1、实验一、平菇多孢分离育种技术(一) (二)一、实验目的1.了解多孢分离制作母种与组织分离制母种的区别及意义2.掌握平菇多孢分离技术二、实验原理食用菌子实体生长健壮,八成熟时,可散发大量有性孢子,这些孢子在一定条件下,可相互配合,形成双核菌丝体,从而制取母种。多孢子分离技术是有性繁殖过程。通过这种方式可以选育出优良菌种,有时还可使退化的菌种复壮。三、实验步骤(一) 制备培养基马铃薯 200g,葡萄糖 20g,磷酸二氢钾 3g,硫酸镁 1.5g,VB1微量,琼脂 18g,水 1000mL,pH 值自然。按常规方法制试管斜面或三角瓶底面 0.5厚的琼脂板。(二)选择种菇选取生长健壮,八成熟,无病虫害
2、的平菇一朵待用。(三)收集有性担孢子在无菌条件下,拨出斜面试管口或瓶口的棉塞,在菌褶(猴头菇用菌刺)前端的五分之二处剪取约 1.52 2 的菌褶,用镊子挑取一片菌褶,贴附在已灭菌的斜面培养基正上方,迅速塞好棉塞。于 2426条件下恒温培养 6-24 小时后取出。(四) 孢子萌发培养及菌丝体纯化在酒精灯火焰附近去掉棉塞,用消毒小钩钩出管内的小片菇种,将棉塞连同试管口在火焰上灼烧后,迅速塞上棉塞,于 2426恒温培养 1 周,待孢子萌发,井长成成片菌丝后,切取生长迅速、无杂菌污染的菌丝团转管纯化,待菌丝长满管后便可扩大繁殖备用。四、作业1.多孢分离育种操作应注意什么?(种菇选择及整个过程无菌操作)2.多孢分离制作母种与组织分离制母种各自有什么优缺点?(多孢子分离制作母种优点:是有性繁殖过程,通过这种方式可以选育出优良菌种。其缺点操作繁琐,成功率低。组织分离制母种优点:是无性繁殖过程,操作简单,成功率高。缺点:多次组织分离制得的菌种易退化。 )