1、培养基及其制备方法1、营养肉汤培养基 胨 10g 肉浸液 1000ml 氯化钠 5g 取胨与氯化钠，加入肉浸液内，微温溶解后，调节 pH 为弱碱性，煮沸，滤清，调节pH 值使灭菌后为 7.20.2，分装， 115灭菌 30 分钟。 2、营养琼脂培养基 照上述营养肉汤培养基的处方及制法，加入 1520g 琼脂，调节 pH 值使灭菌后为7.20.2，分装，115灭菌 30 分钟。 3、虎红琼脂培养基胨 5g 虎红（四氯四碘荧光素） 0.0133g葡萄糖 10g （或 0.133虎红溶液 10ml） 磷酸二氢钾(KH2PO4) 1g 琼脂 1520g硫酸镁(MgSO4.7H2O) 0.5g 水 10
2、00ml除葡萄糖、虎红外，取上述成分，混合，加热溶化后，滤过，加入葡萄糖、虎红，分装，115灭菌 30 分钟。4 、酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基(YPD)胨 10g 琼脂 1520g酵母浸出粉 5g 水 1000ml葡萄糖 20g除葡萄糖外，取上述成分，混合，加热融化后，滤过，加入葡萄糖，分装，115 灭菌 15 分钟。5 、胆盐乳糖培养基(BL)胨 20g 牛胆盐 1.3g乳糖 5g （或去氧胆酸钠 0.25g）氯化钠 5g 水 100ml磷酸氢二钾(K2HPO4) 4.0g磷酸二氢钾(KH2PO4) 1.3g除乳糖、牛胆盐外，取上述成分,混合,加热使溶解,调节 pH 值使灭菌后为 7.40
3、.2,煮沸，滤清，加入乳糖、牛胆盐，分装，115灭菌 30 分钟。6 、曙红美亚甲蓝琼脂培养基(EMB)营养琼脂培养基 100ml 2曙红溶液 2ml20乳糖溶液 5ml 0.5亚甲蓝溶液 1.31.6ml取营养琼脂培养基，加热融化后，冷至 60,按无菌操作加入灭菌的其它三种溶液,摇匀，倾注平皿。7 、麦康凯琼脂培养基(MaCC)胨 20g 1中性红溶液 2.5ml乳糖 10g 琼脂 1520g 牛胆盐 5g 水 1000ml氯化钠 5g除乳糖、1中性红溶液、牛胆盐及琼脂外、取上述成分,混合，加热使溶解，调节 pH值使灭菌后为 7.20.2，加入琼脂，加热融化后，再加入其余各成分，摇匀，分装，
4、115灭菌 30 分钟，冷至约 60，倾注平皿。8 、三糖铁琼脂培养基(TSI)胨 20g 硫酸亚铁 0.2g牛肉浸出粉 5g 硫代硫酸钠 0.2g乳糖 10g 0.2酚红溶液 12.5ml蔗糖 10g 琼脂 1215g葡萄糖 1g 水 1000ml氯化钠 5g除三糖、0.2酚红溶液、琼脂外，取上述成分，混合，加热使溶解,调节 pH 值使灭菌后为 7.30.1，加入琼脂，加热融化后，滤过，再加入其余成分，摇匀，分装,115灭菌 30分钟，制成高底层(23cm)短斜面。9 、四硫磺酸钠亮绿增菌液(TTB)胨 5g 硫代硫酸钠 30g牛胆盐 1g 水 1000ml碳酸钙 10g取上述成分，混合，微
5、温使溶解，121灭菌 20 分钟。临用前，取上述培养基，每10ml 中加入碘溶液(取碘 6g 与碘化钾 5g，溶于 20ml 水中 )0.2ml 和 0.1亮绿溶液 0.1ml ，混匀。10 、沙门氏、志贺氏菌属琼脂培养基(SS)胨 5g 硫代硫酸钠 8.5g牛肉浸出粉 5g 1中性红溶液 2.5ml乳糖 10g 0.1亮绿溶液 0.33ml牛胆盐 8.5g 琼脂 20g枸橼酚钠 8.5g 水 1000ml枸橼酸铁铵 1g 除糖、指示剂、琼脂外，取上述成分混合，加热使溶解，调节 pH 值使灭菌后为 7.2 0.1，滤过，加入琼脂，加热融化后，121灭菌 20 分钟，再加入其余成分，摇匀，冷至约
6、 60，倾注平皿。11、十六烷三甲基溴化铵琼脂培养基胨 10g 牛肉浸出粉 3g氯化钠 5g 琼脂 1520g十六烷三甲基溴化铵 0.3g 水 1000ml除琼脂外，取上述成分混合，微温使溶解，调节 pH 值使灭菌后为7.50.1，加入琼脂，加热熔化后，分装，121灭菌20分钟，冷至约60 ，倾注平皿。12、亚碲酸盐肉汤培养基临用前，取灭菌的营养肉汤培养基，每100ml 中加入新配制的 1亚碲酸钠（钾）溶液0.2ml，混匀，即得。13、卵黄高盐琼脂培养基胨 6g 10氯化钠卵黄液 100ml牛肉浸出粉 1.8g 琼脂 23g氯化钠 30g 水 650ml除10氯化钠卵黄液外，取上述成分混合，微
7、温使溶解,调节 pH 值使灭菌后为7.60.1。121灭菌20分钟，待冷至约60 ，以无菌操作加入10氯化钠卵黄液,充分摇匀,倾注平皿。10氯化钠卵黄液的制备 取新鲜鸡蛋一个，以无菌操作取出卵黄，放入10灭菌氯化钠溶液100ml 中，充分振摇，即得。14、甘露醇高盐琼脂培养基胨 10g 1酚红溶液 2.5ml牛肉浸出粉 1g 琼脂 1520g甘露醇 10g 水 1000ml氯化钠 75g除甘露醇、1酚红溶液及琼脂外,取上述成分混合，微温使溶解，调节 pH 值使灭菌后为7.40.2，加入琼脂，加热融化后，滤过，分装，115灭菌30分钟，冷至约60,倾注平皿。15、蛋白胨水培养基胰蛋白胨 10g
8、水 1000ml氯化钠 5g取上述成分混合，加热融化，调节 pH 值使灭菌后为 7.30.1，分装于小试管中,121灭菌20分钟。16、磷酸盐葡萄糖胨水培养基胨 7g 葡萄糖 5g磷酸氢二钾(K2HPO4) 3.8g 水 1000ml取上述成分混合，微温使溶解，调节 pH 值使灭菌后为 7.30.1，分装于小试管中，121灭菌 15分钟。17、枸橼酸盐培养基氯化钠 5g 枸橼酸钠（无水） 2g硫酸镁(MgSO47H2O) 0.2g 溴麝香草酚蓝指示液 20ml磷酸氢二钾(K2HPO4) 0.8g 琼脂 1520g磷酸二氢铵(NH4H2PO4) 1g 水 1000ml除溴麝香草酚蓝和琼脂外，取上
9、述成分，混微温使溶解,调节 pH 值使灭菌后为6.90.1，加入琼脂，加热融化，加入指示剂混匀。分装于小试管中，121灭菌15分钟，置成斜面。注：所用琼脂应不含游离糖，用前用水浸泡冲洗。18、糖、醇发酵培养基基础液胨 10g 0.5酸性复红指示剂 10ml糖、醇 0.5 （或溴麝香草酚蓝指示液6ml ）氯化钠 5g 水 1000ml取胨和氯化钠加入水中，微温使溶解，调节 pH 值使灭菌后为7.4,加入指示剂混匀,分装每瓶100ml，121灭菌15分钟。配制葡萄糖发酵管时，于100ml 基础液中加入0.5g 葡萄糖 ,分装于含杜氏管(Durham)的小试管中。121灭菌15分钟,配制其它糖醇发酵
10、管时,将各种糖醇分别配成10溶液,与基础液同时于121灭菌15分钟。以无菌操作将5ml 糖醇溶液加入 100ml 基础液内,分装于灭菌小试管中。注：糖醇溶液亦可采用薄膜过滤法除菌。19、5乳糖发酵管胨 0.2g 乳糖 5g氯化钠 0.3g 溴麝香草酚蓝指示液 0.6ml磷酸氢二钠 0.2g 水 1000ml除乳糖和指示剂外，取上述成分，混合，微温使溶解，调节 pH 值使灭菌后为7.4,加入乳糖及指示剂，混匀，分装于含杜氏管的灭菌小试管中，115灭菌15分钟。20、尿素琼脂培养基胨 1g 葡萄糖 1g氯化钠 5g 20尿素溶液 1000ml磷酸二氢钾(KH2PO4) 2g 琼脂 20g0.2酚红
11、溶液 6ml 水 1000ml除尿素和琼脂外，取上述成分，混合，调节 pH 值使灭菌后为7.20.1，加入琼脂，加热溶化并分装于锥形瓶，121灭菌20分钟。冷至5055,加入经薄膜过滤除菌的尿素溶液，混匀。尿素的最终浓度为2，分装于灭菌试管中，置成斜面。21、氰化钾培养基胨 3g 磷酸氢二钠(Na2HPO4) 5.64g氯化钠 5g 氰化钾试液磷酸二氢钾(KH2PO4) 0.225g 水 1000ml除氰化钾试液外，取上述成分，混合,调节 pH 值使灭菌后为7.50.1，121灭菌20分钟，冷却后，每100ml 培养基中加入氰化钾试液1.5ml,分装于12100mm 灭菌试管内，每管4ml，立
12、即用灭菌橡皮塞塞紧，置4保存。同时，以不加氰化钾试液的培养基作为对照培养基，分装于灭菌试管中。22、赖氨酸脱羧酶试验培养基胨 5g 1.6溴甲酚紫乙醇溶液 1ml酵母浸出粉 3g L-赖氨酸(DL- 赖氨酸) 0.5(1g)/100ml葡萄糖 1g 水 1000ml除赖氨酸外，取上述成分，混合，加热溶解后分装，每瓶100ml 。加入 L-赖氨酸0.5g（DL-赖氨酸1g）调节 pH 值使灭菌后为6.8,同时以不加赖氨酸培养基作为对照。分装于灭菌的小试管内，每管1ml 并滴加一层液体石蜡，121灭菌10分钟。23、绿脓菌素(pyocyanin)测定用培养基（PDP 琼脂）胨 20g 甘油 10m
13、l氯化镁（无水） 1.4g 琼脂 1820g硫酸钾（无水） 10g 水 1000ml取胨、氯化镁和硫酸钾加入水中，微温使深解。调节 pH 值使灭菌后为7.30.1，加入甘油及琼脂，加热溶解，121灭菌20分钟，置成斜面。24、明胶培养基胨 5g 明胶 120g牛肉浸出粉 3g 水 1000ml取上述成分加入水中，浸泡约20分钟，随时搅拌，加热使溶解，调节 pH 值使灭菌后为7.30.1，分装于小试管中，115灭菌20分钟。25、硝酸盐胨水培养基胨 10g 亚硝酸钠 0.5g酵母浸出粉 3g 水 1000ml硝酸钾 2g取胨及酵母浸出粉加入水中，微温使溶解，调节 pH 值使灭菌后为7.30.1，加入硝酸钾和亚硝酸钠溶解，混匀。分装于含杜氏管的小试管中，115灭菌20分钟。26、胆盐硫乳琼脂培养基(DHL)胨 20g 枸橼酸钠 1g牛肉浸出粉 3g 枸橼酸铁铵 1g乳糖 10g 1中性红溶液 3ml蔗糖 10g 琼脂 1820g去氧胆酸钠 1g 水 1000ml硫代硫酸钠 2.3g除糖、1中性红溶液及琼脂外,取上述成分混合，微温使溶解，调节 pH 值使灭菌后为7.20.1，加入琼脂,加热融化后,再加入其余成分，摇匀，冷至约 60，倾注平皿。
