1、一、微生物在传统发酵技术中的应用,酵母菌（兼性厌氧）,毛霉（好氧）,乳酸菌（厌氧）,醋酸菌（好氧）,温度,考点探源,2(2012江苏，21)下列关于制作果酒、果醋和腐乳的叙述，合理的是 ( )。A在果酒发酵后期拧开瓶盖的间隔时间可延长B条件适宜时醋酸菌可将葡萄汁中的糖分解成醋酸C果酒发酵过程中发酵液密度会逐渐减大D将长满毛霉的豆腐装瓶腌制时，底层和近瓶口处需加 大用盐量,AB,下图所示是果酒和果醋制作的实验流程以及某同学设计的果酒和果醋的发酵装置。根据图示回答下列问题。,(1)完成图1中的制作流程。,醋酸发酵,(2)图2装置中的充气口在_过程中要关闭，某同学在实验时 为了密闭装置特意将瓶塞使劲
2、塞紧，并将充气口和排气口用夹子夹 紧，以便于发酵。但第二天观察时，发现瓶塞松了，他不明白其中 的原因，请帮助解释说明其原因。_ _。,酒精发酵,酵母菌进行无氧呼吸产生的二氧化碳使瓶中气体压强增大,(4)在醋酸发酵时，排气口排出的气体的来源是_。(5)若在果汁中含有醋酸菌，在酒精发酵旺盛时期，醋酸菌能否将果汁中的糖发酵为醋酸？说明理由。_。,剩余的空气、,醋酸菌有氧呼吸产生的二氧化碳,不能。因为酒精发酵时缺氧，会抑制醋酸菌的生长， 醋酸菌的发酵条件是氧气充足,二、微生物的基本技术 1制备培养基：计算称量溶化灭菌倒平板。(1)无菌技术：主要指消毒和灭菌。(2)倒平板操作：待培养基冷却至50 左右时
3、，在酒精灯火焰旁倒平板。,特别提醒 平板冷凝后，培养皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发；又可以防止培养皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。,2.平板划线操作的注意事项(1)每次划线之前都需要灼烧接种环灭菌。(2)灼烧接种环之后，要冷却后才能伸入菌液，以免 温度太高杀死菌种。(3)划线时最后一区域不要与第一区域相连。(4)划线用力大小要适当，防止用力过大将培养基 划破。,4平板划线操作：平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基 表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。,5稀释涂布平板法：先将菌液进行一系列梯度稀释后涂
4、布平板，在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散到培养基的表面，从而在培养基表面形成单个菌落。如图：,A将少许干酵母加入到新鲜的葡萄汁中 B将毛霉菌液接种在切成小块的鲜豆腐上 C将转基因植物叶片接种到无菌培养基上 D将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养基上,3(2012北京卷，5)高中生物学实验中，在接种时不进行严格 无菌操作对实验结果影响最大的一项是 ( )。,C,二、某种微生物的分离与计数 1分离选择培养基 2计数(1)土壤中分解尿素的细菌的分离与计数。筛选菌株：利用选择培养基筛选菌株。计数方法：活菌计数法和显微镜直接计数法。过程：土壤取样样品的稀释微生物的培养与观察。,(2)分解纤
5、维素的微生物的分离。 实验原理即：可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。 流程：土壤取样选择培养梯度稀释涂布平板挑选菌落。,3鉴定方法,特别提醒 平板划线法适用于微生物的纯化，但不能用于微生物的计数。稀释涂布平板法常用于活菌计数法，而显微镜直接计数法不能区分细菌的死活。土壤中纤维素分解菌的筛选流程中的“选择培养”是否需要，应根据样品中目的菌株数量的多少来确定。,【例】 从自然菌样筛选较理想的生产菌种的一般步骤是：采集菌样富集培养纯种分离性能测定。(1)不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化。培养嗜盐菌的菌样应从_ 环境采集。(2)
6、富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其在群落中的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择_ 的培养基，并在_条件下培养。,海滩等高盐,以淀粉为唯一碳源,高温,(3)下面两图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，请分析接种的具体方法。 获得图A效果的接种方法是_，获得图B效果的接种方法是_。(4) 接种前要进行_，在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在_条件下进行。,稀释涂布平板法,平板划线法,高压蒸汽灭菌,无菌,破题关键,一、酶的研究及应用1.酶活性（酶活力）测定的一般原理和方法 酶的活性（酶活力）通常以单位
7、时间内底物的消耗量或者在单位时间内 产物的生成量来表示。,考点探源,2.纤维素酶与果胶酶,均为一类酶,3.制备和应用固定化酶、固定化细胞 （1）直接使用酶、固定化酶和固定化细胞的差异,关键步骤,二、DNA和蛋白质技术 1.DNA的粗提取和鉴定方法（1）材料的选取：选用DNA含量相对较高的生物组织。（2）破碎细胞动物的红细胞，吸水破裂。植物细胞：加入洗涤剂、食盐后研磨。 （3）除去杂质的方法方法一：利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度的不 同，通过调节NaCl溶液的浓度除去溶于和不溶于NaCl溶液 中的杂质。,方法二：利用DNA对酶的耐受性，直接在滤液中加入嫩肉粉，反应1015 min，嫩
8、肉粉中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白质，而不会破坏DNA。 （3）DNA的析出：向处理后的滤液中加入与滤液体积相等的、冷却的酒精溶液（体积分数为95%），静置23 min，溶液中会出现白色丝状物，用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物。 （4）DNA的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。,（1）样品的预处理及粗分离,血红蛋白的提取和分离,2.纯化：凝胶色谱法和电泳法 凝胶色谱法的原理,电泳法原理：利用各种分子带电性质、分子大小，形状不同，实现分离,A.洗涤剂能瓦解细胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度 B.将DNA丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴后冷却变蓝 C.常温下菜花匀浆中有些酶类会影响DNA的提取 D.用玻璃棒缓慢搅拌滤液会导致DNA获得量减少,高考经典,1.（2012江苏，18）下列关于“DNA粗提取与鉴定实验”的叙 述，正确的是 （ ）。,C,2.（2011广东理综，5）以下关于猪血红蛋白提纯的描述，不 正确的是 （ ）。A.洗涤红细胞时，使用生理盐水可防止红细胞破裂B.猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核，提纯时杂蛋白较少C.血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测D.在凝胶色谱法分离过程中，血红蛋白比分子量较小的杂蛋 白移动慢,D,
