1、过氧化氢含量的测定【原理】H2O2 与硫酸钛（或氯化钛）生成过氧化物钛复合物黄色沉淀，可被 H SO4 溶解后，在 415nm 波长下比色测定。在一定范围内，其颜色深浅与 H2O2 浓度呈线性关系。【仪器和用具】研钵；移液枪 0.2ml 和枪头，5ml1 支；容量瓶 10ml7 个，离心管 5ml8 支；离心机；分光光度计。【试剂】100mol/L H 2O2 试剂；2mol/L 硫酸；5%（W/V）硫酸钛；丙酮；浓氨水。30% H2O2 指的是过氧化氢溶液的质量比,其密度为 1.1g/cm3,而过氧化氢的分子量是34.02,通过这些参数，我们可以推算出 30%的过氧化氢的摩尔浓度为 9.7m
2、ol/L.【方法】1.制作标准曲线：取 10ml 离心管 7 支，顺序编号，并按表 40-1 加入试剂。表 40-1 测定 H2O2 浓度标准曲线配置表离 心 管 号试剂（ml）1 2 3 4 5 6 7100mol/L H 2O2 0 0.1 0.2 0.4 0.6 0.8 1.04下预冷丙酮 1.0 0.9 0.8 0.6 0.4 0.2 05%硫酸钛 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1浓氨水 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.23000r/min 离心 10min，弃去上清夜，留沉淀2mol 硫酸 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.0 5.
3、0待沉淀完全溶解后，将其小心转入 10ml 容量瓶中，并用蒸馏水少量多次冲洗离心管，将洗涤液合并后定容至 10ml 刻度，415nm 波长下比色。2.样品提取和测定：(1)称取新鲜植物组织 25g（视 H2O2 含量多少而定） ，按材料与提取剂11 的比例加入 4下预冷的丙酮和少许石英砂研磨成匀浆后，转入离心管 3000 r/min 下离心 10min，弃去残渣，上清液即为样品提取液。(2)用移液管吸取样品提取液 1ml，按表35-1 加入 5%硫酸钛和浓氨水，待沉淀形成后 3000rpm/min 离心 10min，弃去上清液。沉淀用丙酮反复洗涤 35 次，直到去除植物色素。(3)向洗涤后的沉淀中加入 2mol 硫酸 5ml，待完全溶解后，与标准曲线同样的方法定容并比色。3.结果计算：植物组织中 H2O2 含量(mol/g Fw)=CVtFW1式中 C标准曲线上查得样品中 H2O2 浓度（mol） ；Vt样品提取液总体积（ml） ；V1测定时用样品提取液体积（ ml） ；FW植物组织鲜重（g） 。
