1、 细胞凝集反应年级:13 级生科三班 姓名:高超 学号:201300140020科目：细胞生物学实验 同组者：樊晓航一，实验目的：1、了解细胞的表面结构。2、掌握细胞凝集的原理。3、掌握细胞凝集实验的操作方法。4、掌握普通光学显微镜的使用方法。二，实验原理：1、在细胞表面，组成细胞膜的糖脂和糖蛋白伸出寡糖链，形成细胞外被（糖萼） 。目前认为，细胞间的联系、细胞的生长和分化、肿瘤的发生与免疫反应都与细胞表面的分枝状糖分子有关。2、凝集素是一类含糖（少数例外）并能与糖专一结合的蛋白质，即糖蛋白，它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。凝集素能与细胞外被中的糖分子连接，在细胞间形成“桥”的作用，从而凝集
2、细胞。凝集素引起的细胞凝集，其细胞膜结构没有发生改变。与血液凝固中发生的复杂生化反应完全不同。3、竞争性抑制实验：凝集素能与不同的糖蛋白特异性结合，加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞凝集。三，实验器材与试剂：溶液：1%家兔红细胞悬液，土豆块茎制作的可溶性土豆凝集素粗提取液、PBS 缓冲溶液（磷酸缓冲溶液） 、柠檬酸钠溶液、0.9%的氯化钠溶液（生理盐水）器材：5ml 注射器、酒精棉球、双凹片、普通光学显微镜、托盘天平、滴管、离心管四，实验步骤：1、1%家兔红细胞悬液制备：用 5ml 无菌注射器先吸取 2ml 柠檬酸钠溶液抽取家兔耳缘静脉血液 1ml，加入 3ml 的 0.9%的氯化钠，3000r
3、/s 离心 5min，最后按沉淀的红细胞体积用 0.9%的氯化钠溶液配成 1%的红细胞悬液。2、土豆凝集素制备：称取去皮土豆块茎 2g，切成薄片，加 10mlPBS缓冲液，浸泡 2h，浸出粗提液中含有可溶性土豆凝集素。3、细胞凝集反应：双凹片左侧滴上豆凝集素 1 滴和 1%家兔红细胞悬液 1 滴；右侧滴 PBS 缓冲液 1 滴，1%家兔红细胞悬液 1 滴。将双凹片混匀，摇动，记下反应的时间并且拍出开始时，五分钟时，以及完全沉积时的照片。4，显微镜下观察细胞凝集以及对照组的细胞。五，实验结果记录如下:开始凝集时的照片显微镜下没有凝集的细胞凝集的细胞六，结果与分析：在使用双凹片的过程中因操作不熟练，经常造成两个孔中的液体混合。在使用双凹片时要注意摇动的技巧，不可前后或左右单一地摇动，应该一手固定，一手成环形方向摇动，使凹槽内的液体转动起来。
