1、一、影响血液凝固的因素 二、红细胞渗透性溶血实验,生理学教研室,实验三,实验目的,观察某些因素对血液凝固的影响异物（棉花、纱布、石蜡油）温度（水浴、冰浴）抗凝物（肝素、草酸钾） 熟悉红细胞溶血现象,实验原理：生理止血功能,血管损伤,血管内皮下组织暴露,血小板激活 粘附、聚集、释放,血小板止血栓形成（初步止血）,血凝块形成（有效止血）,凝血系统激活,纤维蛋白形成,影响生理止血的因素,（1）影响凝血酶活性：肝素 （2）物理因素：接触面（纱布、石蜡油）温度（37、冰浴） （3）化学因素：抗凝剂：与Ca2+结合的草酸钾,实验步骤,1. 取7支试管，按表5-3处理试管，并在各试管上 做好标记。 2. 家
2、兔耳缘静脉注射3戊巴比妥钠1.0mL/kg，气管插管，一侧颈总动脉插管（动脉插管内先充满0.2肝素生理盐水）。 3将动脉插管内血液及生理盐水放净，向试管 内各注入2mL左右新鲜兔血（试管上标号编号和刻度），开始计时，并用拇指堵住管口倒转2次，使血液与试管内容物相混。,4自血液注入试管后每隔60s将各试管轻轻倾斜一次（倾斜45度角），观察其中的血液是否已凝固，发现其中的血液已呈凝胶状而不再流动时记录其时间。如超过30分钟血液仍未凝则视为“不凝”。 5以第一管的凝血时间为对照，比较其余各管 的凝血时间有何变化。 6最后向第7管内加入10%氯化钙溶液1滴，观察管内血液是否凝固。,实验步骤,表5-3
3、影响血液凝固的理化因素实验结果,2. 比较不同处理因素对血液凝固的影响，结合思考题（p91）分析原因，写实验报告。,1. 填写表5-3,实验后处理,1.实验前试管上做好实验标记、刻度标记。做好分工（放血、接血、计相互配合好）。 2.取血前，要先将动脉插管内的血液及生理盐水放净，再取新鲜血液进行后续试验。 3.血液加入试管后立即混匀、计时。 4.判定凝血的标准以试管倾斜45度，试管内血液不流动为准，仔细观察结果，记录凝血时间。 5.各试管应保持基本条件（试管口径、血量、温度）一致。不要人为地手握加温或反复摇动，以防外部条件影响实验结果。,注意事项,红细胞渗透溶血实验,家兔动脉血2ml，按表5-4
4、滴入红细胞悬 液1-2滴，轻轻摇匀1 1010支不同浓度NaCl溶液试管（低 高）静置30分钟,实验步骤,教师示教,完全溶血 管内液体完全红色透明部分溶血 上层红色透明下层红色不透明(混浊)不溶血 上层浅黄色或无色透明下层红色不透明,记录刚开始出现部分溶血及完全溶血时NaCl溶液浓度,结果观察,下次实验: 家兔呼吸运动的调节 预习要点： 1. 掌握呼吸运动的实验方法,各种理化因素 对呼吸运动的影响及其原理。 2. 熟悉Medlab生物信号采集处理系统的实验 记录和实验结果处理方法。,预习要求,内源性凝血,外源性凝血,XII XIIa,接触异物,XI XIa,X Xa, Ca2+,组织损伤释放,X,II IIa,纤维蛋白原 纤维蛋白,4ML离心试管,200UL一次性枪头,在试管2ML处划一条黑线 避免放血时不好操作,试管内放碎布样本 注意大概数量,冰浴示意图,
