1、卵形鲳鲹海水池塘混养研究主要研究内容：1、本研究混养模式理化、生物环境；2、本研究混养模式 N、P 收支及转化率；3、本研究混养模式 能量收支及转化率；4、基于 C、N 稳定同位素定性定量分析卵形鲳鲹饲料、粪便、残饵去向，从机理水平上解析本研究混养模式的优劣。5、其他。工作展开及细化方案如下：相关文献资料的查阅整理归纳，初步从理论上确定卵形鲳鲹与篮子鱼、鲻鱼、青蟹及斑节对虾的合理搭配比例，各混养品种种苗的科学投放顺序及种苗规格，以及各阶段投喂饲料的种类。放苗时间 4月5 月，每 667m2先投放南美白对虾苗 2万尾3 万尾,10 d20 d后再投放 2.5 cm3 cm的淡化卵形鲳鲹苗 1 5
2、00尾2 000尾,h2m,S=525,T=2233, pH=6.89.6,DO=2.5mg/L,养殖周期 120天左右，Tra=30-40cm。其他。相关生产管理、气象资料的收集，获取降雨、太阳总辐射、进出水及养殖水体量，主养生物放养、收获情况（数量、规格、种类及重量等） ，各阶段投饲情况（饲料种类、投喂量和投喂频率等） ，微生物制剂(EM 菌等)、底质改良剂投放等。进水用 60目80 目筛网过滤, 每 667 m2泼洒 120 kg150 kg生石灰进行消毒,3 d后将水排干,再进水 60 cm80 cm；投苗前 20 d,每 667 m2施 100 kg150 kg发酵有机肥(添加 EM
3、菌等)进行肥水； 4月、5 月卵形鲳鲹放苗，前期不用投料, 10 d后开始投喂 10%全价配合饲料, 混养生物不再另行投饵；养殖中期加开增氧机,每 10 d15 d使用优质底改、 EM菌、光合菌等；到 7月,鱼重达到 250 g基本可达上市。其他。 采样周期：10d；采样点：(进水口、出水口、投饲区、中央区)*（表层、1/2 透明度和底层）；T-表层水温表测量；S-盐度计测定；DO-溶氧仪测定；pH-pH 计测定；Tra-透明度盘观测。初级生产力-用黑白瓶法测定。每次采样测定 1次。瓶容积为 150mL,分三层挂于水中,分别为表层、1/2 透明度和底层。每层挂黑瓶 1个、白瓶 2个,装采自各层
4、的水样,同时测初始溶解氧。05:00 开始挂瓶,24 h 后摘瓶测定溶解氧。根据当量关系,按照 1gO2=6.1g浮游植物湿重,1mgO 2=14.56J,利用黑白瓶法计算出浮游植物的初级生产力,并计算出能值。其他。现场样品采集样品预处理样品实验室处理分析数据记录。水样（包括降雨、进出水及养殖水体水样）：叶绿素水样的采集。从放苗到收获，每 10 天采集一次。分别在混养池塘和单养池塘设定的采样点及深度，用采水器采集水样各 500ml 碳酸镁固定冷藏，带回实验室，立即测定。浮游生物水样的采集。从放苗到收获，每 10 天采集一次。分别在混养池塘和单养池塘设定的采样点及深度，用采水器采集水样各 100
5、0ml，取 1000ml水样加入 10ml 鲁哥氏液（5 克碘和 10克碘化钾溶于 85mL蒸馏水中，碘的总浓度为 150mg/mL。 ）固定冷藏，带回实验室用于浮游植物的种类鉴定和计数。微生物水样的采集。从放苗到收获，每 10 天采集一次。分别在混养池塘和单养池塘设定的采样点及深度采集水样，然后装在已灭菌的样品瓶中，冷藏带回实验室进行种类鉴定和计数。采样时间每次均在上午 9 点 30 分左右。其它指标水样采集。从放苗到收获，每 10 天采集一次，分别在混养池塘和单养池塘设定的采样点及深度采集水样，浓硫酸（1:3）酸化、冷藏100mL 水样进行 COD测定；消解器消解 50mL/指标进行 TP
6、、TN、NH 4+-N、NO 3-N、NO 2-N、PO 43-P测定；现场大量水样隔膜抽滤（过滤膜为孔径 0.45m GF/C Whatman玻璃纤维素微孔滤膜，450 度灼烧 4 h，滤膜使用前应先用体积分数为 1%的盐酸浸泡 12h，然后用蒸馏水冲洗至中性，浸泡于蒸馏水中备用）滤渣 60，24h 烘干研磨过 60目筛子，1g 左右氧弹仪能量折算；其余加入甲醇 ：氯仿：水（10:5:4）溶液振荡摇匀，1800r/s 离心 10min，去除上清液。重复 3次以充分去除样品中的脂类。在最后一次脂类去除操作中加入 2 ml甲醇，离心获得的沉积物 60干燥，重新研磨称取 710-800g 装入小锡
7、囊 13C、 15N等测定数据记录。每次采样前用少量水样荡洗水样瓶 23 次，应在 2h 内测定各营养盐指标，若不能及时检测，应加入占水样体积 2的三氯甲烷，盖好瓶塞，剧烈震摇一会，放入冰箱 4低温保存。底泥样（包括间隙水样）实验初将直径 8cm、高 15cm的玻璃瓶置于每个采样点底部中央,每次采样收起,测量和收集瓶内底泥沉积物（或是潜水直采）冷藏预处理底栖生物、微生物等分析60，24h 烘干研磨部分TP、TN、NH 4+-N、NO3-N 、NO 2-N、PO 43-P、能量折算；部分过 60目筛子，加入甲醇 ：氯仿：水（10:5:4）溶液振荡摇匀， 1800r/s离心 10min，去除上清液
8、。重复 3次。在最后一次脂类去除操作中加入 2 ml甲醇，离心获得的沉积物 60干燥，重新研磨称取 710-800g 装入小锡囊 13C、 15N等测定数据记录。主要养殖生物样（鱼、虾、蟹等）冷藏预处理生物学特征（体长、体重等）测定个体 60下 24h烘干、粉碎TP、TN、能量折算；取部分肌肉于 70烘干至恒重，称量干重，研磨过 60目筛子，加入甲醇 氯仿水（10:5:4）溶液振荡摇匀，1800r/s 离心 10min，去除上清液。重复 3次以充分去除样品中的脂类。在最后一次脂类去除操作中加入 2 ml甲醇，离心获得的沉积物 60干燥，重新研磨称取 710-800g 装入小锡囊 13C、 15
9、N等测定数据记录。饲料、粪便、残饵样冷藏预处理60下 24h烘干、粉碎部分TP、TN、能量折算；部分 60，24h 烘干研磨过 60目筛子，加入甲醇 ：氯仿：水（10:5:4）溶液振荡摇匀，1800r/s 离心 10min，去除上清液。重复 3次以充分去除样品中的脂类。在最后一次脂类去除操作中加入 2 ml甲醇，离心获得的沉积物 60干燥，重新研磨称取 710-800g 装入小锡囊 13C、 15N等测定数据记录。其他样品。 （注意：以上部分样品兼做蛋白质、脂肪酸、灰分等的测定！）数据 Excel、SPSS 等处理。水样：每放一物种则采样一次，每次 5个平行(1+1)(对照组+实验组)*5(样
10、点)*50mL/ 指标 *5（TP、TN、NH 4+-N、NO 2-N、PO 43P）+X( 13C)+Y( 15N)*n（次）mL；X、Y 需保证足够的滤渣，n6。底泥样: (1+1)(对照组+实验组)*5(样点玻璃瓶)*n（次） 。主要养殖生物样：每放一个物种则采样一次，每个物种 10个平行则 Sum(1+1)(对照组+实验组)*10*(1+2+3+4+5)+10*5饲料、粪便、残饵样: 每放一物种则采样一次，每次 5个平行则 Sum(1+1)(对照组+实验组)*5*(1+2+3+4+5)+5*5其他样品：如底栖生物等。一、化学需氧量（COD）的测定碱性高锰酸钾法1、原理在碱性加热条件下，
11、用已知量并且是过量的高锰酸钾氧化海水中的需氧物质。然后在硫酸酸性条件下，用碘化钾还原过量的高锰酸钾和二氧化锰，所生成的游离碘用硫代硫酸钠标准溶液滴定。2、试剂除非另有说明，所用试剂均为分析纯，所用水均为蒸馏水或等效纯水。2.1 碘化钾(KI)。2.2 硫酸溶液，1+3：在搅拌下，将 1体积硫酸(1.84 g/mL)，慢慢加入 3体积水中，趁热滴加高锰钾溶液 C(1/5KMnO4)= 0.01mol/L 至溶液略呈微红色不褪为止，盛于试剂瓶中。2.3 氢氧化钠溶液：250g/L。 2.4 高锰酸钾溶液，C(1/5KMnO4) = 0.01mol/L：称取 3.2g高锰酸钾(KMnO4)，溶于 2
12、00mL水中，加热煮沸 10min，冷却，移入棕色试剂瓶中，稀释至 10L，摇匀。放置 7天左右，有玻璃砂芯漏斗（G4）过滤。2.5 碘酸钾标准溶液，C(KIO3) = 0.0100mol/L：称取 3.5667g 碘酸钾(KIO3)，基准试剂，预先在 120烘 2h，置于干燥器中冷却，溶于水中，移入 1000mL棕色容量瓶中，稀释至刻度，摇匀。置于阴暗处，有效期为 1个月。此溶液为0.100mol/L。使用时稀释 10倍，即得 0.0100mol/L碘酸钾标准溶液。注用于制备碘酸钾标准溶液的纯水和玻璃器皿须经煮沸处理，否则碘酸钾溶液易分解。2.6 硫代硫酸钠标准溶液， C(Na2S2O35H
13、2O)=0.01mol/L：称取 25g硫代硫酸钠(Na2S2O35H2O)，用刚煮沸冷却的水溶解，加入约 2g碳酸钠，移入棕色试剂瓶中，稀释至 10L，摇匀。置于阴凉处。浓度的标定：移取 10.00mL碘酸钾标准溶液 C(1/6KIO3) = 0.0100mol/L，沿壁流入 250mL碘量瓶中，用少量水冲洗瓶壁，加入 0.5g碘化钾，沿壁注入 1.0mL硫酸溶液（1+3） ，塞好瓶塞，轻荡混匀，加少许水封口，在暗处放置 2min，轻轻旋开瓶塞，沿壁加入 50mL水，在不断振摇下，用硫代硫酸钠溶液滴定至溶液呈淡黄色，加入 1mL淀粉溶液，继续滴定至溶液蓝色刚褪去为止。重复滴定，至两次滴定读数
14、差小于 0.05mL为止。取三份结果的平均值。按公式（1）计算其浓度：c(Na2S2O3)=10.000.0100/V（1）式（1）中：C(Na2S2O3) 硫代硫酸钠标准溶液浓度，mol/L；V 硫代硫酸钠标准溶液体积（减空白后） ，mL。 2.7 淀粉溶液，5g/L：称取 1g可溶性淀粉，用少量水搅成糊状，加入 100mL 煮沸的水，搅匀，继续煮至透明。冷却后加入 1mL 乙酸，稀释至 200mL，盛于试剂瓶中。3、仪器设备一般实验室常备仪器和设备。4、试样制备4.1 海水样品用玻璃或金属采样器采集，贮存于聚乙烯塑料瓶或硬质玻璃瓶中。4.2 试样量测量水样用量 100mL。5、操作步骤5.
15、1 取 100mL海水样于 250mL锥形瓶中（测平行双样，若有机物含量高，可少取水样，加蒸馏水稀释至 100mL） 。加入 1mL氢氧化钠溶液 （250gL） ，摇匀，加 10.00mL高锰酸钾溶液 C(1/5KMnO4) = 0.01mol/L，摇匀。5.2 于电热板上加热至沸，准确煮沸 10min (从冒出第一个气泡时开始计时)，然后迅速冷却至室温。 注水样加热完毕，应冷却至室温，再加入硫酸和碘化钾，否则游离碘挥发而造成误差。氨-次溴酸盐氧化法（在碱性介质中次嗅酸盐将氨氧化为亚硝酸盐.然后以重氮-偶氮分光光度法测亚硝酸盐氮的总量，扣除原有亚硝酸盐氮的浓度，得氨氮的浓度。 ） 。1、试剂及
16、其配制：铵标准储备溶液（100mg/L-N）:0.4716g (NH4)2SO4,1000ml容量瓶定容，加入1mlCHCl3混匀保存于棕色瓶中。铵标准使用溶液（10.0mg/L-N）: 取 10.0 ml铵标准贮备溶液于 100 ml量瓶定容混匀，临用前配制。氢氧化钠溶液(400g/L):称取 200 g NaOH溶于 1 000 ml水中，加热蒸发至500ml，盛于聚乙烯瓶中。盐酸溶液(1+1):将同体积盐酸(HCl,=1.19g/mL)与同体积的水混匀。嗅酸钾-嗅化钾贮备溶液:称取 2.8gKBr03和 20gKBr溶于 1000m水中，贮存于1000ml棕色试剂瓶中。次嗅酸钠溶液:量取
17、 1.0 mL嗅酸钾-嗅化钾贮备溶液于聚乙烯瓶中，加 49mL水和 3.0ml盐酸溶液混匀，盖紧摇匀，置于暗处。5min 后加人 50 ml氢氧化钠溶液，混匀，现配现用。磺胺溶液(2g/L):称取 2.0gNH2SO2C6H4NH2,溶于 1000mL盐酸溶液中，贮存于棕色试剂瓶中。盐酸萘乙二胺溶液(1.0 g/L):称取 0.50gC10H7NHCH2CH2NH22HCl，溶于 500ml水，贮存于棕色试剂瓶中，冰箱保存。2、仪器和设备如下:分光光度计;量瓶:容量 200 mL,100mL,500mL,l000mL;量筒:容量 50 ml,1000 ml;具塞锥形瓶:容量 100 ml;烧杯
18、:容量 50mL,100mL,500mL,l000mL;试剂瓶:容量 1 000ml;棕色 500 ml,1000ml;聚乙烯瓶:容量 250mL, 500mL;聚乙烯洗瓶:容量500mL;自动移液管:容量 1mL,5mL;刻度吸管:容 2mL,70ml;吸气球;玻璃棒:直径5mm，长 15cm;实验室常备仪器及设备。亚硝酸盐-萘乙二胺分光光度法（在酸性介质中亚硝酸盐与磺胺进行重氮化反应，产物再与盐酸萘乙二胺偶合生成红色偶氮染料，于 543nm测定吸光值。 ） 。1、试剂及其配制：磺胺溶液(10g/L):称取 5gNH2SO2C6H4NH2，溶于 350mL盐酸溶液(1+6)，用水稀释至 50
19、0mL，盛于棕色试剂瓶中。盐酸萘乙二胺溶液(1.0 g/L):称取 0.50gC10H7NHCH2CH2NH22HCl，溶于 500ml水，贮存于棕色试剂瓶中，冰箱保存。亚硝酸盐标准贮备溶液(100ug/mL-N):称取 0.4926gNaNO21000mL容量瓶定容混匀，加 1mLCHC13 混匀，贮于棕色试剂瓶中冰箱内保存。亚硝酸盐标准使用溶液(5.0ug/mL-N):移取 5.00mL亚硝酸盐标准贮备溶液100mL容量瓶定容混匀，临用前配制。2、仪器和设备前述。硝酸盐-镉柱还原法（水样通柱，将硝酸盐定量地还原为亚硝酸盐，然后按重氮-偶氮光度法测定亚硝酸盐氮的总量，扣除原有亚硝酸盐氮，得硝
20、酸盐氮的含量。） 。1、试剂及其配制镉屑:直径为 1 mm的镉屑、镉粒或海绵镉。盐酸溶液(2mol/L):量取 83.5mL直酸(HCl, =1.19g/mL)加水稀释至 500mL。硫酸铜溶液(10g/L):称取 10硫酸铜(CuSO 45H30) 1000mL容量瓶定容混匀。硝酸盐标准贮备溶液(100ug/mL):称取 0.7218gKNO3,1000mL容量瓶定容混匀，加 1mLCHC13 混合 1000mL棕色试剂瓶中冰箱保存。硝酸盐标准使用溶液(10 ug/mL):量取 10.0mL硝酸盐标准贮备溶液于 100 mL量瓶中定容混匀。临用前配制。氯化铵缓冲溶液:称 10gNH4Cl（优
21、级纯)溶于 1000mL水中，用约 1.5mL(NH3H2O, =0.90g/mL)调节 pH至 8.5(精密)。此溶液用量较大，可一次配制 5L。磺胺溶液(10g/L)同上。盐酸萘乙二胺溶液(1.0 g/L)：同上。活化溶液:量取 14mL硝酸盐标准贮备溶液于 1000mL量瓶中，加氯化铵缓冲溶液至标线，混匀，贮于试剂瓶中无机磷-磷钼蓝分光光度法（在酸性介质中，活性磷酸盐与钼酸铵反应生成磷钼黄，用抗坏血酸还原为磷钼蓝后，于 882 nm波长测定吸光值。 ） 。水样 TN-过硫酸钾氧化法（GB12763.4） 。1、原理水样在 60以上的水溶液中按下式反应，生成氢离子和氧。K2S2O8 + H
22、2O 2KHSO 4 + 1/2O2 KHSO4 K + + HSO4- HSO4- H +SO42-加入氢氧化钠用以中和氢离子，使过硫酸钾分解完全。在 120-124的碱性介质中，用过硫酸钾作氧化剂，不仅可将水中的氨氮和亚硝酸盐氮转化为硝酸盐，同时也将大部分有机氮转化为硝酸盐，而后用紫外分光光度计分别于波长 220nm和 275nm处测吸光度。其摩尔吸光系数为1.47103，从而计算总氮的含量。2、测定方法 2.1 有机氮和无机氮（氨氮、硝酸盐氮和亚硝酸盐氮）加和得之。2.2 过硫酸钾氧化紫外分光光度法。3、水样保存。固定水样后，在 24小时内测定。4、仪器与试剂：4.1 仪器：（1)紫外分
23、光光度计；(2)高蒸汽消毒器；(3)25ml 具塞磨口比色管4.2 试剂：(1) 碱性过硫酸钾：称取 40g过硫酸钾，15g 氢氧化钠，溶于水中,稀释至1000ml。贮于聚乙烯瓶中，(2) 1+9的盐酸(3) 硝酸钾标准贮备液：称取 0.7218g经 105-110烘干 4h硝酸钾溶于水中，移入 1000ml容量瓶中，定容。此溶液每毫升含 100微克硝酸盐氮。加入 2ml三氯甲烷为保护剂,稳定 6个月。(4) 硝酸钾标准使用液：吸取 10ml贮备液定容至 100ml。此溶液每毫升含 10微克硝酸盐氮。5、实验步骤：5.1 校准曲线的绘制分别吸取 0、0.50、1.00、2.00、3.00、5.
24、00、7.00、8.00ml 硝酸钾标准使用液于 25ml比色管中，稀释至 10ml。加入 5ml碱性过硫酸钾溶液，塞紧磨口塞，用纱布扎住，以防塞子蹦出。将比色管放入蒸汽压力消毒器内或家用压力锅中，加热半小时，放气使压力指针回零，然后升温至 120-124，开始计时，半小时后关闭。自然冷却，开阀放气，移去外盖，取出比色管放冷。加入 1+9盐酸 1ml，稀释至 25ml。在紫外分光光度计上，以水为参比，用 10mm石英比色皿分别在 220nm和275nm波长处测吸光度，绘制校准曲线。5.2 水样的测定取适量水样于 25ml比色管中，按与校准曲线相同的步骤（2-6）操作，测得吸光度，按曲线方程(y
25、=bx+a)计算总氮含量。水样 TP-过硫酸钾氧化法（GB12763.4） 。1、原理在中性条件下用过硫酸钾使试样消解，将所含磷全部氧化为正磷酸盐。在酸性介质中，正磷酸盐与钼酸铵反应，在锑盐存在下生成磷钼杂多酸后，立即被抗坏血酸还原，生成蓝色的络合物。2、试剂。本标准所用试剂除另有说明外，均应使用符合国家标准或专业标准的分析试剂和蒸馏水或同等纯度的水。2.1 硫酸(H 2SO4)，密度为 1.84gmL。2.2 硝酸(HNO 3)，密度为 1.4gmL。2.3 高氯酸(HClO 4)，优级纯，密度为 1.68gmL。2.4 硫酸(H 2SO4)，11。2.5 硫酸，约 c(1/2H2SO4)1
26、mo1L：将 27mL硫酸加入到 973mL水中。2.6 氢氧化钠(NaOH)，1mo1L 溶液：将 40g氢氧化钠溶于水并稀释至1000mL。2.7 氢氧化钠(NaOH)，6mo1L 溶液；将 240g氢氧化钠溶于水并稀释至1000mL。2.8 过硫酸钾，50gL 溶液：将 5g过硫酸钾(K 2S2O8)溶解干水，并稀释至100mL。2.9 抗坏血酸，100gL 溶液：10g 抗坏血酸(C 6H8O6)用水稀释至 100mL。贮于棕色试剂瓶。2.10 钼酸盐溶液：溶解 13g钼酸铵(NH 4)6Mo7O244H2O100mL水中。溶解0.35g酒石酸锑钾KSbC 4H4O7 1/2H2O于
27、100mL水中。在不断搅拌下把钼酸铵溶液徐徐加到 300mL硫酸中，加酒石酸锑钾溶液并且混合均匀。此溶液冷贮存于棕色试剂瓶中。2.11 浊度-色度补偿液：混合两体积硫酸(2.4)和一体积抗坏血酸溶液(2.9)。使用当天配制。2.12 磷标准贮备溶液：称取 0.21970.001g于 110干燥 2h在干燥器中放冷的磷酸二氢钾(KH 2PO4)，用水溶解后转移至 1000mL容量瓶中，加入大约 800mL水、加 5mL硫酸(2.4)用水稀释至标线并混匀。1.00mL 此标准溶液含 50.0g磷。2.13 磷标准使用溶液：将 10.0mL的磷标准溶液(2.12)转移至 250mL容量瓶中，用水稀释
28、至标线并混匀。1.00mL 此标准溶液含 2.0g 磷。使用当天配制。2.14 酚酞，10gL 溶液：0.5g 酚酞溶于 50mL95乙醇中。3、仪器。实验室常用仪器设备和下列仪器。3.1 一般压力锅(1.11.4kgcm2)、50mL 具塞(磨口)刻度管、分光光度计。注：所有玻璃器皿均应用稀盐酸或稀硝酸浸泡。4 采样和样品4.1 采取 500mL水样加入 1mL硫酸(3.1)调节样品 pH值，使之低于或等于 1，冷冻保存。注：含磷量较少的水样，不要用塑料瓶采样，因易磷酸盐吸附在塑料瓶壁上。4.2 试样的制备：取 25mL样品(5.1)于具塞刻度管中(4.2)。取时应仔细摇匀，以得到溶解部分和
29、悬浮部分均具有代表性的试样。如样品中含磷浓度较高，试样体积可以减少。5、分析步骤5.1 空白试样。按(5.2)的规定进行空白试验，用水代替试样，并加入与测定时 相同体积试剂。5.2 测定5.2.1 消解5.2.1.1 过硫酸钾消解：向(4.2)试样中加 4mL过硫酸钾(2.8)，将具塞刻度管的盖塞紧后，用一小块布和线将玻璃塞扎紧(或用其他方法固定)，放在大烧杯中置于高压蒸气消毒器(3.1)中加热，待压力达 1.1kgcm2，相应温度为 120时、保持 30min后停止加热。待压力表读数降至零后，取出放冷。然后用水稀释至标线。注：如用硫酸保存水样。当用过硫酸钾消解时，需先将试样调至中性。5.2.
30、2 发色分别向各份消解液中加入 1mL抗坏血酸溶液(2.9)混匀，30s 后加 2mL钼酸盐溶液(2.10)充分混匀。注：如试样中含有浊度或色度时，需配制一个空白试样(消解后用水稀释至标线)然后向试料中加入 3mL浊度色度补偿液(2.11)，但不加抗坏血酸溶液和钼酸盐溶液。然后从试料的吸光度中扣除空白试料的吸光度。砷大于 2mgL 干扰测定，用硫代硫酸钠去除。硫化物大于 2mgL 干扰测定，通氮气去除。铬大于 50mgL 干扰测定，用亚硫酸钠去除。5.2.3 分光光度测量室温下放置 15min后，使用光程为 30mm比色皿，在 700nm波长下，以水做参比，测定吸光度。扣除空白试验的吸光度后，
31、从工作曲线(5.2.4)上查得磷的含量。注：如显色时室温低于 13，可在 2030水花上显色 15min即可。5.2.4 工作曲线的绘制取 7支具塞刻度管(3.2)分别加入0.0，0.50，1.00，3.00，5.00，10.0，15.0mL 磷酸盐标准溶液(2.14)。加水至 25mL。然后按测定步骤(5.2)进行处理。以水做参比，测定吸光度。扣除空白试验的吸光度后，和对应的磷的含量绘制工作曲线。6、结果的表示总磷含量以 C(mgL)表示，按下式计算：总磷=m/v式中：m试样测得含磷量，g；V测定用试样体积，mL。其他样品 TN（凯氏定氮法）：1、 样品消化。称取试样 0.5 1g（含氮量 5 80mg） ，准确至 0.0002g，放入消化管中，加两片消化片（仪器自备）或 6.4g混合指示剂、12mL 硫酸，于 420在消煮炉上消化 1h，取出放凉后加入 30mL蒸馏水。2、 凯氏定氮仪测定。3、数据处理。其他样品 TP（Menzel 与 Corwin湿法氧化法）：充分消解后参考水样 TP测定。
