1、不明原因习惯性流产患者 Th1/Th2 细胞亚群的研究作者:王雪楠,彭存旭,张海苓单位:济宁医学院附属医院,山东 济宁【摘要】 目的:通过对 Th1/Th2 细胞亚群分泌的不同细胞因子的研究,探讨不明原因习惯性流产患者体内 Th1/Th2 细胞亚群的变化。方法:用放射免疫法(RIA)检测了 38 例不明原因习惯性流产患者血清中 Th1 型细胞分泌的细胞因子IL2 、IFN 和 Th2 型细胞分泌的细胞因子 IL10 的水平变化。结果:不明原因习惯性流产患者血清中 Th1 型细胞分泌的细胞因子 IL2 和 IFN 的水平分别为(36.7616.39)pg/ml 和(73.35109.8)pg/m
2、l,显著高于正常对照组(5.23.9)pg/ml 和(13.96.1)pg/ml(P0.05);Th2 型细胞分泌的细胞因子 IL10 的水平为(6.84.1)pg/ml,显著低于正常对照组(42.567.9)pg/ml(P0.05)。结论:不明原因习惯性流产患者体内 Th1/Th2 细胞亚群发生了 Th2 向 Th1 的漂移,为该病的诊疗及病情监测提供了新思路。 【关键词】 习惯性流产;Th1/Th2 细胞亚群;细胞因子习惯性流产是一种常见的病理妊娠,其已知病因有遗传因素、内分泌失调、内生殖器解剖异常、感染、环境等,但 50以上的患者发病原因不明,被认为与免疫因素密切相关1 。通过临床观察和
3、动物实验已经证实了流产是一种免疫排斥现象,是母体免疫系统对胚胎半同种异体抗原产生了免疫排斥反应的结果2,3 。早在 20 世纪 80 年代已有学者提出抑制性 T 细胞(Ts)参与了母体胎儿免疫反应,目前辅助性 T 细胞(Th1/Th2 亚群)及其相关细胞因子的研究正日益受到人们的重视。本研究通过对 38 例原因不明习惯性流产患者血清中 Th1/Th2 型细胞因子IL2 、IFN 和 IL10 水平的变化探讨了原因不明习惯性流产患者体内 Th1/Th2 型细胞亚群的改变,旨在为习惯性流产的病情监测及免疫治疗提供理论依据。1 材料和方法1.1 研究对象 患者组 38 人,均为 2000 年 7 月
4、至 2005 年10 月来我院妇产科就诊,经临床确诊为习惯性流产患者,年龄24 岁43 岁,平均年龄 29.6 岁,自然流产次数不少于 3 次;对照组 17 人,为正常妊娠妇女,随访至分娩无流产现象发生,年龄 23 岁38 岁,平均年龄 28.3 岁。1.2 研究方法1.2.1 标本采集 患者组和正常对照组均无菌采集空腹静脉自凝血 5 ml,血液凝固后 3 000 r/min,5 min 后,分离血清置Eppendorf 管中,-20 冻存备测。1.2.2 标本检测 采用放射免疫法检测了 38 例患者组和 17例正常对照组血清中 IL2 、IFN 和 IL10 的水平,试剂由北京北方免疫研究所
5、提供,严格按照试剂盒说明书操作。1.2.3 统计学分析 结果以s 表示,数据分析采用两样本均数比较的 t 检验。2 结果不明原因习惯性流产患者血清中 Th1 型细胞分泌的细胞因子 IL2 和 IFN 的水平分别为(36.7616.39)pg/ml 和(73.35109.8)pg/ml,显著高于正常对照组(5.23.9)pg/ml 和(13.96.1)pg/ml,P0.05;Th2 型细胞分泌的细胞因子 IL10 的水平为(6.84.1)pg/ml,显著低于正常对照组(42.567.9)pg/ml,P0.05,见表 1。表 1 患者组和正常对照组血清 TH1/TH2 型细胞因子 IL2, IFN
6、,IL10 的水平(略)注:与正常对照组相比*P0.05。3 讨论正常妊娠是母体免疫系统对携有源于父方异体抗原的胚胎进行成功识别并产生保护性免疫应答,直至胎儿娩出的过程4 ,其中辅助性 T 细胞 Th1/Th2 亚群及其分泌的相关细胞因子起了很重要的调节作用。Th1 细胞亚群以高表达 IL2 和IFN 为主,可以增强杀伤细胞的细胞毒作用,激发迟发型超敏反应,介导细胞免疫应答。Th1 型细胞因子对滋养层细胞生长、胚胎发育和胎儿生存具有很强的抑制作用。Th2 细胞亚群则以表达 IL10 、IL4 和 IL6 为主,介导体液免疫应答,可刺激滋养层细胞生长、诱导母体对胎儿的免疫耐受等,促进妊娠成功。T
7、h1/Th2 平衡状态的失调与微生物感染、肿瘤免疫逃逸、自身免疫性疾病的发生和移植排斥反应等密切相关,也是决定妊娠发展方向的重要因素之一5 。Wegmann 等6早在 1993 已在动物实验中证实妊娠母鼠外周血淋巴细胞分泌的细胞因子 IL4 、IL10 和 IL5 的水平明显升高,而 IFN 的水平降低,由此他们提出了正常妊娠是以 Th2型细胞因子为主的生理现象。本研究采用放射免疫法对不明原因习惯性流产患者血清中 Th1 型细胞因子 IL2 、IFN 和Th2 型细胞因子 IL10 的水平变化进行了探讨,发现 Th1 型细胞因子 IL2 和 IFN 的水平都显著高于正常对照组,而 Th2 型细
8、胞因子 IL10 的水平显著低于对照组。提示了不明原因习惯性流产患者体内发生了 Th1/Th2 细胞亚群间的漂移,相应细胞因子的网络调节作用失衡。高表达的 Th1 型细胞因子IL2 能促使 NK 细胞转化为淋巴因子激活杀伤细胞(LAKC),可非特异性地溶解滋养层细胞,造成胚胎吸收而导致流产;IFN 可以增强胎儿人类白细胞抗原(HLA)分子的表达,打破了机体正常妊娠的免疫耐受状态,同时抑制了滋养层细胞的生长,导致了胎儿死亡。还有学者认为细胞因子并非直接作用于滋养层细胞引起流产,而是通过刺激母体子宫血管内皮细胞高表达 fg12,启动了凝血过程,导致了血栓形成及炎症反应,最终导致胎儿死亡7 。IL1
9、0 是由细胞因子合成抑制因子(cytokine synthesis inhibitory factor, CSIF)更名而来,是 1989 年 Fiorention 等研究发现的,它的免疫调节作用是双向的,既可激活也可以抑制,以抑制为主8 。正常妊娠时,它一方面可以直接抑制 NK 细胞和 Th1 型细胞分泌细胞因子,同时还可以通过树突状细胞、巨噬细胞等抗原递呈细胞(APC)有效抑制抗原递呈和免疫共刺激信号的产生,从而诱导了胎儿免疫耐受9 。本研究发现习惯性流产患者血清中 Th2 型细胞因子IL10 的水平明显下降,提示了 Th2 型细胞亚群向 Th1 亚群的漂移,使相关细胞因子的免疫调节异常,
10、导致了妊娠失败。已有报道使用外源性细胞因子对原因不明复发性流产患者进行探索治疗,并取得了一定疗效的报道10,11 ,推测与补充或逆转了 Th1/Th2 亚群的免疫平衡有关。本研究为进一步探讨不明原因习惯性流产的发病机制及其病情监测和免疫治疗提供了理论依据。【参考文献】1 Mowbray JF, Underwood JL. Immunology of abortionJ. Clinical IXP Immunol,1985,60(1):17. 2 Ramhorst R,Agriello E, Zitterman S, et al. Is the paternal monocular cells
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12、华,等.T 辅助细胞 1、2 细胞因子平衡与正常妊娠及习惯性流产关系的初步探讨J.中华妇产科杂志,2000,35(8):473475. 5 Raghupathy R. Th1type immunity is incompatible with successful pregnancyJ. Immunol Today,1997,18:478482. 6 Wegmann TG, Lin H,Guilbert L, et al. Bidirectional cytokine interaction in the maternalfetal relationship is successful pre
13、gnancy a Th2 phenomenonJ. Immunol Today,1993,14:353356.7 Clark DA, Chaouat G, Arck PC, et al. Cytokinedependent abortion in CBAXDBA/2 mice is mediated by the procoagulant fg 12 prothombinaseJ. J Immunol,1998,160:545549. 8 Bry K, Lappalainen U. Interleukin4 and transforming growth factor modulate the
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