save method as，给所编辑的方法命名并保存之。5.2.7.单击 Instrument，并从菜单中选择 System On，开始运行系统，此时，将要使用的体系的图标均为绿色。5.3.进样5.3.1.将已经处理好的盛放有样品待测溶液的小瓶放入样品盘中，注意小瓶口处的隔膜垫一定要 朝下对着待测
6、溶液放置，瓶口盖子不可旋得太紧。5.3.2.单个进样 5.3.2.1.单击单个瓶子的图标，弹出对话框，依次选择自动进样、前缀（Prefix） 、记数（Counter）通常从 1 开始、样品瓶在样品盘中的位置号 Location Vial 等参数，编好后，点击 Run Method，仪器便开始自动操作。5.3.2.2.点击 ? 图标，可以对看到色谱吸收曲线的绘制过程，通常前两针进样所得到的色谱吸收曲线是不太可靠的的，因为仪器此时并未完全进入平稳状态；可以用标样进行重复操作直至得到可靠的色谱吸收曲线，然后在进行多样品连续进样的编程。5.3.3.多个进样5.3.3.1.单击三个瓶子的图标，弹出对话框
7、；点击其下面单个瓶子的图标，选择 Sequence Table，依次编辑顺序号、瓶号 Vial、样品名称 Sample Name、方法名称 Method Name 、进样次数、进样体积等等参数，检查无误后，点击 Run Method，仪器便开始自动运行已经编制好的操作 Sequence。5.4.关机5.4.1.分析完毕后，单击仪器 STOP 按钮停止采集运行，依次退出当前窗口，听见“嘀”声后，表明仪器已经退出数据采集工作。5.4.2.单击泵图标，调整有关参数，用适当的溶剂清洗色谱系统；溶剂的选择、置换与混合请参考下表。 不可互相置换的溶剂组可能发生的问题应采取的措施水与低极性溶剂（正己烷、氯仿
8、等）乳浊、分层先用异丙醇或丙酮置换缓冲溶液与有机溶剂（甲醇、乙腈、四氢呋喃）析出沉淀先用水置换稀硝酸和乙醇发生反应先用水置换各个通道用所选择的溶剂冲洗干净后（每个通道冲洗 1020 分钟，柱压高时需要多冲洗） ，最后再用甲醇冲洗。5.4.3.单击 Instrument，并从菜单中选择 System Off 关闭系统。依次关闭自动进样器、检测器、泵和柱温箱电源等各模块的电源开关。5.5.报告编制5.5.1.单击 Report，选中 Report Edit，进行色谱报告格式的编辑，然后给所编制好的报告格式命名。5.5.2.从 Postrun Analysis 进入，选中需要打印的色谱文件，双击之，
9、出现对话框，单击Analyze，打开所得到的色谱图，使用已经编制好的报告格式，打印预览；满意时，便可以打印输出图谱报告了；不满意时，右击并选中 Displaysetting，根据色谱峰的高度及保留时间的长短，调整打印坐标的设置，预览满意后，便可打印。5.6.标准工作曲线的编制5.6.1.单击 Calibration，选中 New Calibration Table，输入标准化合物的名称和各个浓度值；单击 File 并选中 Load Single 调出第一针色谱图，进行积分。5.6.2.单击 File 并选中平行针，单击 Calibration 并选中 Recalibration，设置 Leve
10、l 为1，选 Average，OK。5.6.3.重复 5.6.2.的操作，将三针进样进行平均。5.6.4.单击 File 并选中 Load Single 调出第二针色谱图，进行积分。单击 Calibration 并选中 Add Level，输入浓度值，OK。5.6.5.单击 Calibration 并选中 Recalibration，设置 Level 为 2，选 Average，OK。5.6.6.重复 5.6.5.的操作，将三针进样进行平均。5.6.7.同理调出并处理其他标准样针后，单击 File，选中 Print Calibration Table Curves，便可打印出标准工作曲线。5.
11、7.退出并关闭电脑系统，作好使用登记。5.6.5.Batch Processing，选中 Wizard 并单击 New，建立新的标准工作曲线模式。从 Method File 起，编制开始检测的盘号、瓶号等参数，点击 Next，出现 Batch table Wizard 对话框，设置样品数量、样品种类（Unknown only、Standard only 还是 Standard & Unknown ）等参数，点击 Next，设置样品名称、文件名称等参数，打开。5.6.3.设置平衡曲线的数目 Number of Calibration Levels，标准样的个数（点数）Number of Stan
12、dard Sample Vials，以及重复次数 Repetation per Run5.6.4.完成上述操作后，点击左侧的 Batch Start 图标，点击工具栏内的 Method 并选中Data Analysis，从 Parameters 中选中 Quantitative of Calibration .5.再用适宜的溶剂再依次关闭系统控制器、和微机的电源，作好使用登记。与电脑工作站失去连接。对流速各 LC 单元回零后图格式及5.4.3.选项， 选定泵参数。仪器的组成及电源：本仪器由 2 台 LC-10ATVP 泵、SPD10AVP 紫外检测器、SCL10AVP 系统控制器、CTO10A
13、SVP5.0 色谱工作站组成；电源由 220 伏交流净化稳压电源提供。5.1.仪器操作：依次打开泵、检测器、柱温箱、系统控制器的电源开关，将工作站电脑置开机状态。5.2.双击电脑桌面 CLASSVP 快捷图标，选择并点击 instrument 图标进入工作画面。5.3.在 File 项下打开 Methed，并在其项下选 Thstrument Set up 设置色谱条件（泵压力、流速、运行时间、采样频率、柱温度、检测波长等） 。5.4.在 Control 项下点击 Single Run 键，输入文件编号、文件名称、方法名称等，单击仪器 OK 键开始进入准备进样状态。击 Start 钮，待屏幕下放显示 Witing for triger 后进样，进样阀手柄在 INJECT 位置时，插入注射器，然后将进样阀手柄置 LOAD 位置，推入供试品；再将进样阀手柄转置 INJECT 位置，分析的同时色谱工作站自动采集数据。 5.5.分析完毕后，单击仪器 STOP 按钮停止采集运行，依次退出当前窗口，听见“嘀”声后，表明仪器与电脑失去连接。5.6.各 LC 单元回零后，依次关闭检测器和柱温箱电源，再用适宜的溶剂清洗色谱系统；再依次关闭系统控制器、泵和微机的电源，作好使用登记。5.7. 关闭交流净化稳压电源。
