1、手提 DNA 部分注意事项1、 裂解液要预热，以抑制 DNase，加速蛋白变性，促进 DNA 溶解。2、 酚一定要碱平衡。苯酚具有高度腐蚀性，飞溅到皮肤、粘膜和眼睛会造成损伤，因此应注意防护。3、 各操作步骤要轻柔，尽量减少 DNA 的人为降解。4、 取各上清时,不应贪多,以防非核酸类成分干扰。5、 异丙醇，乙醇.NaAc， KAc 等要预冷，以减少 DNA 的降解，促进 DNA 与蛋白等的分相及 DNA 沉淀。6、 提取 DNA 过程中所用到的试剂和器材要通过高压烤干等办法进行无核酸酶化处理。7、 所有试剂均用高压灭菌双蒸水配制。8、 用大口滴管或吸头操作，以尽量减少打断 DNA 的可能性。
2、* 0 K2 * m7 S9、 要用新鲜样品或液氮冷冻-80 度保存的样品。这样通过降低内切酶的活性DNA 的降解。/ I1 U6 y5 m$ F h! W8 f b10、 避免剧烈吸打 DNA，不能搅动基因组 DNA。11、 吸取基因组 DNA 时，要用专用的粗口吸头，普通吸头可能会切断 DNA 或造成 DNA 缺口。% c# % F+ R* A2 Z- g材料应适量，过多会影响裂解，导致 DNA 量少，纯度低针对不同材料，选择适当的裂解预处理方式：植物材料液氮研磨动物组织匀浆或液氮研磨组培细胞蛋白酶 K细菌溶菌酶破壁酵母破壁酶或玻璃珠高温温浴时，定时轻柔振荡当沉淀时间有限时，用预冷的乙醇或异丙醇沉淀，沉淀会更充分沉淀时加入 1/10 体积的 NaAc（pH5.2，3M ） ，有利于充分沉淀沉淀后应用 70的乙醇洗涤，以除去盐离子等晾干 DNA，让乙醇充分挥发（不要过分干燥）若长期储存建议使用 TE 缓冲液溶解TE 中的 EDTA 能螯和 Mg2+或 Mn2+离子，抑制 DNasepH 值为 8.0，可防止 DNA 发生酸解采用吸附材料吸附的方式分离 DNA 时，应提供相应的缓冲体系采用有机（酚/氯仿）抽提时应充分混匀，但动作要轻柔离心分离两相时，应保证一定的转速和时间针对不同材料的特点，在提取过程中辅以相应的去杂质的方法
